Antioksidan merupakan senyawa yang dapat meredam aktivitasradikal bebas. Antioksidan dapat membantu penyembuhan inflamasi,sehingga obat antiinflamasi dapat lebih efektif dengan memiliki aktivitasantioksidan. Daun rumput lidah lembu (Aneilema nudiflorum (L.) Wall) telahterbukti memiliki aktivitas antiinflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengujiaktivitas antioksidan daun rumput lidah lembu (A. nudiflorum) danmengetahui kandungan kimia yang terdapat di dalamnya. Pada uji aktivitasantioksidan yang dilakukan dengan metode penyemprotan menggunakanDPPH 0,2% dalam metanol, fraksi heksana, diklormetana, etil asetat, dan airmenunjukkan hasil yang positif. Pengujian aktivitas antioksidan denganmetode DPPH secara spektrofotometri UV-Vis terhadap fraksi airmenunjukkan IC50 = 27,01 μg/ml. Pemeriksaan kandungan kimia A.nudiflorum dilakukan menggunakan metode umum fitokimia dan kromatografilapis tipis. Hasil uji menunjukkan A. nudiflorum terdeteksi mengandungflavonoid, alkaloid, tanin, steroid dan terpen serta saponin.