Tumbuhan pulutan {Urena lobata Linn.) merupakan tumbuhan yanghidup dari daerah beriklim tropis sampai daerah yang beriklim subtropistermasuk Asia Tenggara. Tumbuhan ini termasuk ke dalam genus Urena darlfamili Malvaceae. Tumbuhan pulutan {Urena lobata Linn.) sering digunakanoleh masyarakat Indonesia sebagai ramuan obat tradisional.Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menentukan struktursenyawa kimia yang terdapat dalam daun pulutan {Urena lobata Linn.). ,Isolasi senyawa kimia yang terdapat dalam daun pulutan dilakukan dengancara merendam daun tersebut dalam petroleum eter disertai pengadukanagar senyawa yang terdapat dalam daun pulutan lebih larut. Filtrat petroleum eter yang diperoleh dipekatkan dan dilakukan uji bercak dengan 'menggunakan kromatografi lapis tipis (KIT) dengan peiarut pengembangyaitu n-heksana dan etil asetat dengan perbandingan 8:1. Ekstrak petroleumeter tersebut kemudlan disaring dengan karbon aktif untuk m'enarik pengotcryaitu klorofil. Pemisahan senyawa-senyawa kimia yang terdapat dalamekstrak petroleum eter dilakukan dengan kromatografi kolom lambat denganmenggunakan silika gel sebagai fasa diam dan fasa geraknya berupacampuran n-heksana dan etil asetat dengan kepolaran yang meningkat.Senyawa yang diperoleh dari hasil pemisahan dianalisis denganmenggunakan kromatografi lapis tipis (KIT) dan kromatografi gas (C5C).Senyawa kimia yang berhasil dilsolasi: dari fraksi petroleum eter adalahkomponen A dan komponen B. Setelah direkristalisasi, keduanya berupakt istal putih berbentuk jarum. Kedua komponen tersebut ditentukanstrukturnya dengan spektrofofometer infra merah (IR) dan spektrometermassa (MS). Komponen A merupakan suatu senyawa golongan triterpenyaitu friedelin dengan rumus molekul CsoHgpO sedangkan komponen Bmerupakan senyawa golongan steroid yaitu stigmasterol dengan rumusmolekul C29H48O dan (3-sitosterol dengan rumus molekul C29H50O.