Kanker adalah salah satu penyakit mematikan yang pengobatannya terus
dikembangkan. Apoptin adalah molekul protein yang berpotensi untuk dijadikan
obat kanker karena mempunyai aktivitas menginduksi proses kematian sel secara
selektif hanya pada sel kanker saja. Kloning apoptin telah berhasil dilakukan
dengan amplifkasi gen menggunakan PCR dengan menambahkan 12-histidin dan
8-arginin pada C-terminal kemudian diligase ke plasmid pOXGW dengan sistem
Gateway, lalu diekspresikan ke dalam bakteri Bacillus subtilis 168. Plasmid
pOXGW ? apoptin ? 12His8Arg dapat terekspresi di B. subtilis. Dalam penelitian
ini Bacillus subtilis yang membawa plasmid diproduksi pada medium dengan
variasi xylose sebagai substrat pemicu dan sebagai pembanding bakteri
Escherichia coli Bl21 Star? ditransformasi dengan plasmid pOGW ? apoptin ?
12His untuk kemudian dilakukan pemurnian. Hasil penelitian menunjukan
apoptin rekombinan dari B. subtilis 168 yaitu 568 μg/ml, sedikit lebih banyak dari
jumlah protein rekombinan E. coli Bl21 Star?, 421 μg/ml.
AbstractCancer is a deadly disease so that the medicinal treatment constantly
developed. Apoptin is a protein molecule that has potential to be used as a cancer
drug because of its activity to induce cell death selectively to the cancer cells
only. Cloning apoptin has been successfully performed by amplify gene using
PCR with 12-histidine and 8-arginine to be added at C-terminal then ligated into
plasmid pOXGW with Gateway system, and then expressed in Bacillus subtilis
168. Plasmids with pOXGW ? apop ? 12His8Arg can be expressed in B. subtilis.
In this study, Bacillus subtilis carrying plasmid was produced with variations of
xylose as substrate trigger on liquid medium and as a comparison, Escherichia
coli Bl21 Star? transformed with a plasmid pOGW ? apop ? 12His and then
performed for purification of apoptin. The results showed that the recombinant
apoptin obtain from B. subtilis 168 compared to Escherichia coli Bl21 Star? is
slightly higher, i.e. 568 μg/ml and 421 μg/ml, respectively.