Kulit adalah bagian terluar dari tubuh yang terpapar langsung ke lingkungan, sehinggakulit memiliki beragam mikrobiota yang bersifat komensal dan patogen yangberkontribusi terhadap kesehatan manusia. Analisa komposisi proporsi mikrobiotaprobiotik yang terdapat di kulit menarik untuk dikembangkan sebagai sumber potensialzat aktif dalam pengembangan farmasetika kosmetik dan perawatan kesehatan kulit.Galur – galur isolat bakteri dari sampel kulit pria dan wanita dewasa muda Indonesia darietnis Jawa telah dikarakterisasi pada penelitian sebelumnya. Galur – galur komensal yangdominan diisolasi dan kemudian diidentifikasi secara molekuler, yaitu empat galurbakteri Staphylococcus hominis MBF12 – 19J, Staphylococcus warneri MBF02 – 19J,Bacillus subtilis MBF10 – 19J, dan Micrococcus luteus MBF05 – 19J. Penelitian inidilakukan untuk memperoleh komposisi proporsi galur – galur bakteri probiotik komensaltersebut dengan menyelaraskan konsentrasi masing – masing dan mengoptimasi waktuinkubasi bersama di dalam koktail bakteri. Viabilitas masing – masing bakteri diuji secarakualitatif dengan Deferred Growth Inhibition Assay (DGIA) yang termodifikasi.Kuantifikasi berbasis asam nukleat dilakukan menggunakan Real-time qPCR dengansuatu primer yang dirancang spesifik bagi masing – masing galur bakteri. Hasil yangdidapatkan menunjukkan galur – galur bakteri dalam koktail mengalami peningkatanjumlah sel seiring bertambahnya waktu inkubasi hingga jam ke – 4, yang didukung pulaoleh hasil uji DGIA termodifikasi berupa zona penghambatan antar galur yang mulaitampak pada waktu inkubasi 6 jam dan semakin terlihat jelas pada 12 jam. Komposisigalur – galur bakteri setelah diinkubasi selama 4 jam, yaitu Staphyloccus hominis MBF12– 19J : Staphylococcus warneri MBF02 – 19J : Bacillus subtilis MBF10 – 19J :Micrococcus luteus MBF05 – 19J adalah (2,484e + 41 CFU) : (2,645e + 41 CFU) :(9,041e + 35 CFU) : (1,209e + 24 CFU). Rancangan komposisi galur – galur bakteriterbaik dalam formula koktail bakteri adalah waktu inkubasi 4 jam dengan proporsiStaphyloccus hominis MBF12 – 19J : Staphylococcus warneri MBF02 – 19J : Bacillussubtilis MBF10 – 19J : Micrococcus luteus MBF05 – 19J = 1,00 : 1,00 : 1,15 : 1,72.

---

Skin is the outermost part of the body that is directly exposed to the environment, thus

skin has a diverse commensal and pathogen bacteria that contribute to human health.

Analyzing actual composition of probiotic microbe in skin is interesting to be developed

as potential source of active substances in the development of pharmaceuticals cosmetics

and skin health care. Strains of bacterial isolates from skin samples of young male and

female Java ethnic have been characterized in previous study. Predominant commensal

strains were isolated and molecular identified, namely Staphylococcus hominis MBF12 –

19J, Staphylococcus warneri MBF02 – 19J, Bacillus subtilis MBF10 – 19J, and

Micrococcus luteus MBF05 – 19J. The objective of this study was to determine

composition of skin bacterial strains by harmonizing the concentration of each bacteria

and optimizing incubation time in bacterial cocktail. Viability of each bacteria was

investigated qualitatively using modified Deferred Growth Inhibition Assay (DGIA).

Nucleic acid based quantification performing Real-time qPCR was generated using a

primer designed specifically for each bacterial strain. The results indicated that bacterial

strains in bacterial cocktail increased cell number as longer incubation time up to 4 hours,

which was also supported by modified DGIA where inhibition zones were perfomed after

6 hours of incubation time and inhibition zone visilibity increasing within 12 hours of

incubation time. Composition of bacterial strains after incubation for 4 hours, namely

Staphyloccus hominis MBF12 – 19J : Staphylococcus warneri MBF02 – 19J : Bacillus

subtilis MBF10 – 19J : Micrococcus luteus MBF05 – 19J adalah (2,484e + 41 CFU) :

(2,645e + 41 CFU) : (9,041e + 35 CFU) : (1,209e + 24 CFU). The best composition

designed of bacterial strains in bacterial cocktail formula is 4 hours incubation time with

the proportion of Staphyloccus hominis MBF12 – 19J : Staphylococcus warneri MBF02

– 19J : Bacillus subtilis MBF10 – 19J : Micrococcus luteus MBF05 – 19J = 1,00 : 1,00 :

1,15 : 1,72.