Penuaan menyebabkan penurunan kemampuan penyembuhan luka yang ditandai oleh akumulasi reactive oxygen species (ROS) akibat terganggunya proses mitofagi. Hidrogen peroksida (H₂O₂) merupakan salah satu ROS yang dapat memicu stres oksidatif apabila terakumulasi di dalam sel. Berberin merupakan alkaloid yang diketahui dapat mencegah metilasi gen PINK1, komponen utama jalur mitofagi. Kardamonin adalah senyawa chalcone dengan aktivitas antioksidan. Namun, peran berberin dan kardamonin dalam memperbaiki gangguan penyembuhan luka akibat stres oksidatif belum diketahui. Penelitian ini mengkaji efek berberin dan kardamonin terhadap viabilitas, migrasi, dan ekspresi gen mitofagi (PINK1, Parkin, Optineurin) pada sel L929 yang diinduksi H₂O₂. Model stres oksidatif in vitro ditetapkan menggunakan H₂O₂ dengan nilai IC₅₀ sebesar 140 μM. Uji sitotoksisitas menggunakan MTS assay menunjukkan bahwa berberin (0,5–7,5 μM) dan kardamonin (0,5–10 μM) aman digunakan. Viabilitas dianalisis dengan MTS assay, kemampuan migrasi menggunakan scratch dan transwell migration assay, serta ekspresi gen mitofagi dianalisis dengan RT-qPCR dan metode ΔΔCt. Hasil menunjukkan bahwa pada konsentrasi 0,5; 1; dan 5 μM, kedua senyawa tidak meningkatkan viabilitas atau migrasi sel secara signifikan. Namun, berberin 5 μM memitigasi penurunan ekspresi PINK1 dan secara signifikan meningkatkan ekspresi Optineurin, menunjukkan potensi modulasi jalur mitofagi. Ketidaksesuaian antara efek molekuler dan fungsional ini menekankan perlunya studi lanjutan pada tingkat protein dan aktivitas seluler.

---

Aging impairs wound healing capacity, characterized by the accumulation of reactive oxygen species (ROS) due to disrupted mitophagy. Hydrogen peroxide (H₂O₂), a major ROS, induces oxidative stress when accumulated in cells. Berberine is an alkaloid known to prevent methylation of the PINK1 gene, a key component of the mitophagy pathway. Cardamonin is a chalcone compound with antioxidant activity. However, the roles of berberine and cardamonin in restoring impaired wound healing under oxidative stress remain unclear. This study investigates the effects of berberine and cardamonin on cell viability, migration, and mitophagy gene expression (PINK1, Parkin, Optineurin) in H₂O₂-induced L929 fibroblast cells. An in vitro oxidative stress model was established using H₂O₂ (IC₅₀ = 140 µM). MTS assays confirmed that berberine (0,5–7,5 µM) and cardamonin (0,5–10 µM) are non-toxic. Viability was assessed via MTS assay, migration through scratch and transwell migration assays, and gene expression using RT-qPCR and the ΔΔCt method. Results showed that at 0,5; 1; and 5 µM, neither compound significantly enhanced cell viability or migration. However, 5 µM berberine mitigated the decrease in PINK1 expression and significantly upregulated Optineurin, suggesting potential modulation of the mitophagy pathway. The discrepancy between molecular and functional outcomes highlights the need for further studies at the protein and cellular activity levels.