Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"This volume looks at induced pluripotent stem (iPS) cells, mature cells that have been genetically reprogrammed so that they return to their embryonic state."

"Human pluripotent stem cells, including human embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells, are a key focus of current biomedical research. The emergence of state of the art culturing techniques is promoting the realization of the full potential of pluripotent stem cells in basic and translational research and in cell-based therapies. This comprehensive and authoritative atlas summarizes more than a decade of experience accumulated by a leading research team in this field. Hands-on step-by-step guidance for the derivation and culturing of human pluripotent stem cells in defined conditions (animal product-free, serum-free, feeder-free) and in non-adhesion suspension culture are provided, as well as methods for examining pluripotency (embryoid body and teratoma formation) and karyotype stability. "

"Sel punca mesenkim (MSC) dan sel punca pluripoten terinduksi (iPSC) telah dilaporkan mampu berdiferensiasi menjadi hepatosit secara in vitro dengan berbagai tingkat maturasi hepatosit. Sebuah metode sederhana untuk proses deselulerisasi perancah hati telah dikembangkan oleh Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi diferensiasi hepatosit dari iPSC dibandingkan dengan MSC dalam perancah hati yang dideselularisasi. Langkah pada penelitian ini adalah mengkultur iPSC dan MSC, mendeselularisasi hati kelinci, menyemai kultur sel ke dalam perancah, dan mendiferensiasikan menjadi hepatosit selama 21 hari dengan protokol Blackford yang dimodifikasi. Pemeriksaan dilakukan dengan pewarnaan Haematoxylin Eosin (HE), Masson Trichrome (MT), imunohistokimia (IHK) albumin dan cytochrome 3A4 (CYP3A4). Ekspresi gen albumin, cytochrome P450 (CYP450), dan cytokeratin-19 (CK-19) dianalisis menggunakan qRT-PCR. Pemeriksaan scanning electron microscope (SEM) dan immunofluorescence (IF) marker hepatocyte nuclear factor 4 alpha (HNF4-α) dan CCAAT/enhancer-binding protein alpha (CEBPA) dilakukan. Diferensiasi hepatosit dari iPSC dalam perancah hati yang dideselulerisasi dibandingkan dengan diferensiasi hepatosit dari MSC dalam perancah hati yang dideselulerisasi menunjukkan pembentukan sel tunggal dan kapasitas adhesi pada perancah yang lebih sedikit, dan penurunan tren ekspresi albumin dan CYP450 yang lebih rendah. Jumlah penyemaian sel awal yang lebih rendah menyebabkan hanya beberapa iPSC menempel pada bagian-bagian tertentu dari perancah hati yang dideselularisasi. Injeksi jarum suntik manual untuk reselulerisasi yang tidak merata menciptakan pola pembentukan sel tunggal oleh hepatosit dari diferensiasi iPSC di perancah hati yang dideselulerisasi. Hepatosit dari diferensiasi MSC memiliki kapasitas adhesi lebih tinggi ke perancah hati yang dideselulerisasi yang mengarah pada peningkatan tren ekspresi albumin dan CYP450. Penurunan ekspresi gen CK-19 lebih banyak terjadi pada diferensiasi hepatosit dari iPSC. Hasil tersebut dikonfirmasi oleh adanya sinyal positif protein HNF4-α dan CEBPA dengan pemeriksaan IF yang menunjukkan hepatosit yang dewasa. Kesimpulan dari penelitian ini adalah diferensiasi hepatosit dari iPSC pada perancah hati yang dideselularisasi lebih dewasa dengan adhesi sel-matriks ekstraseluler lebih rendah, distribusi sel spasial saling berjauhan, dan ekspresi albumin dan CYP450 lebih rendah dibandingkan dengan diferensiasi hepatosit dari MSC pada perancah hati yang dideselularisasi.

---

Mesenchymal stem cells (MSC) and induced pluripotent stem cells (iPSC) have been reported able to differentiate to hepatocyte in vitro with varying degree of hepatocyte maturation. A simple method to decellularized liver scaffold has been established by Faculty of medicine Universitas Indonesia.

This study aims to evaluate hepatocyte differentiation from iPSCs compared to MSCs in decellularized liver scaffold. iPSCs and MSCs were cultured, rabbit liver were decellularized, cell cultures were seeded into the scaffold, and differentiated into hepatocytes for 21 days with modified Blackford protocol. Haematoxylin-Eosin (HE), Masson Trichrome (MT), immunohistochemistry (IHC) albumin and CYP3A4 was performed. Expression of albumin, cytochrome P450 (CYP450) and cytokeratin-19 (CK-19) genes were analyzed using qRT-PCR. Scanning electron microscope (SEM) and immunofluorescence (IF) examination of hepatocyte nuclear factor 4 alpha (HNF4-α) and CCAAT/enhancer-binding protein alpha (CEBPA) marker was performed.

Hepatocyte differentiated iPSCs compared with hepatocyte differentiated MSCs in decellularized liver scaffold single–cell–formation and lower adhesion capacity in scaffold, and decrease trends of albumin and CYP450 expression. Lower initial seeding cell number causes only a few iPSCs to attach to certain parts of decellularized liver scaffold. Manual syringe injection for recellularization abruptly and unevenly create pattern of single–cell–formation by hepatocyte differentiated iPSCs in the decellularized liver scaffold. Hepatocyte differentiated MSCs have higher adhesion capacity to decellularized liver scaffold that lead to increase trends of albumin and CYP450 expression. CK-19 expression gene diminished more prominent in hepatocyte differentiated iPSCs.

These results were confirmed by the presence of HNF4-α and CEBPA positive signal protein with IF examination, showing mature hepatocyte.The conclusion of this study is hepatocyte differentiated iPSCs in decellularized liver scaffold differentiation is more mature with lower cell-extracelullar matrix adhesion, spatial cell distribution far from each other, and lower albumin and CYP450 expression than hepatocyte differentiated MSCs in decellularized liver scaffold."

"LatarBelakang: Keberadaan sel Oct4 pada suatu struktur merupakan indikasi adanya sel dengan kapasitas pluripoten, disebut juga sel punca pluripoten yang sedang gencar diteliti karena manfaatnya. Dalam proses pengembangan sel punca pluripoten, masih ditemukan hambatan yaitu pengisolasian sumber sel dari embryo yang dianggap kontroversial. Dengan karakteristik kulit dan pandangan sebagai material yang terbuang paska sirkumsisi, kulit prepusium diduga memiliki sel punca pada lingkungan histologinya dan dirasa bisa menjadi sumber baru yang tidak kontroversial untuk sel punca pluripoten.Metode: Sampel diambil dari sirkumsisi massal yang kemudian diolah dengan proses histoteknik dan dilakukan proses staining oleh Hematoxylin-Eosin staining dan Immunohistochemistry Oct4 staining di Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Slide sampel yang diperoleh kemudian dilakukan mikrofoto menggunakan optilab dan dianalisa.Hasil: Sel Oct4 ditemukan pada kulit prepusium. Namun sel tersebut hanya ditemukan di beberapa lokasi, yaitu kelenjar sebasea, folikel rambut, pembuluh darah, dan lapisan hipodermis dari kulit.Kesimpulan: 80 dari sampel kulit prepusium yang diambil memiliki sel Oct4 dan sel hanya di temukan pada 4 lokasi spesifik kelenjar sebasea, hair follicle, pembuluh darah dan lapisan hipodermis.

---

Background The presence of Oct4 cell in a structure indicates the presence of pluripotent cell, which popular nowadays being on researched due to its benefit. In the development of the cell, an obstacle is found such as the isolation process of the cell rsquo s source, embryonic stem cell, is considered as controversial. With its skin characteristic and views as discarded material, preputial skin expected to possessed stem cell in its histological environment and has the potential to be new source of pluripotent stem cell that is not controversial.Method Sample was taken from mass circumcision event, which then undergo histotechnique process involved the staining with Hematoxylin Eosin Staining and Immunohistochemistry Oct4 staining in Histology Laboratory, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Sample slide that obtain then being analyzed by microphoto of the slide under the microscope.Results Oct4 cells are found in the preputial skin. However, these cell only found limited in several locations such as sebaceous gland, hair follicle, blood vessel, and hypodermis layer of the skin.Conclusion 80 of the preputial skin sample possessed the Oct4 cells and these cells are only found in 4 specific locations sebaceous gland, hair follicle, blood vessel, and hypodermis layer."

"This book discusses the various methods to reprogram cells, the control and determination of cell identity, the epigenetic models that have emerged and the application of iPS cell therapy for brain diseases, in particular Parkinson’s disease and Vanishing White Matter (VWM).​"

"ABSTRAKDisertasi ini ditulis untuk menguji apakah posisi etika dalam menghadapi riset yang menyangkut embryo manusia dalam riset stem cells yang diperoleh dengan cara menghancurkan embryo manusis dianggap sama dengan membunuh manusia. Terutama setelah para peneliti membuktikan di laboratorium bahwa manfaat yang akan dicapai adalah memberikan kesembuhan pada penyakit degeneratif yang tidak dapat disembuhkan oleh pengobatan kontermporer. Stem cells yang berasal dari embryo itu telah terbukti dapat mengganti seluruh sel utama yang rusak atau mati. Apakah etika akan berdiri di luar gelanggang dengan mengatakan bahwa penelitian itu bertentangan dengan etika dan karena itu harus dihentikan, ataukah etika akan tetap menjadi dasar moral bagi para peneliti yang jelas tidak menginginkan penelitiannya dihentikan.? Apakah embryo sudah mempunyai status persona? Perdebatan tentang status moral embryo inilah yang menjadi dasar dari ditentangnya penggunaan embryo manusia dalam riset. Teori-teori etika deontologi Immanuel Kant [1724 ? 1804] dan utilitarian Jeremy Bentham [1748 - 1832] maupun Etika Situasi Joseph Fletcher, dipakai sebagai dasar untuk menguji apakah riset itu bertentangan dengan etika atau tidak. Masalah embryo yang dianggap merupakan awal kehidupan manusia yang telah mengandung genetika manusia ini apakah patut dirusak demi untuk penyembuhan orang lain? Empat abad SM masalah embryo ini telah dibahas secara serius oleh Aristoteles [384 ? 322 SM]. Melalui teori epigenetiknya, ia membagi embryo menjadi embryo yang belum berbentuk dan yang sudah berbentuk. Dalam embryo yang belum berbentuk belum ada kehidupan. Hanya pada embryo yang sudah berbentuk terdapat kehidupan. Pada abad ke 17 ditemukan teori preformation yang menyatakan bahwa dalam sperma dan sel telur sudah ada bentuk manusia yang lengkap, sudah ada homunculus?manusia kecil. Debat berkepanjangan tentang hal ini tidak akan pernah berakhir. Hanya saja ada satu hal yang sering dilupakan tatakala membicarakan embryo yang digunakan dalam penelitian stem cells itu. Embryo yang digunakan adalah bukan embryo yang di dalam rahim tetapi embryo di luar rahim, yang ada di dalam cawan petri di laboratorium yang tidak mungkin akan berkembang menjadi manusia. Melihat praktek tentang riset hES cells ini di beberapa negara telah memberikan manfaat yang dapat dihasilkan bukan hanya dibidang kesehatan atau kedokteran terapeutik tetapi juga dibidang ekonomi bangsa maka saya melihat bahwa riset hES cells ini perlu dilanjutkan, dengan tetap didasari oleh etika sebagai norma moral yang memberikan rambu-rambu yang jelas yaitu manfaat yang akan dicapai harus didasari oleh keutamaan kemanusiaan yaitu emerging ethics.

---

ABSTRACT

This dissertation is written to assess the ethics of stem cells research involving human embryos, where the controversial destruction of human embryos required by current state of technology to create human embryonic stem cells is often viewed as killing innocent human creatures. The ethical evaluation of such viewpoint is important in light of laboratory results showing significant benefits of the science, on developing treatments for physical, degenerative and genetic diseases that are not curable using contemporary medicine. Stem cells that originate from embryos have been proven to be able to completely replace damaged or dead cells. Will ethics stand outside of the arena by stating that such research is unethical and must be discontinued, or will ethics stand as a moral basis for the researchers that are pursuing the science? Is a human embryo considered a person? Debates regarding the moral status of embryos have been the source of rejection in the use of human embryos for such scientific researches. Deontological ethics of Immanuel Kant [1724-1804] and Utilitarian of Jeremy Bentham [1748-1832] as well as Situational Ethics of Joseph Fletcher, have been used as bases when evaluating whether or not a research is unethical. Can human embryos, seen as the commencing platform of human life with complete genetic formation, be destroyed in order to provide cure for other humans? Aristoteles [384-322 BC] extensively discussed this issue through his epigenetics theory, where embryos are divided into two stages: unformed and formed; life begins only when they are formed. In the 17th century, the establishment of the preformation theory challenges this view by stating that homunculus (little human) already exists from within the human sperm and egg cells. Such debates will never end. However, often time debates surrounding this topic fail to underline the fact that the human embryos involved are not in utero (in the womb), but they reside in the petri dishes across the laboratories, without any possibility of forming into humans. Seeing that practices regarding hES cells research across various countries have shown to provide benefits not only on health, medical and therapeutic areas, but on economy as well, I believe that such researches need to continue to be pursued with ethics being the moral norm, providing them with concrete guides and benefits that are based on humanity, as emerging ethics."

"ABSTRAKPenemuan akan sel pluripoten pada kulit prepusium, yang sebelumnya dibuang,menunjukan bahwa kulit prepusium dapat dijadikan sumber untuk bank sel puncayang dapat bermanfaat bagi donor dan keluarganya. Dalam transportasi jaringanke bank, kami ingin melihat metode yang lebih sederhana dan murah denganmenggunakan biang es dan es dibandingkan dengan nitrogen cair untukmemelihara sel-sel punca. Kulit-kulit prepusium diperoleh dari sirkumsisi masaldengan persetujuan dari para subjek dan dikirim dengan menggunakan biang esatau es. Di laboratorium, sampel kulit diproses dengan teknik histologi,pewarnaan Hematoxylin-Eosin (HE), dan Imunohistokimia (IHK) menggunakanantibodi Oct-4. Data hasil percobaan dianalisis dengan mikroskop, OptiLab?,Image Raster?, dan SPSS. Ekspresi positif dari Oct-4 dihitung dan dianalisisdengan SPSS. Rata-rata dari ekspresi positif Oct-4 adalah 2.30 pada sampel yangdikirim dengan menggunakan biang es, dan 2.38 pada es. Hasil dari percobaankami menunjukkan tidak ditemukannya perbedaan yang berarti antara biang esdan es (nilai P adalah 0.091). Dengan demikian, biang es dan es memiliki fungsiyang sama sebagai metode transportasi dingin untuk kulit prepusium dan dapatdigunakan sebagai jembatan menuju pembekuan dengan nitrogen cair

---

ABSTRACTThe discovery of pluripotent cells in preputial skin, a previously discarded tissue,means prepuce can become a new source of stem cell banking which can bebeneficial for the donor and his family. In transporting preputial skin to thebiobank, we wanted to see simpler and inexpensive cold transport methods usingdry ice and ice rather than liquid nitrogen to preserve the stem cells. The preputialskins were obtained from mass circumcision with informed consent andtransported into the laboratory with dry ice or ice. In the laboratory, the skinsamples underwent histotechnique process, Hematoxylin-Eosin (HE) staining, andImmunohistochemistry (IHC) with Oct-4 antibody staining. The data wasanalyzed using microscope, OptiLab?, Image Raster?, and SPSS. Oct-4 positiveexpression was counted and the data was examined with SPSS. The mean of Oct-4 expression in samples transported with dry ice was 2.30 and ice was 2.38. Ourstudy resulted in no significant difference between dry ice and ice (P value is0.901) in the Oct-4 expression. Thus, dry ice and ice have equal function as coldtransport method for preputial skin and can be used as a bridge towards liquidnitrogen freezing."

"This book describes the nuclear reprogramming, chronicling how the field has developed over the last 50-60 years."

"Penelitian mengenai sel punca serta aplikasinya di bidang biomedis telah mengalami perkembangan yang pesat. Namun, penggunaan sel punca embrionik dalam penanganan medis menimbulkan kekhawatiran terkait bioetika penggunaan embrio manusia, penolakan sel punca oleh sistem imun tubuh pasien, dan risiko terbentuknya teratoma. Hal tersebut menimbulkan urgensi untuk membuat sel punca pluripoten dari sel somatik yang telah terdiferensiasi. Metode induced pluripotent stem cells dapat dimanfaatkan untuk membuat sel-sel punca dari sel-sel yang telah terdiferensiasi. vesikel ekstraseluler yang dihasilkan oleh sel-sel iPSC juga menjanjikan dalam inovasi aplikasi iPSC minim risiko. Untuk dapat mengaplikasikan vesikel ekstraseluler iPSC sebagai penanganan medis dengan dosis yang tepat, diperlukan uji sterilitas dan karakterisasi profil metabolit vesikel ekstraseluler dari iPSC. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui sterilitas sampel vesikel ekstraseluler iPSC SCTE FKUI dan mengetahui karakteristik profil metabolit dari sampel vesikel ekstraseluler iPSC yang didapatkan di SCTE FKUI. Metode penelitian yang digunakan mencakup uji sterilitas menggunakan Respiratory Flow Chip Kit dan analisis profil metabolit menggunakan Ultra-Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry yang dilanjutkan dengan analisis menggunakan perangkat lunak MassLynx 4.1. Hasil menunjukkan bahwa sampel vesikel ekstraseluler iPSC koleksi FKUI steril terhadap 23 patogen infeksi saluran pernapasan akut, dan memiliki profil metabolit berupa 12 metabolit dengan karakteristik beragam.

---

The research on stem cells and their applications in the biomedical field has been advancing, but the usage of embryonic cells had provoked controversies regarding the bioethics of extracting human embryonic tissues and poses a risk of rejection from patients’ immune system and the possibility of teratoma formation. Hence, the urgency to utilize a stem cell derived from terminally differentiated cells comes to surface. The iPSC method can be used to reprogram terminally differentiated cells back into cells with pluripotency. Extracellular vesicles secreted by iPSC are also promising for biomedical treatment. In order to use extracellular vesicles for biomedical treatment with a suitable dosage, it is necessary to confirm the sterility and characterize the extracellular vesicles of iPSC used. This research is aimed to test the sterility and analyze the metabolite profile of vesikel ekstraseluler iPSC samples from SCTE FKUI collection. Respiratory Flow Chip Kit is used as sterility test. Ultra-performance liquid chromatography-mass spectrometry is used to to analyze metabolite profile. The analysis of the metabolite profile is conducted with Masslynx 4.1. Result of the sterility test shows that the vesikel ekstraseluler iPSC collection was sterile from 23 pathogens of acute respiratory infections. Moreover, it is confirmed from LCMS analysis that the sample contains 12 metabolites with various characteristics.

"