Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"ABSTRAKPendahuluan: Keloid adalah tumor jinak pada kulit yang ditandai denganpeningkatan deposisi kolagen yang disebabkan oleh tingginya aktivitas danproliferasi fibroblas. Karakteristik utama dari keloid adalah berada pada kondisihipoksia. Hypoxia inducible factor-1alpha HIF-1? dan HIF-2? merupakansubunit faktor transkripsi HIF-1 dan HIF-2 yang berperan penting pada adaptasiterhadap kondisi hipoksia. Kondisi hipoksia juga memicu sel memproduksireactive oxygen species ROS yang dapat ditangkal oleh sitoglobin Cygb . Padakeloid, Cygb juga berperan pada sintesis kolagen. Penelitian lain membuktikanbahwa terdapat situs pengikatan promoter HIF-1 pada hypoxia response element HRE Cygb, sedangkan situs pengikatan HIF-2 pada Cygb belum diketahui. HIF-1? dan HIF-2? juga diketahui berperan menginduksi ekspresi gen yang berperanpada proliferasi. Keduanya diketahui mengatur proliferasi sel pada beberapa jeniskanker. Namun, peran HIF-1? dan HIF-2? terhadap ekspresi Cygb dan proliferasifibroblas pada keloid belum diketahui. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuanmengetahui peran HIF-1? dan HIF-2? terhadap ekspresi sitoglobin dan proliferasifibroblas pada keloid, dengan melakukan penghambatan HIF-1? dan HIF-2? padafibroblas keloid menggunakan inhibitor HIF berupa ibuprofen. Metode:Pemeriksaan dilakukan terhadap ekspresi mRNA dan kadar protein HIF-1?, HIF-2?, dan sitoglobin, menggunakan metode qRT-PCR dan ELISA, serta proliferasisel menggunakan metode trypan blue exclussion assay setelah diberi ibuprofendan dibandingkan dengan kontrol yang tidak diinduksi dengan ibuprofen. Hasil:Penghambatan HIF-1? menyebabkan terjadinya penurunan ekspresi mRNA Cygbdan proliferasi fibroblas pada keloid. Hal ini membuktikan bahwa HIF-1?berperan sebagai faktor transkripsi Cygb, dan juga berperan menginduksi ekspresigen yang berperan pada proliferasi fibroblas keloid. Akan tetapi, peran HIF-2?dalam meregulasi sitoglobin dan mempertahankan proliferasi fibroblas keloidbelum berhasil dibuktikan. Kesimpulan: HIF-1? berperan meregulasi eksrepsiCygb dan berperan pada proliferasi fibroblas keloid. Akan tetapi, HIF-2? belumterbukti meregulasi eksrepsi Cygb dan berperan pada proliferasi fibroblas keloid.

---

ABSTRACTBackground Keloid is a benign tumor which is characterized by overabbundance of collagen deposition caused by high activity and proliferation offibroblast. The main characteristics of keloid is hypoxia. HIF 1 and HIF 2 aretwo subunits of transcrption factors HIF 1 and HIF 2 which mediate adaptationto hypoxic condition. Hypoxic condition also induces cells to produce reactiveoxygen species ROS which can be scavenged by cytoglobin Cygb . In keloid,Cygb also plays important role in collagen synthesis. Other studies prove thatthere is a binding site of HIF 1 promoter on hypoxia response element HRE ofCygb. Whereas, HIF 2 binding site on HRE of Cygb is not cleraly understood.HIF 1 and HIF 2 also play important role to induce expression of many geneswhich involved in cells proliferation. Both HIF 1 and HIF 2 are known toregulate cells proliferation in many cancer types. However, the role of HIF 1 andHIF 2 to Cygb expression and fibroblast proliferation in keloid is not fullyunderstood. Therefore, the aim of this study is to determine the role of HIF 1 andHIF 2 on Cygb expression and fibroblast proliferation in keloid, by doing aninhibition of HIF 1 and HIF 2 in keloid fibroblast primary culture usingibuprofen as HIF inhibitor. Methods Analysis was conducted by analizing HIF 1 , HIF 2 , and Cygb mRNA expression and protein level using qRT PCR andELISA, and fibroblast proliferation analysis was conducted using trypan blueexclusion assay after given with ibuprofen and compared with control which isnot given with ibuprofen. Results Inhibition of HIF 1 caused a decrease onCygb mRNA expression and fibroblast proliferation on keloid. These findingsprove that HIF 1 acts as transcription factor of Cygb, and also inducesexpression of gene which plays a role on fibroblast proliferation in keloid.However, the role of HIF 2 in regulating and maintaining Cygb expression andfibroblast proliferation in keloid was not succesfully proven. Conclusion HIF 1 regulate Cygb expression and fibroblast proliferation in keloid. However, HIF 2 role on Cygb expression and fibroblast proliferation has not be proven yet."

"ABSTRAKPenelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang bertujuan mengetahui respon limfosit limpa mencit terhadap kondisi hipoksia relatif dan stres oksidatif karena imunisasi. Imunisasi dilakukan dengan cara induksi suspensi SDMD 2 kepada mencit melalui jalan intraperitoneum. Sampel yang digunakan adalah limfosit limpa mencit Balb/c jantan sebanyak 24 ekor yang dibagi ke dalam 4 kelompok yaitu kelompok kontrol tidak diimunisasi , kelompok 24 jam, 48 jam dan 72 jam. Limpa diambil berturut-turut setelah 0,24,48, dan 72 jam imunisasi. SDMT diperoleh dari darah limpa menggunakan larutan Ficoll 1.084, kemudian limfosit diisolasi dengan metode adheren. Ekspresi protein HIF-1?, HIF-2?, dan Nrf2 menggunakan metode ELISA; ekspresi relatif mRNA HIF-1?, HIF-2? diukur dengan metode qRT-PCR; dan aktivitas enzim GPx diukur dengan metode spektrofotometri. Protein HIF-1? meningkat secara signifikan pada 24 jam pertama setelah imunisasi, kemudian menurun setelah 48 jam dan 72 jam, ekspresi relatif mRNA HIF-1? meningkat setelah 48jam dan 72 jam. Hal ini disebabkan oleh protein HIF-1 distabilkan pada jam ke-24, setelah 48 jam dan 72 jam mRNA tidak ditranslasikan atau protein segera didegradasi. Protein HIF-2? meningkat secara signifikan setelah 72 jam imunisasi, sementara ekspresi relatif mRNA HIF-2? meningkat secara signifikan setelah 24 jam dan 72 jam setelah imunisasi. Hal ini menjelaskan bahwa protein HIF-2 bekerja pada hipoksia kronik. Protein Nrf2 mengalami peningkatan yang tidak signifikan setelah 48 jam. Aktivitas enzim GPx meningkat signifikan pada 24 jam pertama kemudian menurun setelahnya. Kemungkinan setelah 48 jam enzim GPx tidak bekerja sendiri dalam menetralkan radikal bebas, namun dibantu oleh enzim CAT yang juga diatur ekspesinya oleh Nrf2.

---

ABSTRACTThis research use experimental method, the aim is to explore the mice rsquo s spleen lymphocytes responses towards relative hypoxia and oxidative stress due to immunization. The immunization performed by injecting 2 sheep red blood cell intraperitoneally. The samples are spleen lymphocytes from 24 male Balb c mice, divided into 4 groups control, 24 hours, 48 hours, and 72 hours group. Spleen was isolated after 0 hour, 24 hours, 48 hours and 72 hours after immunization. PBMC obtained from spleen blood through Ficoll 1.084 separation, then lymphocytes were isolated by adherent method. HIF 1 , HIF 2 and Nrf2 protein expression were analyzed with ELISA method, mRNA expression were analyzed with qRT PCR method, and GPx enzyme activity were analyzed through spectrophotometry. HIF 1 protein elevated significantly 24 hours post immunization and decreased afterwards while HIF 1 mRNA increase significantly after 47 hours and 72 hours post immunization. This result is due to stabilized HIF 1 protein on 24 hours group that give rise to its concentration while its mRNA remain low, while after 48 hours and 72 hours the mRNA expression increase but not translated into protein or the protein sin quickly degraded. HIF 2 protein increased significantly 72 hours post immunizaation while mRNA expression elevated on 24 hours and 72 hours group. This result suit the theory that HIF 2 protein works on chronic hypoxia. Nrf2 protein increase insignificantly on 48 hours post immunization and GPx activity rise significantly after 24 hours immunization and decrease afterwards. This may due to enzyme CAT helps enzyme GPx in neutralize free radical, in which CAT is also regulated by Nrf2 protein."

"Keadaan hipoksia dapat membuat sel melakukan adaptasi melalui ekspresi berbagai macam gen. Banyak gen tersebut adalah gen yang diinduksi oleh suatu faktor transkripsi yang disebut HIF-I HlF-la adalah subunit yang diregulasi oleh kadar oksigen untuk aktifitas faktor transkripsi tersebut.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana pola mRNA HIF 1u dan ekspresi protein HIF-ln pada organ ginjal dari tikus yang mengalami kondisi hipoksia secara sistemik yang terbagi menjadi 5 kelompok berdasarkan lamanya perlakuan (kelompok kontrol, hipoksia 13, 7 dan 14 hari masing-masing 6 ekor tikus) menggunakan Hypoxic Chamber dengan kadar 02 8% dan Nitrogen 92%. Pola mRNA HIF-la dilihat berdasarkan basil RT-PCR dengan membandingksn rasio kelompok nonnoksia dan kelompok hipoksia. Ekspresi protein HIF-1a dilakukan dengan metode Western Blot dengan menggunakan anti HIF-la sebagai antibodi primer.Hasil penelitian menunjukkan terdapat penurunan ekspresi mRNA HIF-la dibandingkan kontrol pada kelompok hipoksia 1 hari dan diikuti peningkatan pada kelompok hipoksia 3 hari dan mulai mengalami penurunan kembali pada kelompok 7 hari. Sementara protein HIF-la. memperlihatkan terdapatnya peningkatan ekspresi protein HIF-la yang mulai mengalami penurunan pada kelompok hipoksia 14 hari. Dapat disimpulkan bahwa regulasi H1F-1a terjadi pada tahap transkripsi dan tahap pasca translasi.

---

Hypoxia could make cell to adapt trough gene expression. Many of these gene induced by the transcription factor called HIP-1. HIF-I tz is the subunit which regulated by oxygen level to activated the transcription factor.

The aim of this study is to know the pattern of Hypoxia Inducible Factor-Ia (HIP-la) mRNA and HIF-Ia protein Expression of Renal Rat in Systemic Chronic Hypoxia which divided to 5 groups based on the duration of hypoxia (control, I, 3, 7, and I4 days of hypoxia with 6 rats each group ) using hypoxia chamber with 8% oxigen and 92% Nitrogen. The pattern was measure with RT-PCR which combine the ratio of control group and the hypoxic group. The protein expression measure with Western Blot method using anti HIF-l a as 1? antibody.

The result shows that HIP-lo. mRNA expression decrease in 1" day of hypoxia, elevated and reach a peak at 3 days of hypoxia and start to decrease since then. While the HIP-lo. protein shows an increase expression until I4 days of hypoxia which start to decrease. It can be concluded that HIF-la regulation occurs in transcription level and post translation."

"Pendahuluan: Penelitian dilakukan untuk mengetahui peran senyawa flavonoid mangiferin dalam meningkatkan ekspresi mRNA HIF-1α dan sebagai pencekal besi dalam menstabilkan HIF-1α pada lini sel HepG2 dan menganalisis interaksi mangiferin dengan prolil hidroksilase (PHD2) secara simulasi docking.Metode: Sel HepG2 dikultur hingga >80% konfluen dan selanjutnya diberikan mangiferin konsentrasi 25-200μM. Kuersetin digunakan sebagai pembanding flavonoid mangiferin yang bekerja di dalam inti sel, sedangkan DFO dan CuCl2 digunakan sebagai pembanding daya ikat terhadap besi. Ekspresi mRNA HIF-1α ditentukan dengan real time RT- PCR/q-PCR, dan stabilisasi protein HIF-1α ditentukan mengunakan teknik ELISA. Simulasi docking dilakukan terhadap protein PHD2 dengan mangiferin, CuCl2, deferoksamin (DFO), dan campuran mangiferin+ kuersetin.Hasil: Uji viabilitas sel menggunakan metode MTS dengan pemberian mangiferin, kuersetin, campuran mangiferin-kuersetin, DFO dan CuCl2 (25-200μM) memperlihatkan hasil diatas 85%. Ekspresi mRNA HIF-1α dengan mangiferin, kuersetin, mangiferin+kuersetin, dan DFO menunjukkan hasil sedikit lebih tinggi dibanding kontrol. Konsentrasi protein HIF-1α pada pemberian mangiferin, kuersetin, mangiferin-kuersetin, DFO dan CuCl2 lebih tinggi dibanding kontrol. Simulasi docking mangiferin terhadap PHD2 memperlihatkan ΔG= -16,22, dan DFO menunjukkan ΔG= -17,15. Terdapat interaksi antara mangiferin, dan DFO dengan besi dan asam amino pada situs katalitik domain PHD2, sedangkan CuCl2 tidak berinteraksi dengan residu asam amino pada domain PHD2, tetapi langsung menggantikan Fe. Efek penghambatan terhadap PHD2 oleh mangiferin dan kuersetin disebabkan oleh delokalisasi elektron melalui kompleks transfer elektron.Kesimpulan: Mangiferin dapat meningkatkan ekspresi mRNA HIF-1α dan meningkatkan protein HIF-1α, menurun protein PHD2 dan menurunkan protein HO-HIF-1α pada lini sel HepG2 secara in vitro. Analisis docking terdapat interaksi antara mangiferin, dan DFO dengan besi dan asam amino PHD2. Mangiferin memiliki stabilitas pengkikatan dengan besi yang berdekatan dengan DFO.

---

Introduction: This research was conducted to determine the role of flavanoid mangiferin to increase expression HIF-1α mRNA, and as an iron chelator to stabilize protein HIF-1α in cell line HepG2 and analyzes the interaction of mangiferin with prolil hidroksilase (PHD2) by docking simulation.

Methods: HepG2 cells were cultured and treated by mangiferin with concentration between 25-200μM. Quercetin is used as a comparison mangiferin flavonoid that works in the nucleus and DFO, CuCl2 is used as a comparison to iron-binding. HIF- 1α mRNA expression was determined by real time RT-PCR/q-PCR, and the stability HIF-1α protein were measured by the increase in HIF-1α protein, decreased PHD2 protein and decreased HO-HIF-1α using ELISA. Docking simulation was conducted between PHD2 protein and mangiferin, CuCl2, desferoxamine (DFO), and quercetin.

Results: Cell viability with MTS assay showed that cell exposure with 25μM-200μM concentrations of mangiferin, quercetin, mangiferin+quercetin mixture, DFO, and CuCl2 is above 85%. HIF-1α mRNA expression was slightly higher than in controls with mangiferin, quercetin, mangiferin quercetin mixture and DFO. HIF-1α protein concentration and ratios vs untreated controls were above 1 with mangiferin, quercetin, mangiferin quercetin mixture, DFO, and CuCl2. Docking simulation mangiferin with PHD2 showed ΔG= -16,22. Docking simulation with DFO showed ΔG= -17,15, and interact mangiferin, and DFO with iron in the catalytic site of PHD2 and with amino acid residues, whereas CuCl2 does not react with amino acid residues in the PHD2 domain, but directly replaces Fe. The inhibitory effect to PHD2 by mangiferin and quercetin is considered by electron delocalisation through an electron transfer complex.

Conclusion: Mangiferin can increase HIF-1α mRNA expression and HIF-1α protein levels in HepG2 cell line by in vitro. Binding interaction with iron and PHD2 amino acids occurs by mangiferin and DFO. Mangiferin has stability iron binding a similar with DFO."

"Latar Belakang: Penelitian sel induk sekarang ini telah banyak dieksplorasi untuk nilai kuratif yang menjanjikan dalam dunia medis. Minat di bidang ini dilatarbelakangi oleh kemampuan pembaharuan diri dan diferensiasi yang memberi sel induk potensi yang dapat diterapkan secara terapeutik. Sel induk embrionik sampai hari ini masih kontroversial karena masalah etika dan penghalang kekebalannya, yang mengarahkan kepada eksplorasi sumber sel induk dari sumber lainnya termasuk jaringan adiposit dan jaringan tali pusar. Sel induk berada di microenvironment yang kompleks dan berbagai penelitian telah membuktikan bahwa tingkat oksigen terbatas diperlukan untuk pemeliharaan kapasitas proliferasi dan pluripotency. Hipoksia adalah salah satu kekuatan pendorong paling berpengaruh untuk angiogenesis yang memungkinkan kelangsungan hidup sel induk melalui adaptasi metabolik dan ekspresi gen pro-survival hidup seperti Hypoxia-inducible Factors (HIFs). HIF2α mengatur ekspresi SOX2 dan NANOG dalam kondisi hipoksia, mempertahankan kapasitas proliferasi dan pluripotency sel punca. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis ekspresi relatif HIF2α pada sel induk dari jaringan tali pusar dan jaringan adiposit untuk menentukan tingkat kapasitas proliferasi.Metode: Sel punca diekstraksi dari jaringan adiposit dan jaringan tali pusar. RNA diisolasi dan VarioskanTM Flash multimode Reader digunakan untuk mengkonfirmasi kemurnian sampel. One-Step qRT-PCR digunakan untuk mengukur ekspresi relatif gen HIF2α. Produk PCR lalu diproses dengan elektroforesis gel untuk mengkonfirmasi keakuratan amplifikasi gen.Hasil: Gen HIF2α dinyatakan lebih tinggi di UCSC dibandingkan dengan ADSC.Kesimpulan: Hasilnya menunjukkan bahwa dalam kondisi normal, UCSC memiliki pluripotency yang lebih tinggi daripada ADSC. Perluasan penelitian harus dilakukan untuk mengkonfirmasi ekspresi relatif HIF2α dalam kondisi hipoksia.

---

Background: Current stem cell research has been explored for promising curative value in the medical world. Interest in this field is motivated by the ability of self-renewal and differentiation that gives potential stem cells that can be applied therapeutically. Embryonic stem cells to this day are controversial because of ethical issues and their immune barriers, which lead to exploration of stem cell sources from other sources including adipocyte tissue and umbilical cord tissue. Stem cells are in a complex microenvironment and various studies have proven that limited oxygen levels are needed for maintenance of proliferation and pluripotency capacity. Hypoxia is one of the most influential driving forces for angiogenesis that allows continuity stem cell life through metabolic adaptation and expression of pro-survival living genes such as Hypoxia-inducible Factors (HIFs). HIF2α regulates the expression of SOX2 and NANOG in hypoxic conditions, maintaining the proliferation capacity and pluripotency of stem cells. This study aims to analyze the relative expression of HIF2α in stem cells from umbilical cord tissue and adipocyte tissue to determine the level of proliferation capacity.

Method: Stem cells are extracted from adipocyte tissue and umbilical cord tissue. RNA isolated and Vari PostingTM Flash multimode Reader is used to confirm sample purity. One-step qRT-PCR is used to measure the relative expression of the HIF2α gene. The PCR product is then processed with gel electrophoresis to confirm the accuracy of gene amplification.

Results: The HIF2α gene was expressed higher at UCSC compared to ADSC.

Conclusion: The results show that under normal conditions, UCSC has higher pluripotency than ADSC. Extensive research must be carried out to confirm the relative expression of HIF2α in hypoxic conditions."

"Penelitian ini bertujuan menganalisis ekspresi HIF-1? pada hati tikus yang diracuni CCl4 dalam kondisi normoksia, dengan atau tanpa perlindungan N-asetil sistein (NAC). Sebanyak 25 ekor tikus Sprague-Dawley jantan dibagi menjadi 5 grup: kontrol, diberikan minyak kelapa, diberikan CCl4, disuntik NAC lalu diberikan CCl4, diberikan CCl4 lalu disuntik NAC. Ekspresi mRNA HIF-1? dianalisis dengan real time RT-PCR dan dikuantifikasi menggunakan metode Livak. Ekspresi protein HIF-1? diukur menggunakan ELISA. Hasil ekspresi mRNA dan protein HIF-1? tertinggi terdapat pada grup tikus yang hanya diberi CCl4, lalu lebih rendah pada grup yang diberi NAC sebelum CCl4, grup yang diberi NAC setelah CCl4, grup kontrol, dan grup yang diberi minyak kelapa. Disimpulkan bahwa pemberian CCl4 pada kondisi normoksia menyebabkan peningkatan ekspresi HIF-1?, sedangkan pemberian NAC terbukti menurunkan ekspresi HIF-1a. Hal tersebut menunjukkan bahwa mekanisme perubahan ekspresi pada HIF-1a memang dipengaruhi oleh radikal bebas yang terbentuk akibat metabolisme CCl4.

---

This study analyzed the expression of HIF-1? in liver rat tissue induced by CCl4 under normoxic conditions, with or without N-acetyl cysteine (NAC) protection. Twenty five male Sprague-Dawley rats were divided into 5 group: control rats, rats administered with coconut oil, rats administered with CCl4, rats injected with NAC then administered with CCl4, rats administered with CCl4 then injected with NAC. The expression of HIF-1? mRNA was measured by real time RT-PCR using Livak method, while the HIF-1? protein was measured by ELISA assay. Results showed that the highest HIF-1? mRNA and protein expression were found in the group treated by CCl4 and then was gradually lowered in the pre-NAC group, post-NAC group, control group, and coconut oil group. The overall result of this study show the effect of CCl4-treated rats under normoxic conditions increased the expression of HIF-1?, while NAC treatment decreased the expression of HIF-1?. These findings show that free radical formed by CCl4 metabolism play a role in the regulation of HIF-1"

"Latar belakang: Sitoglobin (Cygb) adalah protein pengangkut O2 yang diekspresikan oleh fibroblas dan fibroblast like cells aktif. Keperluan O2 dan energi meningkat pada fibrosis akibat proliferasi fibroblas dan sintesis kolagen. Pada fibrosis terjadi hipoksia yang ditandai oleh stabilisasi hypoxia inducible factor-1α (HIF-1α), yang kemudian membentuk HIF-1 yang merupakan faktor transkripsi untuk ekspresi protein adaptasi (termasuk Cygb). Diduga Cygb berperan dalam suplai O2 pada fibrosis. Tujuan penelitian ini adalah untuk memperoleh informasi mengenai peran Cygb pada hipoksia jaringan fibrosis dengan keloid sebagai model.Metode: Penelitian bersifat observasional deskriptif. Sampel keloid diperoleh melalui biopsi, sedangkan kontrol preputium diperoleh melalui sirkumsisi, masing-masing 10 sampel jaringan. Pengukuran ekspresi mRNA Cygb, HIF-1α, kolagen I dan III dilakukan dengan real time RT-PCR; kadar protein Cygb dan HIF-1α dengan ELISA; dan ekspresi protein Cygb, HIF-1α, FGF, kolagen I dan III di lapisan dermis dengan imunohistokimia (IHK). Pengukuran kadar MDA dan GSH (tingkat stres oksidatif) serta kadar hidroksiprolin (untuk pematangan kolagen) dengan spektrofotometri, sedangkan pengukuran kepadatan kolagen dengan pewarnaan Van Gieson. Data dianalisis secara statistik menggunakan uji-t.Hasil: Pada keloid dibandingkan preputium, ekspresi mRNA Cygb meningkat 8,7 kali, protein Cygb meningkat bermakna (1,196 Vs 0,779 ng/mg protein dan 95% Vs 63% ; p <0,05). Ekspresi mRNA HIF-1α meningkat 5,1 kali, protein HIF-1α meningkat bermakna (0,201 Vs 0,122 ng/mg protein dan 80% Vs 38%; p <0,05). Terdapat korelasi kuat antara ekspresi protein HIF-1α dan mRNA Cygb (Pearson; R = 0,649; p <0,01). Ekspresi protein FGF keloid meningkat bermakna (78% Vs 41%; p <0,05). Demikian pula ekspresi mRNA prokolagen I dan III keloid meningkat bermakna (35 kali dan 27,1 kali), serta ekspresi protein kolagen I dan III (61% Vs 37% dan 39% Vs. 16%; p <0,05). Juga terdapat korelasi kuat antara protein HIF-1α dengan FGF, prokolagen I dan III (Pearson; R= 0,878; R=0,960; dan R=0884; p<0,01). Kadar hiroksiprolin lebih tinggi pada keloid (0,297 Vs 276 ng/mg protein; p >0,05) dan pematangan kolagen lebih tinggi bermakna (1,2 kali; p <0,05). Cygb berkorelasi kuat dengan pematangan kolagen (kadar hidroksiprolin) (Pearson; R = 0,790; p <0,001).Kesimpulan: Cygb berperan pada hipoksia jaringan fibrosis yang ditandai dengan peningkatan ekspresinya. Peran Cygb terkait dengan ekspresi HIF-1α yang berkorelasi dengan peningkatan FGF, pro/kolagen I dan III yang merupakan faktor penting pada fibrosis. Cygb juga berperan pada pematangan kolagen.

---

Background: Cytoglobin (Cygb) is an O2 carrier protein expressed by fibroblasts and active fibroblast like cells. O2 and energy demand increased in fibrosis due to proliferation of fibroblasts and synthesis of collagen. In fibrosis hypoxia occurred which is characterized by stabilization of hypoxia inducible factor-1α (HIF-1α), which later forming the HIF-1, a transcription factor for the expression of adaptation protein (including Cygb). Cygb alleged role in the supply of O2 in fibrosis. The purpose of this study was to obtain information about Cygb role in fibrosis hypoxia with keloid tissue as a model.Methods: This was an observational descriptive study. Keloid samples were obtained from biopsy, while the preputium as control were obtained from circumcision, 10 tissue samples each. Measurement of Cygb, HIF-1α, collagen I and III mRNA expression were carried out by real time RT?PCR. Cygb and HIF-1α protein level were measured by ELISA; while Cygb, HIF-1α, FGF, and collagen I and III protein expressions in the dermis layer by immunohistochemistry (IHC). Measurement of MDA and GSH levels (oxidative stress) and hydroxyprolin concentration (marker of mature collagen) by spectrophotometry, while the collagen density measurement with van Gieson staining. Data were analyzed statistically using t-test.Results: In keloid compared preputium, Cygb mRNA expression increased 8.7 times compared to preputium, Cygb protein increased significantly (1.196 Vs 0.779 ng/mg protein and 95% Vs 63%, p <0.05). HIF-1α mRNA expression increased by 5.1 times in keloid tissue, and protein HIF-1α increased significantly (0.201 Vs 0.122 ng/mg protein and 80% Vs 38%, p <0.05). There is a strong correlation between the expression of HIF-1α protein and Cygb mRNA (Pearson; R = 0.649, p <0.01). Keloid FGF protein expression increased significantly (78% Vs 41%; p <0.05). Similarly, mRNA expression of procollagen I and III keloid increased significantly (35 times and 27.1 times), and protein expression of collagen I and III (61% Vs 37% and 39% Vs 16%, p <0.05). There is also a strong correlation between HIF-1α protein with FGF, procollagen I and III (Pearson, R = 0.878, R = 0.960; and R = 0.884, p <0.01). Hydroxyprolin concentration were higher in keloid (0.297 Vs 0.276 ng/mg protein; p >0.05) and collagen maturation was significantly higher (1.2 times, p <0.05). Cygb is correlated with maturation of collagen (hydroxyproline levels) (Pearson, R = 0.790, p <0.001).Conclusion: Cygb play role in fibrosis hypoxia which is characterized by its increased expression. Cygb role is associated with the expression of HIF-1α which are correlated with increased FGF, pro/collagen I and III, which are important factor in fibrosis. Cygb also play a role in the maturation of collagen."

"Latar Belakang : Penelitian ini menganalisis respons adaptasi jaringan jantung pada paparan hipoksia hipobarik intermiten (HHI) pada tikus. Faktor transkripsi HIF-1α penting untuk mengatasi keadaan hipoksia, terdiri atas 2 subunit yaitu HIF-1α dan HIF-1β yang dalam keadaan hipoksia membentuk heterodimer dan mengatur ekspresi sejumlah gen target untuk mengatasi keadaan hipoksia. Hipoksia akan menyebabkan jantung mengalami beban yang meningkat berupa hipertrofi ventrikel. Jantung akan mengatasi keadaan tersebut melalui pembentukan Mb dan BNP-45.Metode : 25 ekor tikus jantan Sprague-Dawley dibagi dalam 5 kelompok dan 4 kelompok dipaparkan HHI menggunakan hypobaric chamber di Lakespra Saryanto TNI AU, selama 50 menit dengan variasi ketinggian, interval intermiten 1 minggu, 4 kali perlakuan (hari 1, 8, 15 dan 22). Dilakukan pengukuran protein HIF-1α dan Mb (ELISA), ekspresi relatif mRNA Mb dan BNP-45 (real time RT-PCR satu langkah).Hasil : Kadar protein HIF-1α meningkat pada paparan hipoksia hipobarik dan terus menurun hingga induksi hipoksia hipobarik intermiten 3 kali (ANOVA, p=0,0437). Ekspresi mRNA dan protein Mb meningkat pada paparan hipoksia hipobarik dan terus menurun hingga induksi hipoksia hipobarik intermiten 3 kali (ANOVA, p=0,0283; 0,0170), dan keduanya berkorelasi kuat (Pearson, r=0,6307). Ekspresi mRNA BNP-45 meningkat pada paparan hipoksia hipobarik intermiten 1 kali dan terus menurun hingga induksi hipoksia hipobarik intermiten 3 kali (ANOVA, p=0,0314). Hasil uji korelasi juga menunjukkan hubungan yang kuat antara protein HIF-1α dengan ekspresi mRNA Mb, namun sangat lemah dengan ekspresi mRNA BNP-45.Kesimpulan : Terjadi respons adaptasi HIF-1α, Mb dan BNP-45 pada paparan hipoksia hipobarik intermiten pada jantung tikus. Protein HIF-1 meregulasi ekspresi Mb dan BNP-45.

---

Background: The study analyzed the adaptive responses of heart tissue after induction of intermittent hypobaric hypoxia (IHH) in rat. The transcription factor HIF-1 is important to overcome hypoxia condition, which consist of 2 subunits: HIF-1α and HIF-1β in a state of hypoxia form heterodimers and regulate the expression of a number of target genes to overcome hypoxia. Hypoxia, especially continuous one, may lead the heart to hypertroptive state. The heart will overcome the situation through the establishment of Mb and BNP-45.

Methods: Twenty five male Sprague-Dawley rats were exposed to IHH in a hypobaric chamber in Indonesian Air Force Institute of Aviation Medicine, for 50 minutes at various altitudes, 1 week interval for 4 times (day 1, 8, 15 and 22). HIF-1α and Mb protein were measured with ELISA. mRNA expression of Mb and BNP-45 were measured with one step real time RT-PCR.

Results: HIF-1α protein levels increased after induction of hypobaric hypoxia and continues to decrease after induction of intermittent hypobaric hypoxia 3 times (ANOVA, p=0.0437). mRNA expression and protein of Mb increased after induction of hypobaric hypoxia and continues to decrease after induction of intermittent hypobaric hypoxia 3 times (ANOVA, p=0.0283; 0.0170), and both are strongly correlated (Pearson, r=0.6307). mRNA expression of BNP-45 increased after induction of intermittent hypobaric hypoxia 1 time and continues to decrease after induction of intermittent hypobaric hypoxia 3 times (ANOVA, p=0.0314). Correlation test results also showed a strong relationship between HIF-1α protein with mRNA expression of Mb, but very weak with mRNA expression of BNP-45.

Conclusions: Adaptive response of HIF-1α, Mb and BNP-45 occurs after induction of intermittent hypobaric hypoxia in rat heart. HIF-1 protein regulated the expression of Mb and BNP-45."

"ABSTRAKKanker menunjukkan suatu potensi untuk invasi baik in vitro maupun in vivo. Proses ini dimediasi oleh Methaderin (MTDH). Hipoksia-inducible factor-2α (HIF-2α) dapat meningkatkan ekspresi MTDH; Namun, sedikit diketahui tentang korelasi antara HIF-2α dan MTDH ekspresi dalam kanker payudara. Suatu studi telah menyelidiki hubungan antara HIF-2 dan MMP9. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui hubungan antara HIF-2 dan MTDH. Desain penelitian ini adalah analisis berpasangan dengan 48 sampel jarinagn kanker payudara sebelum dan sesudah Kemoterapi dan terapi hormonal yang terdiri dari 20 terapi hormonal dan 28 kemoterapi. Ekspresi mRNA HIF-2 dan MTDH diukur dengan menggunakan QRT-PCR. HIF-1 ekspresi protein dideteksi oleh teknik enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Peningkatan ekspresi relatif mRNA HIF-2 dan MTDH setelah terapi tidak signifikan (p> 0,05, Mann Whitney) dibandingkan sebelum terapi. Peningkatan ekspresi relatif mRNA HIF-2 dan MTDH pada derajat histopatologi III tidak signifikan (p> 0,05, Mann Whitney) dibandingkan dengan histopatologi I dan II. Peningkatan ekspresi relatif mRNA HIF-2 dan MTDH pada usia > 40 tahun tidak signifikan (p> 0,05, Mann Whitney) dibandingkan dengan <40 tahun. Spearman analisis korelasi mengungkapkan bahwa HIF-2α dan ekspresi MTDH secara signifikan berkorelasi (r = 0,632; P = 0.000). Hasil ini menunjukkan bahwa tingginya ekspresi HIF-2α dikaitkan dengan buruk nya prognosis pada pasien dengan kanker payudara dan menjadikan bahwa HIF-2α dan MTDH bisa menjadi penanda dari perkembangan kanker payudara.

---

ABSTRACTMalignant cells show increased invasion potency in vitro and in vivo. This process is considered to be mediated by Methaderin (MTDH). Hypoxia-inducible factor-2α (HIF-2α) may upregulate MTDH expression; however, little is known about the correlation between HIF-2α and MTDH expressions in breast cancer. The current study investigated correlation between HIF-2 and MMP9 immunohistochemically according to various clinical and pathological features in 102 paraffin-embedded archival tissue block specimens from patients with breast cancer. Aim of this study is to investigate correlation between HIF-2 and MTDH. Design of this study is couple analysis with 48 breast cancer sample before and after Chemoteraphy and hormonal therapy comprises 20 hormonal therapy and 28 chemotheraphy. Expression of mRNA HIF-2 and MTDH were measured using qRT-PCR. HIF-1 protein expression was detected by enzim linked immunoabsorbant assay (ELISA). mRNA HIF-2 and MTDH expression after theraphy is not significantly higher (p > 0,05, Mann Whitney) compared to before theraphy. mRNA HIF-2 and MTDH expression in Histopathology Grade III is not significantly higher (p > 0,05, Mann Whitney) compared to histopathology grade I and II. mRNA HIF-2 and MTDH expression in >40 years old is not significantly higher (p > 0,05, Mann Whitney) compared to <40 years old. Spearman correlation analysis revealed that HIF-2α and MTDH expression ons were significantly correlated (r = 0.632; P = 0.000). These results suggest that high HIF- 2α expression is associated with poor overall survival in patients with breast cancer, indicating that HIF-2α could be a valuable marker of breast cancer"