Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Kanker serviks merupakan salah satu jenis kanker dengan prevalensi dan penyebab kematian tertinggi di dunia. Salah satu metode pengobatan kanker serviks adalah kemoterapi dengan menggunakan doxorubicin. Doxorubicin merupakan salah satu senyawa obat kelas antrasiklin yang dapat menghambat kerja enzim Topoisomerase II. Topoisomerase II diketahui memiliki peranan dalam mempertahankan struktur kromosom. Namun, hingga saat ini pengaruh doxorubicin terhadap kromosom sel kanker belum diketahui. Perubahan struktur kromosom yang terdeteksi lebih cepat dapat menjadi pertimbangan dalam optimasi dosis doxorubicin pada kemoterapi kanker serviks. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian doxorubicin terhadap jumlah, panjang, dan luas area kromosom sel HeLa menggunakan mikroskop cahaya. Kultur sel HeLa ditumbuhkan dan dipanen kromosomnya di atas coverslip. Kultur sel HeLa kemudian diberi perlakuan doxorubicin dengan konsentrasi 4 μg/mL selama 24 jam. Kromosom metafase sel HeLa kontrol dan perlakuan kemudian dipanen dan diwarnai dengan pewarna Giemsa untuk pengamatan dengan mikroskop cahaya. Hasil pengamatan kromosom sel HeLa kontrol menunjukkan jumlah kromosom 41—75 kromosom per sel, panjang kromosom sebesar 2—5 μm, dan luas area sebesar 4—15 μm2 per kromosom. Kromosom metafase tidak diperoleh dari sel yang diberi perlakuan doxorubicin. Hal tersebut kemungkinan disebabkan oleh pengaruh inhibisi doxorubicin terhadap aktivitas enzim Topoisomerase II sehingga terjadi kerusakan DNA yang memicu apoptosis sel.

---

Cervical cancer is one of the cancers with the highest prevalence in the world. One of the treatments commonly used for cervical cancer is chemotherapy using doxorubicin. Doxorubicin is one of the compounds belong to the antracycline class which responsible for inhibiting the Topoisomerase II enzyme. Topoisomerase II has also been reported to be correlated with the maintenance of chromosome structure. Nevertheless, to date, the information about the effects of doxorubicin on chromosome structure has yet to be revealed. Alterations in chromosome structure which are detected more quickly can be a consideration in optimizing the dose of doxorubicin in cervical cancer chemotherapy. This study aimed to evaluate the effects of doxorubicin on the HeLa chromosome number, length, and area using a light microscope. HeLa cell was cultured and treated with 4 μg/mL doxorubicin for 24 hours. The cells were then harvested on the coverslips. Metaphase chromosomes of HeLa cells treated with doxorubicin and the control were stained with Giemsa and finally observed by using a light microscope. The results obtained from this study showed that the number, length, and area of the control chromosomes were 41—75 chromosomes per cell, 2—5 μm, and 4—15 μm2, respectively. Furthermore, the metaphase chromosome from the cells treated with doxorubicin could not be obtained. This result indicated that the doxorubicin treatment might inhibits the activity of the Topoisomerase II enzyme, causing DNA damage that triggers cell apoptosis."

"Struktur kromosom berperan penting dalam pembagian materi genetik pada siklus sel. Hingga saat ini, penelitian mengenai faktor utama yang berperan dalam kondensasi kromosom terus dilakukan, salah satunya ion magnesium. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui pengaruh perbedaan konsentrasi ion magnesium (Mg2+) terhadap struktur permukaan dan bagian dalam kromosom sel HeLa menggunakan mikroskop fluoresens dan high resolution microscopy meliputi Scanning Electron Microscope (SEM), Helium Ion Microscope (HIM), Transmission Electron Microscope (TEM), dan Focused Ion Beam/Scanning Electron Microscope (FIB/SEM) dengan teknik preparasi ionic liquid. Sel HeLa dikultur kemudian diisolasi kromosomnya menggunakan metode Polyamine (PA). Kromosom sel HeLa kemudian diberikan tiga perlakuan berbeda meliputi larutan XBE5 dengan 5 mM Mg2+ sebagai kontrol, perlakuan larutan XBE tanpa Mg2+, dan perlakuan 1 mM EDTA sebagai chelator kation. Kromosom sel HeLa selanjutnya difiksasi dengan 2,5% glutaraldehyde dan post-fiksasi menggunakan OsO4. Kromosom kemudian diwarnai dengan DAPI (4,6-diamidino-2-phenylindole) untuk pengamatan dengan mikroskop fluoresens dan Platinum Blue untuk pengamatan dengan high resolution microscopy. Kromosom yang telah diwarnai dan diberi 0,5% ionic liquid BMI-BF4 kemudian diamati sesuai prosedur masing-masing high resolution microscopy. Hasil pengamatan kualitatif menunjukkan kromosom sel HeLa kontrol memiliki struktur yang lebih padat, tidak pipih, dengan kromatid yang tidak berlubang dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan XBE dan EDTA. Hasil pengukuran kuantitatif menunjukkan panjang rata-rata kromosom kontrol 2,95 μm ± 0,99868 dengan ketebalan kromatid 500 nm. Kromosom sel HeLa yang diberikan perlakuan XBE tanpa Mg2+ memiliki panjang rata-rata 4,2 μm ± 1,1964 dengan ketebalan kromatid 310 nm. Panjang rata-rata kromosom sel HeLa yang diberikan perlakuan 1 mM EDTA adalah 8,65 μm ± 3,85762 dengan ketebalan kromatid 200 nm. Hasil pengamatan dan pengukuran menunjukkan kromosom kontrol XBE5 dengan 5 mM Mg2+ memiliki struktur permukaan dan bagian dalam yang lebih padat dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan larutan XBE dan 1 mM EDTA. Hasil tersebut menunjukkan pentingnya ion magnesium dalam kondensasi kromosom.Chromosome structure is crucial for the equal distribution of genetic materials into the daughter cells during the cell cycle. To date, the major factors for chromosome condensation have been being evaluated, including Magnesium ions. This research aimed to evaluate the effects of Magnesium ions (Mg2+) concentrations on HeLa chromosome surface and inner structure observed by high-resolution microscopies including Scanning Electron Microscope (SEM), Helium Ion Microscope (HIM), Transmission Electron Microscope (TEM), and Focused Ion Beam/Scanning Electron Microscope (FIB/SEM) using ionic liquid method. HeLa cells were cultured and the chromosomes were isolated using Polyamine (PA) method. The chromosomes were treated with different buffers, XBE5 (contained 5 mM Mg2+) as control, XBE (contained 0 mM Mg2+) and 1 mM EDTA as a cations chelator. HeLa chromosomes were then fixed with 2.5% glutaraldehyde and post-fixed with OsO4. Chromosomes were stained with DAPI (4,6-diamidino-2-phenylindole) and Platinum Blue for fluorescence and high-resolution microscopy observation, respectively. Finally, the chromosomes were subjected to ionic liquid treatment using 0.5% BMI-BF4 prior to high-resolution microscopy observation. The qualitative results showed that the control HeLa chromosomes had a more compact structure without any fibres as compared to those treated with XBE and 1 mM EDTA. The quantitative results showed that the average chromosome length of the control was 2,95 μm ± 0,99868 with the chromatid thickness of 500 nm, while the XBE- and EDTA-treated chromosomes showed the average length of 4,2 μm ± 1,1964 and 8,65 μm ± 3,85762, respectively, with the chromatid thickness of 310 nm and 200 nm. The results of this study revealed that the chromosome treated with XBE5 (control) has a more compact surface and inner structure as compared to those treated with XBE and EDTA. The results of this study further revealed the importance of Mg2+ on chromosome condensation."

"Kromosom merupakan untai DNA yang mengalami penebalan akibat kondensasi. Kondensasi struktur kromosom sangat mempengaruhi segregasi kromosom saat fase mitotik. Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa kondensasi kromosom sel HeLa dipengaruhi oleh ion kalsium (Ca2+), namun pengaruh Ca2+ pada kromosom manusia normal belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia dengan pemberian 1 mM 1, 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, chelator Ca2+), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, chelator kation), dan PBS (kontrol) yang diamati menggunakan mikroskop cahaya. Sampel darah dikultur selama 72 jam, kemudian kromosom limfosit diisolasi dan diberi perlakuan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS. Kromosom diwarnai dengan Giemsa dan diamati dengan mikroskop cahaya. Hasil yang diperoleh menunjukkan struktur kromosom kontrol lebih pendek, padat, serta memiliki intensitas pewarna yang pekat dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA yang memiliki struktur yang lebih panjang, lebih berongga, serta intensitas pewarna yang kurang pekat. Hasil analisis kuantitatif menunjukkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom kontrol sebesar 1,73±0,73 μm, 0,55±0,43 μm, dan 3,5±2,17 μm2, sedangkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom yang diberi 1 mM BAPTA sebesar 2,91±1,3 μm, 1,43±0,43 μm, dan 4,17±2,75 μm2. Rata-rata panjang dan lebar kromosom yang diberi 1 mM EDTA sebesar 2,26±0,52 μm dan 0,93±0,29 μm. Hasil tersebut memperlihatkan bahwa Ca2+ berperan penting dalam kondensasi struktur kromosom limfosit.

---

The Chromosome is a DNA strand that undergoes thickening due to condensation. Condensation of chromosomal structure affects the segregation of chromosomes during the mitotic phase. Previous studies have reported that chromosomal condensation of HeLa cells is affected by calcium ions (Ca2+). Nevertheless, the effect of Ca2+ on human normal cells has yet to be investigated. This study aims to determine the effect of Ca2+ on the chromosomal structure of human lymphocyte by the treatments of 1 mM 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, a Ca2+ chelator), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, a cation chelator), and PBS (control), using a light microscope. The blood sample was cultured for 72 hours, followed by lymphocyte chromosomes isolation. After that, the samples were treated with PBS (control), 1 mM BAPTA, and 1 mM EDTA. Chromosomes were then stained with Giemsa and observed using a light microscope. The qualitative analysis showed that control chromosomes have shorter, and more condensed structures with a high dye intensity compared with those treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA which showed a longer and fibrous structure with low dye intensity. The quantitative analysis showed that the average length, width, and area of the control chromosome was 1.73±0.73 μm, 0.55±0.2 μm, and 3.5±2.17 μm2, respectively. while those treated with 1 mM BAPTA were 2.91±1.3 μm, 1.43±0.43 μm, and 4.17±2.75 μm2. Then, the average length and width of 1 mM EDTA chromosome was 2.26±0.52 μm and 0.93±0.29 μm. These results showed that Ca2+ plays an important role in the lymphocyte chromosome structure."

"Kromosom merupakan untai DNA yang mengalami penebalan akibat kondensasi. Kondensasi struktur kromosom sangat mempengaruhi segregasi kromosom saat fase mitotik. Penelitian sebelumnya telah melaporkan bahwa kondensasi kromosom sel HeLa dipengaruhi oleh ion kalsium ( ), namun pengaruh Ca2+ pada kromosom manusia normal belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh terhadap struktur kromosom limfosit manusia dengan pemberian 1 mM 1, 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, chelator Ca2+), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, chelator kation), dan PBS (kontrol) yang diamati menggunakan mikroskop cahaya. Sampel darah dikultur selama 72 jam, kemudian kromosom limfosit diisolasi dan diberi perlakuan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS. Kromosom diwarnai dengan Giemsa dan diamati dengan mikroskop cahaya. Hasil yang diperoleh menunjukkan struktur kromosom kontrol lebih pendek, padat, serta memiliki intensitas pewarna yang pekat dibandingkan dengan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA yang memiliki struktur yang lebih panjang, lebih berongga, serta intensitas pewarna yang kurang pekat. Hasil analisis kuantitatif menunjukkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom kontrol sebesar 1,73±0,73 μm, 0,55±0,43 μm, dan 3,5±2,17 μm2, sedangkan panjang, lebar, dan luas rata-rata kromosom yang diberi 1 mM BAPTA sebesar 2,91±1,3 μm, 1,43±0,43 μm, dan 4,17±2,75 μm2. Rata-rata panjang dan lebar kromosom yang diberi 1 mM EDTA sebesar 2,26±0,52 μm dan 0,93±0,29 μm. Hasil tersebut memperlihatkan bahwa Ca2+ berperan penting dalam kondensasi struktur kromosom limfosit.

---

The Chromosome is a DNA strand that undergoes thickening due to condensation. Condensation of chromosomal structure affects the segregation of chromosomes during the mitotic phase. Previous studies have reported that chromosomal condensation of HeLa cells is affected by calcium ions (Ca2+). Nevertheless, the effect of Ca2+ on human normal cells has yet to be investigated. This study aims to determine the effect of Ca2+ on the chromosomal structure of human lymphocyte by the treatments of 1 mM 2-bis(2-aminophenoxy)ethane-N-N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA, a Ca2+ chelator), 1 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, a cation chelator), and PBS (control), using a light microscope. The blood sample was cultured for 72 hours, followed by lymphocyte chromosomes isolation. After that, the samples were treated with PBS (control), 1 mM BAPTA, and 1 mM EDTA. Chromosomes were then stained with Giemsa and observed using a light microscope. The qualitative analysis showed that control chromosomes have shorter, and more condensed structures with a high dye intensity compared with those treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA which showed a longer and fibrous structure with low dye intensity. The quantitative analysis showed that the average length, width, and area of the control chromosome was 1.73±0.73 μm, 0.55±0.2 μm, and 3.5±2.17 μm2, respectively. while those treated with 1 mM BAPTA were 2.91±1.3 μm, 1.43±0.43 μm, and 4.17±2.75 μm2. Then, the average length and width of 1 mM EDTA chromosome was 2.26±0.52 μm and 0.93±0.29 μm. These results showed that Ca2+ plays an important role in the lymphocyte chromosome structure."

"Ion magnesium (Mg2+) merupakan salah satu faktor utama yang berperan dalam kondensasi kromatin menjadi kromosom. Berbagai penelitian mengenai pengaruh Mg2+ terhadap struktur kromosom sel HeLa telah dilakukan, namun hingga saat ini pengaruh Mg2+ terhadap pola banding yang menunjukkan bagian heterokromatin dan eukromatin belum diketahui. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh Mg2+ terhadap kondensasi kromosom sel HeLa menggunakan teknik G-Band-Trypsin-Leishman (GTL) banding karyotyping. Sediaan sebaran metafase kromosom diperoleh dari kultur sel HeLa, kemudian dilakukan banding menggunakan pewarna Leishman. Pengaruh Mg2+ dievaluasi dengan memberikan tiga larutan yang berbeda, yaitu larutan XBE5 yang mengandung 5 mM Mg2+ sebagai kontrol, larutan XBE (0 mM Mg2+), dan larutan 1 mM EDTA sebagai chelator kation. Data yang diperoleh dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan menganalisis nilai kromosom berdasarkan jumlah band yang dihasilkan sesuai dengan Quality Assessment (QA) dari International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pada 5 mM Mg2+ struktur kromosom padat dengan nilai 2 hingga 3 dan memiliki pola banding yang jelas. Sementara itu, kromosom pada 0 mM Mg2+ memiliki area kromosom yang meluas dan struktur kromosom lebih fibrous dengan pola banding yang tipis. Kromosom pada 0 mM Mg2+ memiliki nilai panjang 2 hingga 4. Struktur kromosom pada 1 mM EDTA masih terlihat dengan struktur fibrous, namun dengan batas yang sulit ditentukan dan pola banding yang dihasilkan kabur. Nilai kromosom pada 1 mM EDTA berkisar antara 3 hingga 6. Hasil pengamatan struktur, pola banding, dan nilai kromosom yang diperoleh menunjukkan kromosom pada 0 mM Mg2+ dan 1 mM EDTA lebih panjang dari kromosom kontrol (5 mM Mg2+). Kromosom pada 5 mM Mg2+ lebih padat dengan band yang dihasilkan lebih jelas jika dibandingkan dengan kromosom yang diberikan perlakuan dengan 0 mM Mg2+ dan 1 mM EDTA. Hal ini menunjukkan bahwa magnesium diperlukan untuk menjaga kondensasi struktur kromosom sel HeLa.

---

Magnesium ion (Mg2+) is one of the major factors responsible for chromosome condensation. Studies about the effects of Mg2+ on chromosome structure of the HeLa cell have been reported, however, the effects of Mg2+ on the banding pattern showing the heterochromatin and euchromatin areas are yet to be investigated. This research was carried out to determine the effect of Mg2+ on chromosome condensation of the HeLa cells structure using karyotyping by G-Band-Trypsin-Leishman (GTL) banding technique. Chromosome were obtained from the cultured HeLa cell. The chromosomes banding was evaluated using Leishman dye. The effect of Mg2+ was evaluated by giving three different solutions, namely XBE5 solution containing 5 mM Mg2+ as a control, XBE solution (0 mM Mg2+), and 1 mM EDTA solution as cation chelator. The obtained data was analyzed qualitatively by observing the structure and banding pattern of the chromosomes, as well as quantitatively by analyzing the value of chromosomes based on the number of bands produced according to the Quality Assessment (QA) from International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The results showed that at 5 mM Mg2+, chromosome structure was more solid with a value of 2 to 3 and had a clear banding pattern. Meanwhile, the chromosomes treated with buffer containing 0 mM Mg2+ showed an expanded chromosome area and a more fibrous structure with a pale banding pattern, the chromosome at 0 mM Mg2+ showed a value of 2 to 4. Futhermore, the structure of chromosomes treated with EDTA was still visible with fibrous structure, but with boundaries that were difficult to determined and the blurred banding pattern. The value of the chromosome in 1 mM EDTA ranges from 3 to 6. Based on the observations of the structure, banding pattern, and the value obtained, the chromosomes at 0 mM Mg2+ and 1 mM EDTA were longer than those treated with 5 mM Mg2+. Chromosomes at 5 mM Mg2+ were more condensed with the clear bands compared to those treated with 0 mM Mg2+ and 1 mM EDTA. These results further emphasize that Mg2+ is required for chromosome condensation and maintenance of chromosome structure of the HeLa cell."

"Ion kalsium (Ca2+) adalah salah satu kation divalen yang berperan dalam proses kondensasi kromosom. Pengaruh Ca2+ pada kondensasi kromosom dengan melihat pola banding dan nilai kromosom belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ion kalsium (Ca2+) pada kondensasi struktur kromosom sel HeLa dengan teknik G-banding-trypsin-Leishman (GTL-banding) dan karyotyping. Sebaran kromosom pada tahap metafase diperoleh dengan mengkultur sel HeLa pada suhu 37 °C (5% CO2). BAPTA 1 mM sebagai chelator spesifik Ca2+ dan EDTA 1 mM sebagai chelator kation diberikan sebelum pemanenan kromosom. Kromosom yang telah dipanen selanjutnya dilakukan banding dengan pewarna Leishman. Pengaruh Ca2+ pada kondensasi kromosom diamati dengan membandingkan kromosom pada kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol. Data dianalisis secara kualitatif dengan mengamati struktur kromosom dan pola banding kromosom, serta secara kuantitatif dengan mengacu pada Quality Assessment (QA) berdasarkan International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kromosom pada kelompok kontrol memiliki struktur yang padat dengan pola banding yang jelas teramati dengan nilai kromosom 2 hingga 5. Kelompok perlakuan 1 mM BAPTA memiliki struktur kromosom yang tidak padat dengan ukuran yang lebih besar dari kelompok kontrol dan memiliki pola banding yang kurang jelas dengan nilai kromosom 2 hingga 5. Kelompok perlakuan 1 mM EDTA memiliki struktur kromosom yang tidak padat dan fibrous dengan ukuran yang lebih besar dan panjang dari kelompok kontrol serta memiliki pola banding yang kurang jelas dengan nilai kromosom 2 hingga 6. Kromosom pada kelompok perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA memiliki struktur lebih tidak padat dan pola banding yang kurang jelas jika dibandingkan dengan kelompok kontrol sehingga mengindikasikan peran Ca2+ dalam kondensasi struktur kromosom.

---

Calcium ion (Ca2+) is one of the divalent cations involved in the chromosome condensation process. The effect of Ca2+ on chromosome condensation by observing banding patterns and chromosome value has yet known. This study aimed to determine the effect of calcium ion (Ca2+) on HeLa cell chromosome structure condensation using G-banding-Trypsin-Leishman (GTL-banding) technique and karyotyping. Metaphase chromosome spreads were obtained by culturing the HeLa cell at 37 ℃ (5% CO2). 1 mM BAPTA as Ca2+ chelator and 1 mM EDTA as cation chelator was added prior to the chromosome harvest. G-banding was carried out on harvested chromosomes using Leishman dye. The effect of Ca2+ on chromosome condensation was determined by comparing the treated chromosome to the control chromosome. The data were obtained and analyzed qualitatively by observing chromosome structure and banding pattern, as well as quantitatively by referring to the International System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN). The result showed that the chromosome in the control group had a condensed structure with a clear banding pattern and chromosome value ranged from 2 to 5. Chromosome treated with 1 mM BAPTA had a less condensed structure with a bigger size compared to the control group and had chromosome value ranged from 2 to 5. Chromosome treated with 1 mM EDTA was also less condensed with longer and fibrous structure and had chromosome value ranged from 2 to 6. BAPTA-treated and EDTA-treated chromosomes had a less condensed structure with less clear banding pattern compared to the control which indicated the role of Ca2+ in the chromosome condensation process."

"Kondensasi kromosom memainkan peran penting dalam pembelahan mitosis. Ion Ca2+ diketahui berperan penting dalam proses kondensasi kromosom. Sejauh ini, studi tentang peran Ca2+ dalam kromosom sel hewan telah dilaporkan melalui penggunaan 1,2-bis (2- aminophenoxyethane-N,N,N′,N-tetraacetic acid) (BAPTA) dan Ethylenediamine- tetraacetic acid (EDTA) sebagai agen pengkelat ion Ca2+. Namun, penelitian tentang peran Ca2+ pada kromosom tanaman masih sangat terbatas. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh Ca2+ terhadap kromosom gandum (Triticum aestivum) dengan pemberian 1mM BAPTA sebagai agen pengkelat ion Ca2+, 1mM EDTA sebagai agen pengkelat kation divalen umum, dan phosphate buffered saline (PBS) sebagai kontrol menggunakan mikroskop cahaya. Preparasi kromosom dilakukan dengan cara akar gandum dipotong dan diberi perlakuan colchicine sebelum dilarutkan dalam 2% Paraformaldehyde (PFA). Kemudian diinkubasi dengan 2,5% selulase dan 2,5% enzim pectoliase pada suhu 37°C selama 1 jam. Sampel kemudian disaring dan disentrifugasi untuk memperoleh sampel yang mengandung kromosom. Sampel kemudian diberi perlakuan dengan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS, dan diwarnai dengan Aceto orcein. Kromosom kemudian diamati di bawah mikroskop cahaya. Struktur dan kepadatan warna kromosom, serta panjang, lebar dan luas kromosom diamati dan diukur. Hasil pengamatan kualitatif menunjukkan bahwa struktur kromosom pada kontrol lebih rapat dan pendek sedangkan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA mengalami dekondensasi, melebar, dan berwarna pucat. Hasil pengukuran kuantitatif menunjukkan bahwa kromosom Kontrol, BAPTA, dan EDTA masing-masing memiliki panjang 10.763 m, 14.845 m, 17.154 m, lebar 1.570 m, 1.637 m, 1.723 m, dan luas 18.172 m, 24.644 m, 29.687 M. Hasil uji statistik menunjukkan bahwa pengaruh BAPTA dan EDTA terhadap panjang dan luas kromosom berbeda nyata (α < 0,05). Hal ini membuktikan bahwa Ca2+ memiliki peran penting dalam menjaga struktur kromosom gandum.

---

Chromosomal condensation plays an important role in the mitotic division. Ca2+ ions are known to play an important role in the chromosome condensation process. So far, studies on the role of Ca2+ in animal cell chromosomes have been reported using 1,2-bis (2-amino phenoxy ethane N, N, N′, N-tetraacetic acid) (BAPTA) and Ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) as Ca2+ ions chelating agents. However, research on the role of Ca2+ on plant chromosomes is still very limited. This study was conducted to determine the effect of Ca2+ on wheat chromosomes (Triticum aestivum) by administering 1mM BAPTA as a Ca2+ ion chelating agent, 1 mM EDTA as a general divalent cation chelating agent, and phosphate-buffered saline (PBS) as a control using a light microscope. For chromosome preparation, the root tips of wheat were cut and pretreated with colchicine before being dissolved in 2% Paraformaldehyde (PFA). The roots were then incubated with 2.5% cellulase and 2.5% pectoliase enzyme at 37°C for 1hour. The sample is then filtered and centrifuged to obtain a sample containing chromosomes. Samples were then treated with 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, and PBS and stained with Aceto orcein. Chromosomes were then observed under a light microscope. The structure and color density of the chromosomes were observed. The length, width, and area of the chromosomes were also measured. The qualitative observations showed that the chromosome structure in control was denser and shorter while the chromosomes treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA were decondensed, widened, and had pale color. The quantitative measurement showed that length, width, and area of chromosomes for in control, BAPTA, and EDTA were 10.763 m, 14.845 m, 17.154 m; 1.570 m, 1.637 m, 1.723 m; and 18.172 m, 24.644 m, 29.687 M respectively. The statistical results showed that the effect of BAPTA and EDTA on the length and area of chromosomes were significantly different (α < 0.05). This result proves that Ca2+ has a vital role in maintaining the chromosomal structure of wheat."

"Kondensasi kromosom memainkan peran penting dalam pembelahan mitosis. Ion Ca2+ diketahui berperan penting dalam proses kondensasi kromosom. Sejauh ini, studi tentang peran Ca2+ dalam kromosom sel hewan telah dilaporkan melalui penggunaan 1,2-bis (2-aminophenoxyethane-N,N,N′,N-tetraacetic acid) (BAPTA) dan Ethylenediamine-tetraacetic acid (EDTA) sebagai agen pengkelat ion Ca2+. Namun, penelitian tentang peran Ca2+ pada kromosom tanaman masih sangat terbatas. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh Ca2+ terhadap kromosom gandum (Triticum aestivum) dengan pemberian 1mM BAPTA sebagai agen pengkelat ion Ca2+, 1mM EDTA sebagai agen pengkelat kation divalen umum, dan phosphate buffered saline (PBS) sebagai kontrol menggunakan mikroskop cahaya. Preparasi kromosom dilakukan dengan cara akar gandum dipotong dan diberi perlakuan colchicine sebelum dilarutkan dalam 2% Paraformaldehyde (PFA). Kemudian diinkubasi dengan 2,5% selulase dan 2,5% enzim pectoliase pada suhu 37℃ selama 1 jam. Sampel kemudian disaring dan disentrifugasi untuk memperoleh sampel yang mengandung kromosom. Sampel kemudian diberi perlakuan dengan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan PBS, dan diwarnai dengan Aceto orcein. Kromosom kemudian diamati di bawah mikroskop cahaya. Struktur dan kepadatan warna kromosom, serta panjang, lebar dan luas kromosom diamati dan diukur. Hasil pengamatan kualitatif menunjukkan bahwa struktur kromosom pada kontrol lebih rapat dan pendek sedangkan kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA mengalami dekondensasi, melebar, dan berwarna pucat. Hasil pengukuran kuantitatif menunjukkan bahwa kromosom Kontrol, BAPTA, dan EDTA masing-masing memiliki panjang 10.763 m, 14.845 m, 17.154 m, lebar 1.570 m, 1.637 m, 1.723 m, dan luas 18.172 m, 24.644 m, 29.687 M. Hasil uji statistik menunjukkan bahwa pengaruh BAPTA dan EDTA terhadap panjang dan luas kromosom berbeda nyata (α < 0,05). Hal ini membuktikan bahwa Ca2+ memiliki peran penting dalam menjaga struktur kromosom gandum.

---

Chromosomal condensation plays an important role in the mitotic division. Ca2+ ions are known to play an important role in the chromosome condensation process. So far, studies on the role of Ca2+ in animal cell chromosomes have been reported using 1,2-bis (2-amino phenoxy ethane N, N, N′, N-tetraacetic acid) (BAPTA) and Ethylene diamine tetraacetic acid (EDTA) as Ca2+ ions chelating agents. However, research on the role of Ca2+ on plant chromosomes is still very limited. This study was conducted to determine the effect of Ca2+ on wheat chromosomes (Triticum aestivum) by administering 1mM BAPTA as a Ca2+ ion chelating agent, 1 mM EDTA as a general divalent cation chelating agent, and phosphate-buffered saline (PBS) as a control using a light microscope. For chromosome preparation, the root tips of wheat were cut and pretreated with colchicine before being dissolved in 2% Paraformaldehyde (PFA). The roots were then incubated with 2.5% cellulase and 2.5% pectoliase enzyme at 37℃ for 1hour. The sample is then filtered and centrifuged to obtain a sample containing chromosomes. Samples were then treated with 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, and PBS and stained with Aceto orcein. Chromosomes were then observed under a light microscope. The structure and color density of the chromosomes were observed. The length, width, and area of the chromosomes were also measured. The qualitative observations showed that the chromosome structure in control was denser and shorter while the chromosomes treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA were decondensed, widened, and had pale color. The quantitative measurement showed that length, width, and area of chromosomes for in control, BAPTA, and EDTA were 10.763 m, 14.845 m, 17.154 m; 1.570 m, 1.637 m, 1.723 m; and 18.172 m, 24.644 m, 29.687 M respectively. The statistical results showed that the effect of BAPTA and EDTA on the length and area of chromosomes were significantly different (α < 0.05). This result proves that Ca2+ has a vital role in maintaining the chromosomal structure of wheat."

"Kromosom memiliki peranan penting dalam menyimpan materi genetik setiap makhluk hidup. Salah satu faktor yang memengaruhi struktur kromosom adalah kation divalen termasuk ion tembaga (Cu2+). Hingga saat ini, belum terdapat penelitian yang menganalisis pengaruh Cu2+ terhadap struktur kromosom tumbuhan. Tumbuhan gandum (Triticum aestivum) merupakan organisme model terkait studi kromosom. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui pengaruh Cu2+ pada berbagai konsentrasi (0, 20, 40, 80, 160, dan 1000 µM) terhadap struktur kromosom gandum menggunakan mikroskop cahaya dan scanning electron microscope (SEM). Biji gandum direndam di larutan Cu2+ selama 4 jam, kemudian dikecambahkan selama 48 jam. Ujung akar gandum kemudian disinkronisasi dengan kolkisin 0,01% dan difiksasi dengan larutan Carnoy. Sampel yang akan diamati menggunakan mikroskop cahaya kemudian dihidrolisis dengan HCl 1N, diwarnai dengan aceto-orcein, dan diamati di bawah mikroskop. Sampel yang akan diamati menggunakan SEM diberi enzim 2,5% selulase-pektinase, difiksasi menggunakan 2,5% glutaraldehid, post-fiksasi menggunakan OsO4, dehidrasi dengan etanol, dikeringkan dengan HMDS, dan diamati di bawah SEM. Hasil kualitatif menunjukkan struktur kromosom mulai dari yang paling terkondensasi hingga tidak terkondensasi berturut-turut adalah 20, 80, 40, 1000, 160, dan 0 µM Cu2+. Hasil kuantitatif menunjukkan panjang+lebar kromosom dari setiap perlakuan 0, 20, 40, 80, 160, dan 1000 µM Cu2+ berturut-turut adalah 18,378+1,676 µm, 11,484+2,028 µm, 16,035+1,765 µm, 15,402+1,791 µm, 17,427+1,550 µm, dan 16,321+1,500 µm. Uji perbandingan Tukey dan Dunn menunjukkan bahwa konsentrasi Cu2+ memberi pengaruh yang signifikan terhadap panjang dan lebar kromosom, khususnya pada konsentrasi 20 µM. Hasil dari penelitian ini menyatakan bahwa Cu2+ memiliki peran penting dalam menjaga struktur kromosom gandum.

---

Chromosomes have an important role in storing the genetic material of every living creature. One of various factors that can affect the structure of chromosomes is divalent cations including copper ions (Cu2+). Until now, no research has analysed the effect of Cu2+ on plant chromosome structure. Wheat plants (Triticum aestivum) are a model organisms related to the study of chromosomes. This study aimed to determine the effect of Cu2+ at various concentrations (0, 20, 40, 80, 160, and 1000 µM) on wheat chromosome structure using a light microscope and scanning electron microscope (SEM). Wheat seeds were soaked in each Cu2+ solution for 4 hours and germinated for 48 hours. Root tips were then synchronized in colchicine 0.01% and fixed with Carnoy’s solution. For light microscope observation, the root tips were hydrolysed with 1N HCl, stained with aceto-orcein, and observed under the microscope. For SEM observation, the root tips were then treated with 2,5% cellulase-pectinase enzyme, fixed using glutaraldehyde, post-fixed using OsO4, dehydration using ethanol, dried with HMDS, and observed under SEM. The qualitative results showed that the chromosomes structure from most condensed to less condensed were 20, 80, 40, 1000, 160, and 0 µM Cu2+ respectively. The quantitative results showed that the length+width of the chromosomes from each treatment of 0, 20, 40, 80, 160, and 1000 µM Cu2+ were 18,378+1,676 µm, 11,484+2,028 µm, 16,035+1,765 µm, 15,402+1,791 µm, 17,427+1,550 µm, and 16,321+1,500 µm respectively. Tukey and Dunn comparison test showed that the concentration of Cu2+ significantly affected the length and width of chromosomes, especially at 20 µM concentration. The result of our study indicates that Cu2+ has an important role in maintaining the structure of wheat chromosomes.

"

"Kondensasi kromosom pada tahap metafase memiliki peranan penting dalam keberlangsungan siklus sel. Sejauh ini masih terus dilakukan penelitian mengenai faktor yang mempengaruhi kondensasi kromosom. Kation divalen, terutama kalsium (Ca2+) diketahui memiliki peranan penting dalam kondensasi kromosom manusia. Akan tetapi, peranan Ca2+ terhadap kromosom tumbuhan belum diketahui. Gandum merupakan salah satu organisme model dalam sitogenetika. Oleh karena itu, diperlukan penelitian mengenai efek Ca2+ kalsium terhadap kondensasi kromsosom gandum (Triticum spp.). Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian 1 mM BAPTA (1, 2-bis(2-aminophenoxy) ethane-N, N, N′, N′-tetraacetic acid), 1 mM EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid), sebagai pelekat Ca2+, terhadap struktur kromosom gandum menggunakan mikroskop cahaya dan Scanning Electron Microscope (SEM). Kecambah gandum dipotong bagian ujung akar dan diinkubasi di dalam larutan PFA (Paraformaldehyde) 2%. Sampel diinkubasi dengan enzim selulase 2,5 % dan pectoliase 2,5%. Setelah itu sampel diberi perlakuan masing-masing dengan 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, dan kontrol dengan PBS. Kromosom kemudian diwarnai dengan aceto orcein sedangkan yang diamati SEM dipreparasi melalui tahap fiksasi, post-fiksasi, staining, dehidrasi, dan dikeringkan dengan HMDS (hexamethyldisilazane) sebelum diamati menggunakan SEM. Hasil yang diperoleh pada pengamatan kuantitatif menunjukkan panjang rata-rata untuk kromosom kontrol 12,5±3,4 µm sedangkan pada perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA panjang rata-rata yang diperoleh adalah 17,7±6,6 µm dan 41,9±16,3 µm. Struktur kromosom kontrol secara kualitatif lebih padat dan lebih terkondensasi. Akan tetapi kromosom yang diberi perlakuan 1 mM BAPTA dan 1 mM EDTA menunjukkan hasil yang lebih panjang, tersebar, dan terjadi dekondensasi kromosom sehingga serat-serat kromatin lebih terlihat jelas. Hal tersebut menunjukkan Ca2+ memiliki peranan penting dalam kondensasi kromosom gandum.

---

Chromosome condensation at metaphase has an important role in the continuation of the cell cycle. Researches on the investigation of the major factors affecting chromosome condensation has been conducted so far. Divalent cations, especially Ca2+ has been reported to have an important role in human chromosome condensation. Nevertheless, its effect on the plant chromosome has yet to be evaluated. Wheat (Triticum spp.) is one of the model organisms in cytogenetics.Therefore, study to evaluate the effect of Ca2+ on wheat chromsosomes is required. The purpose of this study was to determine the effect of 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA as the Ca2+ chelating agent on the wheat chromosomes using light microscope and SEM (Scanning Electron Microscope). The root tips of wheat sprouts was cut off and incubated in a 2% PFA (Paraformaldehyde)  solution. The sample was incubated with 2.5% cellulase and 2.5% pectoliase enzyme. After that, the samples were treated with 1 mM BAPTA, 1 mM EDTA, and PBS as control. Chromosome were then stained with aceto orcein, while sample for SEM were subjected to SEM preparation including fixation, post-fixtaion, staining, dehydration, and HMDS (hexamethyldisilazane)  drying. The results showed that the average length of the control chromosome was 12.5±3.4 µm, while those treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA showed the average length of 17.7 ± 6.6 µm and 41. 9 ± 16.3 µm, respectively. The qualitative observation of the control chromosomes showed the more compact and condensed structure. However, chromosomes treated with 1 mM BAPTA and 1 mM EDTA showed a longer, dispered, and decondensed chromosome showing the chromatin fibers. This result indicated that Ca2+ play an important role in wheat chromosome condensation."