Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Latar belakang: Bakteri A. actinomycetemcomitans merupakan bakteri utama penyebab periodontitis agresif dimana bakteri ini dapat memengaruhi sel tulang sehingga terjadi kehilangan tulang alveolar. Namun, belum ada studi yang mempelajari mengenai interaksi antara bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel osteoklas dan sel di galur diferensiasi sel osteoklas, yaitu sel bone marrow-derived macrophages (BMM) dan sel preosteoklas. Tujuan: Membandingkan interaksi sel BMM dan sel preosteoklas dengan bakteri A. actinomycetemcomitans. Metode: Membuat kultur primer sel osteoklas dari bone marrow cells (BMCs) pada conditioned medium dengan inkubasi selama 48 jam pada suhu 37oC. Setelah diinkubasi, kultur sel BMCs yang telah berdiferensiasi menjadi sel BMM diberi medium yang telah ditambahkan bakteri A. actinomycetemcomitans selama 30 menit dalam kondisi aerob dan anaerob. Kemudian medium disimpan untuk dilakukan kultur dan Total Plate Count untuk mengetahui jumlah koloni bakteri. Lakukan hal yang sama pada sel preosteoklas (setelah kultur diinkubasi selama 48 jam dan diganti mediumnya dan ditambahkan RANKL kemudian diinkubasi kembali selama 24 jam). Hasil: Jumlah koloni hasil interaksi bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel BMM menunjukkan hasil yang tidak signifikan (p > 0.05) sedangkan hasil interaksi bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas menunjukkan hasil yang signifikan (p < 0.05). Perbandingan koloni terkecil adalah pada hasil interaksi bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel BMM pada kondisi aerob (1 : 1,1). Kesimpulan: Interaksi antara bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel BMM dan sel preosteoklas mempengaruhi proliferasi dari bakteri A. actinomycetemcomitans dimana proliferasi bakteri A. actinomycetemcomitans paling tinggi terjadi saat berinteraksi dengan sel BMM pada kondisi aerob.

---

Background: A. actinomycetemcomitans is the main bacteria that causes aggressive periodontitis of which this bacteria can affect bone cells resulting in alveolar bone loss. However, there has been no study that have examined the interaction between A. actinomycetemcomitans bacteria and osteoclast lineage cells, namely in bone marrow- derived macrophages (BMM) and preosteoclast cells. Objective: Comparing the interaction of BMM and preosteoclast cells with A. actinomycetemcomitans. Methods: Primary cultures of osteoclasts from bone marrow cells (BMCs) in conditioned medium were performed and incubated for 48 hours at 37oC. After incubation, the cultured BMCs that had differentiated into BMM were given medium that had been infected with A. actinomycetemcomitans for 30 minutes under aerobic and anaerobic conditions. The medium were then isolated and total plate count were performed to determine the number of bacterial colonies. The same procedure were conducted for preosteoclast cells (after the culture was incubated for 48 hours and the medium was changed and RANKL was added and then incubated again for 24 hours). Results: The number of colonies produced by the interaction of A. actinomycetemcomitans with BMM showed insignificant results (p > 0.05), while the results of the interaction of A. actinomycetemcomitans with preosteoclast cells showed significant results (p < 0.05). The smallest colony comparison was the result of the interaction of A. actinomycetemcomitans with BMM under aerobic conditions (1 : 1,1). Conclusion: The interaction between A. actinomycetemcomitans bacteria with BMM and preosteoclast cells affects the proliferation of A. actinomycetemcomitans where the highest proliferation of A. actinomycetemcomitans occurs when interacting with BMM under aerobic conditions."

"Latar belakang: Periodontitis merupakan penyakit inflamasi kronis dan dikenal dalam berbagai klasifikasi, yaitu periodontitis kronis, periodontitis agresif, necrotizing periodontitis, dan periodontitis sebagai manifestasi penyakit sistemik. Periodontitis agresif ditandai dengan meningkatnya proporsi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans, namun belum terdapat studi yang secara spesifik membuktikan interaksi langsung antara sel bone marrow-derived macrophages (BMM) sebagai prekursor sel osteoklas dengan bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Tujuan: Menganalisis interaksi langsung antara sel BMM dengan bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Metode: Sel bone marrow dikultur selama 48 jam untuk menjadi sel BMM dan kemudian diinfeksikan oleh bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans selama 5, 15, dan 30 menit pada kondisi aerob dan anaerob. Data jumlah koloni bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans didapatkan melalui uji total plate count (TPC). Analisis kuantitatif melalui uji statistik. Hasil: Terjadi peningkatan bermakna jumlah koloni bakteri pada kelompok bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang berinteraksi dengan sel BMM, dibanding tanpa sel BMM pada kelompok paparan aerob 5 dan 15 menit. Tidak terdapat perbedaan pada jumlah koloni bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang diinfeksi pada kondisi aerob atau anaerob. Tidak ada perbedaan bermakna pada jumlah koloni bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang diinfeksi selama 5 menit, 15 menit, dan 30 menit. Kesimpulan: Interaksi langsung antara sel BMM dengan bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans memengaruhi proliferasi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Proliferasi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dipengaruhi oleh kondisi aerobik dan anaerobik, namun tidak dipengaruhi lama waktu infeksi.

---

Background: Periodontitis is a chronic inflammatory disease and classified as chronic periodontitis, aggressive periodontitis, necrotizing periodontitis, and periodontitis as a manifestation of systemic disease. Aggressive periodontitis is characterized by an increased in Aggregatibacter actinomycetemcomitans proportion. There has not been any studies that have shown the direct interactions between bone marrow derivedmacrophages cells, as osteoclast precursor cells, with Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Purpose: To analyse direct interactions between bone marrowderived macrophages (BMM) cells and Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Methods: Bone marrow cells from C57BL/6 mice were cultured for 48 hours in order to differentiate into BMM cells. BMM cells were then infected with Aggregatibacter actinomycetemcomitans for 5 minutes, 15 minutes, and 30 minutes in an aerobic and anaerobic environment. Total plate count of Aggregatibacter actinomycetemcomitans were analysed as a quantitative data using statistical analysis Results: Statistically, significant difference between Aggregatibacter actinomycetemcomitans-infected BMM and control group were observed on 5 minutes and 15 minutes aerobic groups. There were no statistically difference in Aggregatibacter actinomycetemcomitans colony count number between cultures in aerobic or anaerobic environment. No statistically significant difference were found in Aggregatibacter actinomycetemcomitans colony count number between 5, 15, and 30 minutes infection time. Conclusions: Direct interactions between BMM cells and Aggregatibacter actinomycetemcomitans affect Aggregatibacter actinomycetemcomitans proliferation. Bacterial proliferation is affected by aerobic or anaerobic environments, but not infection time"

"Latar Belakang: Periodontitis adalah penyakit inflamasi yang merusak jaringan pendukung gigi meliputi gusi, ligamen periodontal, dan tulang alveolar. Salah satu tipe penyakit ini adalah periodontitis agresif yang dicirikan dengan kerusakan tulang yang cepat akibat aktivitas sel osteoklas yang berlebih. Tipe tersebut sering dikaitkan dengan bakteri Gram negatif Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Namun, interaksi langsung antara bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas sebagai cikal dari sel osteoklas belum diketahui. Tujuan: Mengetahui pengaruh interaksi langsung dari bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas terhadap proliferasi bakteri. Metode: Studi in vitro dengan melakukan paparan bakteri A. actinomycetemcomitans terhadap sel preosteoklas yang didapatkan dari bone marrow cells mencit dalam keadaan aerob dan anaerob selama 30 menit. Kemudian medium pascapaparan tersebut dilakukan total plate count dengan teknik spread plate. Hasil: Rerata jumlah koloni bakteri (CFU/mL) pada kelompok paparan secara signifikan lebih rendah dibandingkan dengan kelompok kontrol yang tidak diinteraksikan dengan sel preosteoklas baik dalam keadaan aerob maupun anaerob (p<0,05). Sementara itu, perbandingan rerata jumlah koloni kelompok yang dipaparkan dalam kondisi aerob cenderung menghasilkan lebih banyak koloni dibandingkan kelompok anaerob (p<0,05). Kesimpulan: Interaksi langsung antara bakteri A. actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas menurunkan tingkat proliferasi bakteri ekstraseluler diduga akibat internalisasi bakteri terhadap sel preosteoklas yang membutuhkan penelitian lebih lanjut.

---

Background: Periodontitis is an inflammatory disease that affects the supporting tissues of the teeth, including the gingiva, periodontal ligament, and alveolar bone. One type of periodontitis is aggressive periodontitis, which is characterized by rapid bone destruction due to overactivity of osteoclasts. This type of periodontitis is often associated with Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Gram-negative bacteria. However, the direct interaction between A. actinomycetemcomitans bacteria and preosteoclasts as the precursor of osteoclasts was still unclear. Objective: To determine the effect of direct interaction of A. actinomycetemcomitans with preosteoclasts on bacterial proliferation. Methods: In vitro study by A. actinomycetemcomitans bacterial infection to preosteoclasts that obtained from bone marrow cells of mice under aerobic and anaerobic conditions for 30 minutes. Then the medium from the infection was collected. The total plate count is then carried out on the post-exposure medium using the spread plate technique. Results: The mean number of bacterial colonies (CFU/mL) in the exposure group was significantly lower than the control group which did not interact with preosteoclasts in both aerobic and anaerobic conditions (p<0.05). Meanwhile, the comparison of the mean number of colonies in the exposure group in aerobic conditions tended to produce more colonies than the anaerobic group (p<0.05). Conclusion: The direct interaction between A. actinomycetemcomitans bacteria and preosteoclasts affects the rate of extracellular bacterial proliferation that presumed to be due to the internalization of bacteria into preosteoclasts which requires further research."

"Latar Belakang: Periodontitis ditandai oleh inflamasi kronis dengan kerusakan pada jaringan tulang alveolar yang dapat terjadi secara cepat seperti yang diamati pada periodontitis agresif. Salah satu bakteri penyebab periodontitis agresif, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, mengalami penurunan jumlah secara ekstraseluler saat berinteraksi langsung dengan sel preosteoklas yang menandakan terjadinya internalisasi Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Secara internal di dalam sel preosteoklas, bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans berpotensi untuk melakukan replikasi. Tujuan: Menganalisis replikasi intraseluler bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dalam sel preosteoklas Metode: Eskperimental secara in vitro dengan sel preosteoklas yang dikultur dari bone marrow cells (BMC) mencit diinfeksikan dengan bakteri A. actinomycetemcomitans (ATCC 29522) selama 75 menit, 90 menit, 3 jam, dan 19,5 jam, kemudian sel preosteoklas dilisis dan dikultur untuk melihat apakah terjadi internalisasi bakteri Hasil Penelitian: Jumlah koloni dan luas permukaan koloni bakteri A. actinomycetemcomitans (ATCC 29522) yang terbentuk pada kelompok 90 menit lebih kecil dibanding kelompok perlakuan interaksi 75 menit, sedangkan pada kelompok 3 jam lebih besar dibanding 19,5 jam. Kesimpulan: Tidak dapat dianalisis replikasi intraseluler bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans pada sel preosteoklas pasca infeksi 1,5 jam dan 19,5 jam karena kondisi sel preosteoklas pada 19,5 jam yang tidak optimal.

---

Background: Periodontitis is characterized by chronic inflammation with destruction of tooth supporting tissue such as alveolar bone with rapid onset as observed on aggressive periodontitis. One of a bacterium that causes aggressive periodontitis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans’s number decrease upon interacting directly with preosteoclast cells that indicates that internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans into preosteoclast cells. Inside the preosteoclast cell, Aggregatibacter actinomycetemcomitans have the potential to intracellularly replicates. Objective : To analyze the intracellular replication of A. actinomycetemcomitans bacteria in preosteoclast cells. Methods: Experimental in vitro with preosteoclast cells cultured from bone marrow cells (BMC) of mice infected with A.actinomycetemcomitans bacteria for 75 minutes, 90 minutes, 3 hours, and 19,5 hours, then preosteoclast cells were lysed and cultured to see if bacterial internalization occurred. Results: A. actinomycetemcomitans bacterial (ATCC 29522) colonies formed on agar culture showed that the number of colonies, as well as their surface area on groups with 75 minutes of infection is greater than groups with 90 minutes of infection. And the number of colonies formed on groups with 3 hours infection is greater than those of group with 19,5 hours of infection. Conclusion: Intracellular replication of A. actinomycetemcomitans can not be analyzed on groups with infection for 1,5 hours and 19,5 hours because the cell condition of preosteclast cell is no longer optimal."

"Latar belakang: Bakteri A. actinomycetemcomitans merupakan patogen utama yang berperan dalam patogenesis periodontitis agresif. Dalam interaksi antara sel osteoklas dengan bakteri, terdapat peran dari faktor virulensi bakteri A. actinomycetemcomitans dalam proses adhesinya ke permukaan sel, yaitu omp100. Adhesi bakteri pada sel, yang didukung oleh protein omp100, dapat mengakibatkan terjadinya disbiosis dalam ekosistem rongga mulut, yang berakibat pada terjadinya aktvivitas sel osteoklas secara berlebihan dan berefek pada destruksi tulang. Tujuan: Menganalisis ekspresi gen omp100 pada interaksi direk antara sel osteoklas dan sel prekursornya dengan bakteri A. actinomycetemcomitans. Metode: Secara in vitro dengan metode eksperimental laboratorium, dengan sel osteoklas yang diperoleh dari hasil kultur Bone Marrow Cell (BMC) mencit C57BL/6. Sel yang diperoleh kemudian diberi paparan M-CSF (Macrophage-Colony Stimulating Factors) agar berdiferensiasi menjadi sel BMM (Bone Marrow Macrophage), serta diberi paparan M-CSF dan RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa-B Ligand) agar berdiferensiasi menjadi sel preosteoklas dan osteoklas. Sel diinfeksikan dengan bakteri A. actinomycetemcomitans dengan MOI (multiplicity of infection) 1:1 dan 1:5, kemudian dilakukan pengamatan bakteri intraseluler pada 1,5 dan 18 jam pasca infeksi untuk melihat internalisasi dan proliferasi bakteri berdasarkan ekspresi gen omp100. Hasil: Terjadi penurunan ekspresi gen omp100 pada sel BMM 18 jam pasca infeksi. Pada sel preosteoklas dan osteoklas, terjadi peningkatan ekspresi gen pada 18 jam pasca infeksi. Kesimpulan: Terjadinya peningkatan ekspresi gen omp100 berkorelasi positif dengan jumlah bakteri instraseluler yang diamati pada 1,5 dan 18 jam pasca infeksi. Peningkatan ekspresi gen omp100 terjadi akibat meningkatnya jumlah bakteri intraseluler, yang artinya bakteri di dalam sel mengalami proliferasi dan mampu terfasilitasi dengan baik di dalam sel preosteoklas dan osteoklas.

---

Background: Aggregatibacter actinomycetemcomitans is a major pathogen bacterium that plays role in the pathogenesis of aggressive periodontitis. In the interaction between osteoclast cells and bacteria, there is a role of the virulence factor of A. actinomycetemcomitans in the process of adhesion to the cell surface, namely omp100. The adhesion of these bacteria to cells, which is supported by the omp100 protein, can lead to dysbiosis in the oral ecosystem, which results in excessive osteoclast cell activity and effects on bone destruction. Purpose: To analyze the expression of omp100 gene in the interaction between osteoclast cells and their precursor cells with A. actinomycetemcomitans. Methods: In vitro research with laboratory experimental methods, using osteoclast cells obtained from Bone Marrow Cell (BMC) cultured from C57BL/6 mice. The cells obtained will then be given exposure to M-CSF (Macrophage-Colony Stimulating Factors) to differentiate into BMM cells (Bone Marrow Macrophage), and also be given exposure to M-CSF and RANKL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa-B Ligand) to differentiate into preosteoclast and osteoclast cells. Cells were infected with A. actinomycetemcomitans with MOI (multiplicity of infection) of 1:1 and 1:5, then intracellular bacteria were observed at 1,5 and 18 hours post-infection to see the internalization and proliferation of bacteria. Results: There was a decrease in omp100 gene expression in BMM cells at 18 hours post-infection. In preosteoclast and osteoclast cells, there was an increase in gene expression at 18 hours post-infection. Conclusions: The increase in omp100 gene expression was positively correlated with the number of intracellular bacteria observed at 1,5 and 18 hours post-infection. The increase in omp100 gene expression occurred due to the increase in the number of intracellular bacteria, which means that the bacteria in the cells proliferated and were able to be well facilitated in preosteoclast and osteoclast cells."

"Latar Belakang: Periodontitis adalah penyakit inflamasi kronis yang ditandai dengan kerusakan pada jaringan pendukung gigi seperti ligamen periodontal dan tulang alveolar. Periodontitis dapat bersifat agresif dengan melibatkan Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang memiliki kemampuan menginduksi inflamasi melalui produksi dan sekresi beberapa faktor virulensi. Kemampuan A. actinomycetemcomitans untuk menginvasi berperan penting dalam perkembangan periodontitis agresif. Maka dari itu diperlukan penelitian untuk melihat apakah dalam waktu 30 menit bakteri A. actinomycetemcomitans mampu untuk menginvasi sel preosteoklas ketika berinteraksi langsung. Tujuan: Menganalisis internalisasi bakteri A. actinomycetemcomitans ke dalam sel preosteoklas pasca infeksi 30 menit. Metode : Eksperimental secara in vitro dengan sel preosteoklas yang dikultur dari bone marrow cells (BMC) mencit diinfeksikan dengan bakteri A.actinomycetemcomitans (ATCC 29522) selama 30 menit, kemudian sel preosteoklas dilisis dan dikultur untuk melihat apakah terjadi internalisasi bakteri. Hasil: Koloni bakteri A. actinomycetemcomitans intraseluler (ATCC 29522) yang terbentuk pada kultur agar menandakan adanya internalisasi bakteri dari hasil lisis sel preosteoklas yang sudah diinfeksikan dengan bakteri A. actinomycetemcomitans (ATCC 29522). Kesimpulan: Terjadi internalisasi bakteri A. actinomycetemcomitans ke dalam sel preosteoklas setelah diinfeksi selama 30 menit yang merupakan salah satu mekanisme pertahanan bakteri A.actinomycetemcomitans yang berpotensi berperan dalam perkembangan periodontitis agresif.

---

Background: A chronic inflammatory condition called periodontitis causes harm to the tissues that support the teeth, including the alveolar bone and the periodontal ligament. Aggregatibacter actinomycetemcomitans, which has the capacity to cause inflammation by the synthesis and secretion of various virulence factors, may play a role in aggressive periodontitis. The invasion potential of A. actinomycetemcomitans is crucial to the emergence of aggressive periodontitis. Therefore, more study is required to determine whether A. actinomycetemcomitans can invade preosteoclast cells within 30 minutes of direct contact. Purpose: To analyze the internalization of A. actinomycetemcomitans into preosteoclasts cells after being infected for 30 minutes. Methods: Experimental in vitro with preosteoclasts cells cultured from bone marrow cells (BMC) of mice infected with A.actinomycetemcomitans bacteria for 30 minutes, then preosteoclasts cells were lysed and cultured to see if bacterial internalization occurred. Results: A. actinomycetemcomitans bacterial (ATCC 29522) colonies formed on agar culture indicates the internalization of bacteria from the lysis of preosteoclasts cells that had been infected with A. actinomycetemcomitans (ATCC 29522). Conclusion: There was internalization of A. actinomycetemcomitans into preosteoclasts cells after being infected for 30 minutes, which is one of the defense mechanisms of A. actinomycetemcomitans and has the potential to play a role in the development of aggressive periodontitis."

"Latar belakang: Periodontitis merupakan penyakit inflamasi kronis yang mengakibatkan terjadinya kerusakan pada sementum, tulang alveolar, dan ligamen periodontal. Periodontitis agresif merupakan salah satu tipe periodontitis dengan kerusakan tulang yang cepat akibat meningkatnya aktivitas sel osteoklas dan sering dikaitkan dengan salah satu bakteri Gram negatif yaitu Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang dapat menginvasi inang dan terjadi penurunan jumlah ekstraseluler ketika diinfeksikan dengan sel preosteoklas yang menunjukkan adanya potensi internalisasi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans ke dalam sel preosteoklas untuk menghindari mekanime pertahanan sel inang sehingga laju kerusakan tulang alveolar meningkat. Pada penelitian ini memperhatikan waktu interaksi langsung antara bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas dalam kurun waktu yang singkat selama 15 menit. Tujuan: Menganalisis adanya internalisasi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans pada sel preosteoklas pasca infeksi 15 menit. Metode: Studi in-vitro dengan membuat kultur bone marrow cells pada conditioned medium, lalu diinkubasi untuk menjadi sel preosteoklas. Setelah diinkubasi, bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans diinfeksikan ke dalam sel preosteoklas selama 15 menit. Setelah itu, bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dilisis menggunakan antibiotik gentamisin selama 1 jam, lalu medium dikumpulkan dan disimpan. Kemudian sel preosteoklas dilisis dan dilakukan kultur bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dari medium yang disimpan dan hasil lisis sel preosteoklas untuk dilihat ada tidaknya koloni bakteri. Hasil: Terdapat koloni bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans pada kultur bakteri setelah diinfeksikan dengan sel preosteoklas selama 15 menit. Kesimpulan: Interaksi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans dengan sel preosteoklas selama 15 menit menyebabkan terjadi internalisasi bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans ke dalam sel preosteoklas.

---

Background: Periodontitis is a chronic inflammatory disease that causes loss to the cementum, alveolar bone, and periodontal ligament. Aggressive periodontitis is a type of periodontitis with rapid bone destruction due to increased activity of osteoclast cells and is often associated with one of Gram negative bacteria that is Aggregatibacter actinomycetemcomitans which can invade the host and there is a decrease in the number of extracellular when infected with the preosteoclast cells that indicates the potential for internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria into preosteoclast cells to avoid host cell defense mechanisms so that the rate of alveolar bone destruction increases. In this study, the direct interaction time between Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria and preosteoclast cells was observed in a short time of 15 minutes. Purpose: To analyzing the internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria in the preosteoclast cells after 15 minutes of infection. Methods: In-vitro study of bone marrow cells culture in conditioned medium, and then incubated to become preosteoclast cells. After incubation, Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria were infected into the preosteoclast cells for 15 minutes. After that, Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria was lysed using the antibiotic gentamisin for 1 hour, then the medium was collected and stored. Then the preosteoclast cells were lysed and Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria was cultured from the stored medium and the results of the preosteoclast cells lysis to see the presence or absence of bacterial colonies. Results: There were colonies of Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria in bacterial culture after being infected with preosteoclast cells for 15 minutes. Conlusions: The interaction of Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria with preosteoclast cells for 15 minutes causes internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans bacteria into preosteoclast cells."

"Latar Belakang: Uji tube formation merupakan uji paling luas yang digunakan sebagai uji vaskulogenesis/ angiogenesis secara in vitro. Sel punca mesenkimal atau mesenchymal stem cell MSC merupakan sel punca dewasa yang multipoten. Efek parakrinnya terhadap neovaskularisasi sudah banyak diketahui. Secara umum MSC diketahui tidak mengekspresikan penanda permukaan hematopoetik CD34 namun ada pendapat yang menyatakan bahwa MSC secara in vivo mengekspresikan CD34 dan kehilangan ekspresinya saat dikultur secara in vitro. MSC asal lemak dianggap masih memiliki ekspresi CD34 pada kultur in vitro pada pasase awal oleh beberapa ahli. MSC yang paling banyak digunakan dalam uji tube formation adalah BM-MSC padahal ASC juga berpotensi bagi terapi dan rekayasa sel punca. Hingga saat ini potensi vaskulogenesis antara ASC dan BM-MSC masih belum jelas mana yang lebih baik dan apakah ekspresi CD34 mempengaruhi hal ini. Pada penelitian ini kami ingin membandingkan potensi vaskulogenesis antara MSC asal lipoaspirat dengan MSC asal sumsum tulang melalui uji tube formation dan ekspresi CD34. Hasil: Pengukuran kualitas vaskulogenesis menunjukkan bahwa rerata panjang tube lebih tinggi pada BM-MSC, rerata jumlah loop lebih banyak pada BM-MSC dan rerata jumlah titik percabangan lebih banyak pada BM-MSC. Tidak ditemukan kadar CD34 yang tinggi pada ASC. Kesimpulan: BM-MSC memiliki kemampuan lebih baik dalam membentuk tube formation dibandingkan dengan ASC. Tidak ditemukan hubungan antara kadar CD34 dengan kemampuan vaskulogenesis MSC.

---

Objective: Test tube formation is the most widely used method as an in vitro vasculogenesis test. Mesenchymal stem cells MSC is a multipotent adult cells known not expressing CD34 just like endothelial progenitor cells EPC that play a role in vasculogenesis. Adipose derived stem cells MSCs ASC is considered to still express CD34 2 in cultures. Bone Marrow BM MSCs is most widely used MSCs in vasculogensis research. ASC has great potential for stem cell therapy and engineering. The potential of vasculogenesis between ASC and BM MSC remains unclear which one is better and whether CD34 expression affects this. In this study we wanted to compare the potential of vasculogenesis between MSC of lipoaspiric origin and MSC from bone marrow through tube formation test and CD34 expression. Tube formation assay is the most widely used method as an in vitro vasculogenesis test. Mesenchymal stem cells MSCs are multipotent adult cells. known not to express CD34 surface marker which is expressed by haemapoietic stem cells, but according to some experts bone marrow mesenchymal stem cells BM MSCs express CD34 in vivo and lose its expression when they are cultured in vitro, while adipose derived stem cells ASCs still have CD34 expression in the early passages when cultured in vitro. BM MSCs are the most widely used MSC, but ASCs are also used in stem cell therapy and tissue engineering for angiogenesis purposes. Until now the potential of vasculogenesis between ASCs and BM MSCs is still unclear. Expression of CD34 is also unknown whether effecting the quality of tube formation. In this study we wanted to compare the potential of vasculogenesis between ASC and BM MSCs through tube formation test and CD34 expression.

Results: Measurements of vasculogenesis quality showed higher tube length, number of loops and mean number of branch points on BM MSC. Both BM MSCs and ASCs showed low CD34 levels.

Conclusion: BM MSCs showed better tube formation ability compared with ASCs. No association was found between CD34 levels and MSC vasculogenesis capability. "

"PendahuluanPeriodontitis adalah penyakit pada jaringan penyangga gigi yang dikategorikan sebagai inflamasi tidak menular dan berkaitan dengan keadaan disbiosis biofilm. Penyakit tersebut memengaruhi seluruh jaringan periodontal dan dapat menyebabkan destruksi progresif pada tulang alveolar. Periodontitis dapat dipicu oleh bakteri seperti Aggregatibacter actinomycetemcomitans yang selanjutnya mempengaruhi osteoklastogenesis dan terjadinya kerusakan jaringan. Internalisasi dan proliferasi bakteri A. actinomycetemcomitans di dalam sel osteoklas dapat meningkatkan faktor virulensi seperti lipoposakarida (LPS) yang berperan dalam diferensiasi osteoklas yang ditandai dengan gen penanda, salah satunya Cathepsin K (CTSK). Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis diferensiasi osteoklas melalui analisis ekspresi gen penanda diferensiasi osteoklas yaitu CTSK.MetodeOsteoklas (OC) diperoleh dari kultur primer bone marrow macrophage (BMM), yang dipaparkan dengan nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) selama 3 hari. Kemudian diinfeksikan dengan bakteri A. actinomycetemcomitans (ATCC 29522) dengan perbandingan MOI 1:1 dan 1:5. Selanjutnya dievaluasi 1,5 jam dan 18 jam pasca infeksi (hpi) menggunakan RT-qPCR dengan teknik Livak (2-∆∆Ct).HasilEkspresi relatif gen CTSK pada BMM dengan perlakuan MOI 1:1 pada 1,5 hpi (2-∆∆Ct = 1,00) dan 18 hpi (2-∆∆Ct = 0,99), serta perlakuan MOI 1:5 pada 1,5 hpi (2-∆∆Ct = 1,00) dan 18 hpi (2-∆∆Ct = 1,04) cenderung tidak menunjukan adanya perubahan. Sedangkan pada OC dengan MOI 1:1 pada 1,5 hpi (2-∆∆Ct = 1,00) dan 18 hpi (2-∆∆Ct = 1,64), serta perlakuan MOI 1:5 pada 1,5 hpi (2-∆∆Ct = 1,00) dan 18 hpi (2-∆∆Ct = 3,27) cenderung menunjukan adanya peningkatan pada 18 hpi. Perbandingan kelompok OC 18 hpi pada perlakuan MOI 1:5 (2-∆∆Ct = 4,26) menunjukkan peningkatan ekspresi gen CTSK sekitar 4 kali dibanding perlakuan MOI 1:1 (2-∆∆Ct = 1,00).KesimpulanPeningkatan ekspresi gen CTSK pada osteoklas berkorelasi positif dengan jumlah bakteri yang menginfeksi dan waktu paparan bakteri dengan sel osteoklas. Peningkatan ekspresi CTSK tersebut diduga berhubungan dengan terjadinya internalisasi bakteri kedalam sel osteoklas.

---

Introduction

Periodontitis is a disease affecting the supportive tissues of the teeth, categorized as a non-communicable inflammation associated with dysbiosis of the biofilm. This disease impacts the entire periodontal tissue and can cause progressive destruction of alveolar bone. Periodontitis can be triggered by bacteria such as Aggregatibacter actinomycetemcomitans, subsequently affecting osteoclastogenesis and tissue damage. The internalization and proliferation of A. actinomycetemcomitans bacteria inside osteoclast cells can directly increase virulence factors such as lipopolysaccharide (LPS), playing a role in osteoclast differentiation marked by genes, including Cathepsin K (CTSK). This study aims to analyze osteoclast differentiation through the analysis of the marker gene expression for osteoclast differentiation, namely CTSK.

Methods

Osteoclasts (OC) were obtained from primary cultures of bone marrow macrophages (BMM), exposed to nuclear factor kappa-B ligand (RANKL) for 3 days. They were then infected with A. actinomycetemcomitans bacteria (ATCC 29522) with a ratio of MOI 1:1 and 1:5. Subsequently, they were evaluated at 1.5 hours and 18 hours post-infection (hpi) using RT-qPCR with the Livak method (2-∆∆Ct).

Results

The relative expression of CTSK gene in BMM cells with MOI 1:1 treatment at 1.5 hpi (2-∆∆Ct = 1.00) and 18 hpi (2-∆∆Ct = 0.99), as well as MOI 1:5 treatment at 1.5 hpi (2-∆∆Ct = 1.00) and 18 hpi (2-∆∆Ct = 1.04), tended to show no significant changes. In OC with MOI 1:1 treatment at 1.5 hpi (2-∆∆Ct = 1.00) and 18 hpi (2-∆∆Ct = 1.64), as well as MOI 1:5 treatment at 1.5 hpi (2-∆∆Ct = 1.00) and 18 hpi (2-∆∆Ct = 3.27), there was a tendency to increase at 18 hpi. The comparison of OC groups at 18 hpi with MOI 1:5 (2-∆∆Ct = 4.26) showed a fourfold increase in CTSK gene expression compared to MOI 1:1 treatment (2-∆∆Ct = 1.00).

Conclusion

The increased expression of the CTSK gene in osteoclasts positively correlates with the number of infecting bacteria and the duration of bacterial exposure to osteoclast cells. This heightened CTSK expression is presumed to be associated with the internalization of bacteria into osteoclast cells."

"Latar belakang: Bakteri ggregatibacter actinomycetemcomitans merupakan salah satu penyebab periodontitis. Ia memiliki kemampuan untuk berinteraksi langsung dengan sel-sel imun, termasuk sel osteoklas. Salah satu mekanisme interaksi bakteri AA dengan sel osteoklas adalah melalui ekspresi gen CSF1R pada sel osteoklas. CSF1R adalah reseptor untuk sitokin CSF1, yang berperan dalam regulasi fungsi sel osteoklas. Ekspresi gen CSF1R yang meningkat pada sel osteoklas dapat meningkatkan fungsi resorpsi tulang oleh sel tersebut. Peningkatan ekspresi gen CSF1R pada sel osteoklas akibat interaksi dengan bakteri AA dapat menyebabkan kerusakan tulang yang lebih parah pada penderita periodontitis. Tujuan: Menganalisis ekspresi gen CSF1R pada interaksi bakteri AA dengan sel bone marrow macrophage, preosteoklas, dan osteoklas. Metode: Penelitian eksperimental laboratorium secara in vitro pada sel bone marrow macrophage, preosteoklas dan osteoklas yang dikultur dari BMC mencit C57BL/6 jantan. Hasil: Terjadi peningkatan ekspresi gen CSF1R pada sel preosteoklas dan sel osteoklas pasca infeksi 18 jam dibanding sel pasca infeksi 1,5 jam, pada perlakuan MOI 1:1 maupun MOI 1:5. Lalu pada perlakuan MOI 1:5 dibanding MOI 1:1 terjadi peningkatan ekspresi gen CSF1R pada perlakuan MOI 1:5. Kesimpulan: Diketahui bahwa konsentrasi bakteri AA yang diinfeksikan pada sel osteoklas serta lamanya waktu paparan dapat mempengaruhi internalisasi bakteri AA dan peningkatan ekspresi gen CSF1R.

---

Background: Aggregatibacter actinomycetemcomitans is a Gram-negative bacterium that is one of the causes of periodontitis. AA has the ability to interact directly with immune cells, including osteoclasts. One mechanism of Aggregatibacter actinomycetemcomitans interaction with osteoclasts is through the expression of the CSF1R gene in osteoclasts. CSF1R is the receptor for the cytokine CSF1, which plays a role in regulating the function of osteoclasts. Increased expression of the CSF1R gene in osteoclasts can enhance their bone resorption function. Elevated CSF1R gene expression in osteoclasts due to interaction with Aggregatibacter actinomycetemcomitan can lead to more severe bone damage in periodontitis patients. Objecive: To analyze the CSF1R gene expression in the interaction between AA bacteria in bone marrow macrophage cells, preosteoclasts, and osteoclasts. Methods: This study is an in vitro laboratory experimental study on bone marrow macrophage cells, preosteoclast, and osteoclast cells cultured from C57BL/6 BMCs. Results: The results show increase in CSF1R gene expression in preosteoclast and osteoclasts after 18 hours of infection compared to 1,5 hours post-infection, both in the MOI 1:1 and MOI 1:5 treatments. Then, in the MOI 1:5 treatment compared to MOI 1:1, it was found that there is an increase in CSF1R gene expression in the MOI 1:5 treatment. Conclusion: It is known that the concentration of AA infected in osteoclast and the duration of its exposure can affect the internalization of Aggregatibacter actinomycetemcomitans and the increased expression of the CSF1R gene."