Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Pendahuluan Fibrosis hati adalah kondisi ketika hati mengalami cedera kronis dan terbentuk jaringan parut termasuk kolagen sehingga tidak lagi mampu berfungsi dengan baik. Terapi sel punca mesenkimal asal tali pusat merupakan terapi regeneratif yang dikembangkan untuk penyembuhan penyakit jejas hati kronis. Hasil penelitian terdahulu terhadap tikus yang diinduksi dengan 2AAF/CCl4 dan diberi sel punca mesenkimal asal tali pusat dosis 1 x 106 menunjukkan adanya perbaikan fibrosis hati yang ditimbulkan akibat pemberian 2AAF/CCl4 tersebut. Penelitian ini akan menggunakan CCl4, suatu zat yang akan merusak hati tikus secara akut dan akan membandingkan dua dosis sel punca mesenkim asal tali pusat yaitu dosis 1 x 106 dan 3 x 106. Metode Penelitian ini menggunakan bahan biologis tersimpan blok parafin dari jaringan hati tikus Wistar yang dipulas dengan pulasan khusus Masson’s Trichrome. Terdapat empat kelompok sampel yang digunakan, yaitu kelompok CCl4, kelompok 1 x 106 sel punca, kelompok 3 x 106 sel punca, dan kelompok kontrol sehat. Seluruh pulasan dari tiap kelompok difoto menggunakan kamera yang terhubung ke mikroskop. Derajat fibrosis pada setiap lapangan pandang dihitung menggunakan kriteria NASH beserta luas hati yang terkena fibrosis. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik untuk mengetahui dosis mana yang lebih baik untuk memperbaiki fibrosis hati.Hasil Kelompok tikus dengan induksi CCl4 saja menunjukkan 100% sampel mengalami fibrosis, sedangkan kelompok sehat memperlihatkan hanya sekitar 30% sampel yang mengalami fibrosis. Kelompok tikus dengan induksi CCL4 dan diberikan 1 x 106 sel punca menunjukkan 71% sampel masih mengalami fibrosis, sedangkan pada kelompok dengan pemberian 3 x 106 sel punca jumlah sel yang mengalami fibrosis adalah 87%. Tidak terdapat perbedaan bermakna antara derajat fibrosis di semua kelompok uji. Di sisi lain, pemberian 1 x 106 sel punca berhasil menurunkan luas hati yang terkena fibrosis.

---

Background Liver fibrosis is the excessive accumulation of extracellular matrix proteins including collagen that occurs in most types of chronic liver diseases. Previous studies have shown that the injection of mesenchymal stem cell is beneficial to alleviate liver fibrosis. However, the optimum dose of stem cell that must be administered is not yet fully understood. Previous research used 1 x 106 stem cells to treat 2AAF/CCl4 – induced rat liver which simulates a chronic liver injury. Results show that the degree of fibrosis was significantly reduced. In this study, only CCl4 will be used to simulate an acute liver injury and two doses of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cell (hUC-MSC), 1 x 106 and 3 x 106, is used to analyze which dose is better to treat liver fibrosis. Methods This study uses archived biological materials on Wistar rat livers as formalin-fixed-paraffin-embedded (FFPE) which has been treated with Masson’s Trichrome staining. Four group samples were used in this study, which are the CCl4 group, 1 x 106 hUC-MSC group, 3 x 106 hUC-MSC group, and healthy control group. Slide samples were photographed using a microscope and the results collected. The degree of fibrosis is then investigated using the NASH criteria and the mean percentage affected area is calculated. Further statistical analysis is conducted to know which treatment is better at reducing liver fibrosis. Results The group with the highest degree of fibrosis is the CCl4 group with 100% of the samples experiencing fibrosis. On the other side, the healthy control group has the lowest degree of fibrosis where around 70% of the samples showing no fibrosis. Both the 1 x 106 and 3 x 106 hUC-MSC group show some samples having no fibrosis while the majority still had fibrosis of different degrees. Approximately 29% of the samples of the 1 x 106 hUC-MSC group did not show fibrosis while only 13% of the samples showed no fibrosis in the 3 x 106 hUC-MSC group. However, there were no statistical difference in the degree of fibrosis found in all the samples. On the contrary, analysis of the fibrosis affected area showed that the 1 x 106 group is beneficial to reduce the affected area of liver fibrosis. Conclusion The administration of 3 x 106 stem cells does not create a better outcome in terms of liver fibrosis. In contrast, the group which was treated with only 1 x 106 stem cells showed that there is a decrease in the affected area of fibrosis even if the degree of fibrosis was not significantly decreased."

"Penyakit hati kronik telah menyerang sebagian besar populasi dunia, dengan kurang lebih 41,473 kematian pertahun di Amerika Serikat. Sirosis, sebagai tahap akhir dari penyakit ini menyebabkan kerusakan hati melalui proses neo-angiogenesis, penyusunan kembali sistem vaskular, dan pengendapan matriks selular tambahan. Hati adalah organ regeneratif yang dapat memperbaiki kerusakan. Pada kondisi hati sudah tidak dapat mengkompensasi kerusakan, transplan hati adalah pilihan pengobatan utama walaupun dianggap mahal dan tidak mudah tersedia. Terapi sel punca mesenkim asal tali pusat dengan dosis 1 x 106 pada pasien dengan penyakit hati kronik telah dilakukan dalam beberapa kajian, walaupun tidak cukup konklusif untuk digunakan secara klinis. Oleh sebab itu, dilakukan penelitian ini pada kondisi cedera hati kronis pada hewan model dengan pemberian terapi suntik sel punca mesenkim asal tali pusat dengan dosis yang berbeda yakni 1 x 106 dan 3 x 106 sel. Bahan biologi tersimpan hati tikus diproses dan diwarnai dengan Masson Trichrome untuk digunakan pada penelitain ini. Terdapat empat kelompok sampel penelitian: kelompok sehat sebagai kelompok kontrol, kelompok induksi 2AAF/CCl4 tanpa sel punca mesenkimal, kelompok 2AAF/CCl4 dengan 1 x 106 sel punca mesenkimal, dan kelompok induksi 2AAF/CCl4 dengan 3 x 106 sel punca mesenkimal. Tahap fibrosis dianalisis menggunakan kriteria NASH dan cakupan area digunakan untuk melihat perbedaan antara tahap fibrosis dalam setiap kelompok. Hasil riset menunjukkan bahwa kelompok induksi 2AAF/CCl4 tanpa sel punca mesenkimal mempunyai tahap fibrosis yang paling tinggi, diikuti dengan kelompok induksi 2AAF/CCl4 yang disuntik dengan 1 x 106 sel punca mesenkimal,kelompok induksi 2AAF/CCl4 dengan 3 x 106 sel punca mesenkimal, dan terakhir kelompok kontrol. Kedua kelompok yang diinduksi dengan 1 x 106 dan 3 x 106 sel punca mesenkimal efektif dalam menurunkan area cakupan fibrosis dalam sampel. Penelitian selanjutnya dapat dilakukan dengan penambahan jumlah sampel, lebih banyak kriteria parameter yang diamati seperti nekrosis, inflamasi, dan sel swelling, dan induksi kimia lain untuk mendukung hasil penelitian tersebut.

---

Chronic liver disease affects a large majority of the world’s population globally, with approximately 41,473 deaths per year in the United States. Cirrhosis, being the final stage of this disease leads to several damaging processes such as neo-angiogenesis, vascular reorganization, and the deposition of extra cellular matrix. To an extent, the liver is a regenerative organ unless damaged to a point of no return. In such cases, liver transplant is the treatment of choice although it is considered to be expensive, shortage, and unavailability. The introduction of umbilical cord derived mesenchymal cells (1 x 106 stem cells) into the treatment of chronic liver disease has been implicated in several past studies, although not conclusive enough to be applied clinically. This study however aims to highlight the effectivity when chronically injured rat liver samples are injected with a dose of 3 x 106 stem cells. Archived biological material of rat liver was processed and stained with Masson Trichrome for this research. There are four experimental groups namely: the healthy group as a control, 2AAF/CCl4 induced group without stem cells, 2AAF/CCl4 induced group with 1 x 106 stem cells, and 2AAF/CCl4 induced group with 3 x 106 stem cells. The degree of fibrosis; analyzed using NASH criteria and the affected area will be used to investigate the difference between fibrosis levels in the four experimental groups. Results showed that the 2AAF/CCl4 induced group without stem cells had the highest level of fibrosis, followed by the 2AAF/CCl4 induced group injected with 1 x 106 stem cells, 2AAF/CCl4 induced group with 3 x 106 stem cells, followed by the control group. Both the groups induced with 1 x 106 and 3 x 106 stem cells were effective in lowering fibrosis affected area in samples. Further research could be carried out with a larger sample size, more criterions including necrosis, inflammation, and cell swelling, as well as other chemical inducers to support the results of this study."

"Penelitian ini bertujuan untuk melihat efek pemberian sel punca mesenkim (SPM) asal tali pusat yang diduga dapat menurunkan TGF- β1 dan meningkatkan interleukin-10 serta menurunkan derajat fibrosis hati dengan skoring fibrosis NAFLD, menggunakan blok parafin hati tikus dari penelitian sebelumnya. Tikus diberi 2AAF/CCl4 untuk menimbulkan model fibrosis, dosis CCl4 2mg/kgBB, 2AAF 10mg/kgBB dan SPM 1x106. Kelompok dibagi menjadi tiga yaitu kelompok I kontrol tidak diberi perlakuan, kelompok II diberikan 2AAF/CCl4, dan kelompok III diberikan 2AAF/CCl4 serta SPM asal tali pusat manusia. Ekspresi sitokin interleukin-10 dan TGF- β1 diperiksa dengan menggunakan pulasan imunohistokimia. Kuantifikasi pemeriksaan imunohistokimia dengan menghitung jumlah sel kupffer positif warna coklat pada sinusoid lalu dibagi dengan jumlah keseluruhan sel kemudian dikali seratus persen pada sepuluh lapang pandang. Terdapat perbedaan signifikan ekspresi TGF- β1 antara kelompok tanpa SPM dibanding dengan kelompok kontrol (p=0.02) dan kelompok SPM (p=0.04). Terdapat peningkatan bermakna ekspresi interleukin-10 antara kelompok SPM dengan kelompok kontrol (p=< 0.00) dan tanpa kelompok SPM (p=0.005). Terdapat korelasi positif TGF- β1 dengan peningkatan skoring NAFLD (r=0.39,p=0.035) dan tidak ada korelasi IL-10 dengan skoring NAFLD. Pemberian SPM dapat menurunkan ekspresi TGF-β1 dan meningkatkan ekspresi interleukin-10 pada jaringan hati tikus yang diinduksi oleh 2-AAF/CCl4 dan memperbaiki fibrosis dengan menurunkan skoring NAFLD.

---

This study aims to look at the effect of mesenchymal stem cell (SPM) originating from the umbilical cord which is thought to reduce TGF-β1 and increase interleukin-10 and reduce the degree of liver fibrosis by scoring NAFLD fibrosis, using rat liver paraffin blocks from previous studies. Mice were given 2AAF / CCl4 to cause fibrosis model, 2 mg / kgBB of CCl4 dose, 2AAF 10mg / kgBB and 1x106 SPM. The group was divided into three namely control group I was not given treatment, group II was given 2AAF / CCl4, and group III was given 2AAF / CCl4 and SPM from human umbilical cord. Interleukin-10 and TGF-β1 cytokine expressions were examined using immunohistochemical smear. Quantification of immunohistochemical examination by counting the number of brown positive kupffer cells in sinusoids and then divided by the total number of cells and then multiplied one hundred percent in ten fields of view. There was a significant difference in TGF-β1 expression between the groups without SPM compared to the control group (p = 0.02) and the SPM group (p = 0.04). There was a significant increase in the expression of interleukin-10 between the SPM group and the control group (p = <0.00) and without the SPM group (p = 0.005). There was a positive correlation of TGF-β1 with increased NAFLD scoring (r = 0.39, p = 0.035) and there was no IL-10 correlation with NAFLD scoring. Giving SPM can reduce TGF-β1 expression and increase the expression of interleukin-10 in rat liver tissue induced by 2-AAF / CCl4 and improve fibrosis by decreasing NAFLD scoring."

"

Cedera hati kronis dapat disebabkan oleh berbagai infeksi, gangguan metabolik, toksin atau gangguan sirkulasi yang jika berlanjut dapat menjadi cedera hati parah sampai sirosis hati jika tidak mendapat pengobatan yang adekuat. Disamping itu, hati memiliki kemampuan regenerasi yang tinggi untuk membantu pemulihan pasca cedera. Berbagai model cedera hati hewan coba tikus secara khusus dibuat untuk menyerupai penyakit hati kronis pada manusia. Pada penelitian ini, dikembangkan model hewan coba untuk mempelajari proses regenerasi hati menggunakan 2-AAF/CCl₄. 2-Acetylaminoflourene (2-AAF) yang menghambat proliferasi hepatosit, sedangkan Carbon tetrachlorida (CCl₄) digunakan untuk menginduksi fibrosis hati dan sirosis hati. Setelah pembuatan model hewan coba 2-AAF/CCl₄ kemudian diberikan sel punca mesenkimal asal tali pusat manusia dengan harapan dapat memberikan efek positif pada cedera hati kronis yang dinilai dari parameter kadar ALT, Albumin, perubahan anatomi dan histologi dari jaringan hati tikus. Dalam penelitian ini, dalam pembuatan model hewan coba menggunakan tikus winstar jantan dengan pemberian CCl₄ dua kali seminggu (2ml/kg) diencerkan dalam olive oil, pemberian secara subkutan selama 12 minggu. Kemudian dikombinasikan dengan 2-AAF setiap hari diencerkan dalam polietilen glikol, pemberian secara intragastrik. Kelompok percobaan terlihat peningkatan kadar ALT, tidak ada perbedaan untuk kadar Albumin, perubahan warna hati menjadi lebih terang dengan permukaan kasar dan bernodul serta memiliki ukuran lebih besar dibandingkan dengan kontrol yang memiliki hati dengan warna merah gelap, permukaan licin tanpa nodul. Selanjutnya dilakukan juga pemeriksaan histopatologis dengan pewarnaan HE, masson trichome dan imunohistokimia (ekspresi kaspase 3), didapatkan hasil yang menunjukkan adanya kerusakan hati (fat degeneration, nekrosis, cell swelling, inflamasi dan fibrosis hati, serta kematian hepatosit). Pada kelompok yang diberikan sel punca asal tali pusat manusia dapat memperbaiki kerusakan hati yang ditandai dengan kecenderungan penurunan kadar ALT, kecenderungan peningkatan kadar albumin, perbaikan anatomi berupa warna hati merah gelap dengan permukaan licin, perubahan histologi yaitu perbaikan jaringan, penurunan derajat fibrosis dan penurunan kematian sel.

 

---

Chronic liver injury can be caused by a variety of infections, metabolic disorders, toxins or circulatory disorders which, if it continues, can become severe liver injury to cirrhosis of the liver if it does not receive adequate treatment. Besides that, the liver has a high regeneration ability to help with post-injury recovery. Various models of animal liver injury in rats tried specifically made to resemble chronic liver disease in humans. In this research, an experimental animal model was developed to study the process of liver regeneration using 2-AAF/CCl₄. 2-Acetylaminoflourene (2-AAF) which inhibits hepatocyte proliferation, while Carbon tetrachloride (CCl₄) is used to induce liver fibrosis and liver cirrhosis. After making 2-AAF/CCl₄ experimental animal models, human umbilical cord derived mesenchymal stem cells were given in the hope that they would have a positive effect on chronic liver injury assessed by parameters of ALT, albumin, anatomic and histological changes in rat liver tissue. In this study, in making animal models using male winstar rats by administering CCl₄ twice a week (2ml/kg) diluted in olive oil, administering subcutaneously for 12 weeks. Then combined with 2-AAF daily diluted in polyethylene glycol, administered intragastrically. The experimental group saw an increase in ALT levels, there was no difference in albumin levels, changes in the color of the liver became brighter with rough and boiled surfaces and had a larger size compared to controls that had hearts with dark red, slippery surfaces without nodules. Histopathological examination was also performed by staining HE, masson trichome and immunohistochemistry (expression of caspase 3), the results showed liver damage (fat degeneration, necrosis, cell swelling, inflammation and fibrosis of the liver, and death of hepatocytes). In groups given human umbilical cord derived mesenchymal stem cells can repair liver damage marked by a tendency to decrease ALT levels, tendency to increase albumin levels, anatomic improvements in the form of dark red heart color with a slippery surface, histological changes, namely tissue repair, decreased degrees of fibrosis and decreased mortality cell.

"

"Hati merupakan organ yang memiliki kemampuan regenerasi tinggi setelah mengalami kerusakan. Sel punca mesenkimal asal tali pusat merupakan sumber progenitor hati yang dapat ditranplantasikan dan dapat digunakan pada kasus kerusakan hati yang parah. Kerusakan hati yang parah akan memunculkan sel oval sebagai pertahanan tingkat ke dua. Proses regenerasi hati yang diperantarai sel oval sangat kompleks karena melibatkan sitokin, faktor pertumbuhan, hormon dan morfogen. DLK1 (Delta-Like 1 homolog) merupakan salah satu morfogen yang diekspresikan kembali pada kasus kerusakan hati dengan kondisi proliferasi hepatosit yang dihambat. DLK1 diekspresikan oleh sel oval dalam jumlah yang terbatas. Penelitian ini bertujuan mengetahui ekspresi DLK1 dan proliferasi hepatosit yang dinilai menggunakan Ki67 pada kerusakan yang diinduksi 2AAF/CCl₄. Selain itu juga akan dinilai pengaruh sel punca pada ekspresi DLK1 dan proliferasi hepatosit yang dinilai menggunakan Ki67 pada saat proses regenerasi hati. Penelitian ini menggunakan 30 tikus jantan strain Wistar berusia 8 minggu yang dibagi menjadi 5 kelompok (n=6). Proses Induksi kerusakan hati menggunakan 2AAF/CCl₄ selama 12 minggu kemudian diberikan injeksi sel punca mesenkimal asal tali pusat manusia dengan dosis 1x10⁶ sel melalui vena ekor. Dua kelompok (kontrol dan induksi 2AAF/CCl₄) diterminasi pada akhir minggu ke-12 sebagai model kerusakan hati sedangkan tiga kelompok lainnya (kontrol, kelompok dengan sel punca dan kelompok tanpa sel punca diterminasi pada akhir minggu ke-14. Pada penelitian ini ditemukan bahwa terdapat perbedaan signifikan ekspresi DLK1 namun tidak terdapat perbedaan signifikan pada tingkat proliferasi hepatosit yang dinilai dengan Ki67 pada kerusakan hati yang diinduksi 2AAF/CCl₄. Sedangkan pada regenerasi hati tidak ditemukan perbedaan signifikan ekspresi DLK1 dan Ki67 antara kelompok yang diberikan sel punca dan tidak diberikan sel punca.

---

The liver is an organ that has a high regeneration ability after being injured. Mesenchymal stem cells from the human umbilical cord are transplanted sources of liver progenitors and can be used in cases of severe liver injury. Severe liver damage will bring out oval cells as a second level defense. The process of liver regeneration which is mediated by oval cells is very complex because it involves cytokines, growth factors, hormones and morphogens. DLK1 (Delta-Like 1 homologue) is one of the morphogens that is expressed again in cases of liver injury with inhibited hepatocyte proliferation. DLK1 is expressed in subpopulation in oval cells compartement of rat liver.

This study aims to determine the expression of DLK1 and hepatocyte proliferation which was assessed using Ki67 in the 2AAF/CCl₄ induced severe injury. It will also be assessed the effect of mesenchymal stem cells on DLK1 expression and hepatocyte proliferation which was assessed using Ki67 during the liver regeneration process. This study used 30 male 8-week-old Wistar strain rats divided into 5 groups (n = 6). The process of induction of liver injury using 2AAF/CCl₄ for 12 weeks was then given mesenchymal stem cell injection from human umbilical cord at a dose of 1x10⁶ cells through the tail vein. Two groups (control and 2AAF/CCl₄ groups) were terminated at the end of the 12th week as models of liver injury while the other three groups (control, groups with stem cells and groups without stem cells were terminated at the end of week 14.

In this study it was found that there was a significant difference in DLK1 expression but there was no significant difference in the rate of hepatocyte proliferation assessed by Ki67 in 2AAF/CCl₄ induced liver injury, whereas in liver regeneration there was no significant difference in DLK1 and Ki67 expression between groups given stem cells and not given stem cells. "

"Stres oksidatif telah diketahui menimbulkan efek yang merusak. Dalam fibrosis hati, stres oksidatif seolah-olah membentuk lingkaran setan yang menyebabkan perburukan fibrosis hati. Dalam hal ini, Nuclear Erythroid 2-Related Factor 2 (Nrf2) sebagai regulator antioksidan akan mengaktifkan sistem pertahanan antioksidan tubuh yang dapat memutus mata rantai fibrosis. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisa ekspresi Nrf2 pada jaringan hati, menganalisa kadar Malondialdehyde (MDA) sebagai oksidan bebas dan Glutathione (GSH) sebagai pemulung oksidan. Selain itu, juga menilai pengaruh pemberian Sel Punca Mesenkim asal Tali Pusat (SPM-TP) 1 juta dan 3 juta pada fibrosis hati. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan bahan biologis tersimpan berupa jaringan hati tikus Wistar 14 minggu. Terdapat empat kelompok perlakuan yaitu, kelompok sehat, kelompok 2AAF/CCl4, kelompok 2AAF/CCl4 yang diberikan SPM-TP 1 juta dan 3 juta dengan menggunakan tiga parameter yang diperiksa pada masing-masing kelompok yaitu, MDA, GSH, dan Nrf2. Pemeriksaan MDA dan GSH dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer, sedangkan pemeriksaan Nrf2 dinilai dengan menggunakan pulasan imunohistokimia dan kuantifikasi dengan ImageJ (IHC Profiller). Data terdistribusi normal yang diperoleh diuji dengan one way ANOVA  dan diuji post hoc Tukey sedangkan data tidak terdistribusi normal diuji dengan Kruskal Wallis dan post hoc Mann Whitney. Dari data-data tersebut didapatkan penurunan kadar MDA, peningkatan kadar GSH serta ekspresi Nrf2 pada kelompok yang diberikan SPM-TP 1 juta sedangkan pada kelompok yang diberikan SPM-TP 3 juta tidak menunjukkan hasil yang lebih baik.

---

Oxidative stress has been known to have deleterious effects. In liver fibrosis, oxidative stress seems to form a vicious circle that causes liver fibrosis to worsen. In this case, Nuclear Erythroid 2-Related Factor 2 (Nrf2) as an antioxidant regulator will activate the body's antioxidant defense system which can break the chain of fibrosis. This study aims to analyze the expression of Nrf2 in liver tissue, also the levels of Malondialdehyde (MDA) as a free oxidant and Glutathione (GSH) as an oxidant scavenger. In addition, it also assessed the effect of giving  Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells (UCMSCs) 1 million and 3 million on liver fibrosis. This study was an experimental study using stored biological material in the form of 14-week-old Wistar rat liver tissue. There were four treatment groups, namely the healthy group, the 2AAF/CCl4 group, the 2AAF/CCl4 group who were given UCMSCs 1 million and 3 million using three parameters examined in each group, namely MDA, GSH, and Nrf2. MDA and GSH examinations were carried out using a spectrophotometer, while the Nrf2 examination was assessed using immunohistochemical staining and quantification with ImageJ (IHC Profiler). Normally distributed data obtained was tested with one way ANOVA and Tukey's post hoc test while data that is not normally distributed was tested with Kruskal Wallis and post hoc Mann Whitney.  From these data it was found a decrease in MDA levels, an increase in GSH levels as well as Nrf2 expression in the group given UCMSCs 1 million while the group given UCMSCs 3 million showed no better results."

"Latar Belakang: Vesikel ekstrasel (VE) dari sel punca mesenkimal (MSCs) telah banyak dipelajari dan memberikan hasil yang baik terhadap fibrosis dan regenerasi hati. Prekondisi MSCs dengan sitokin spesifik dapat meningkatkan aktivitas terapeutik dari VE. TNF-a dan TGF-b telah terbukti menghambat respon inflamasi dan memicu perbaikan jaringan bila digunakan untuk prekondisi MSCs pada penelitian bidang urologi dan ortopedi. Penelitian ini menggunakan VE dari sel punca mesenkimal tali pusat manusia (hUC-MSC) yang diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier yang mengandung TNF-a dan TGF-b sebagai terapi atresia bilier pada model tikus. Metode: Vesikel ekstrasel dari hUC-MSCs dikultur dalam medium komplit dan diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier. Dilakukan ekstraksi VE dengan sentrifugasi serial pada conditioned medium (CM) hUC-MSC tersebut. Sebelas tikus Sprague Dawley menjalani ligasi duktus koledokus (CBD), lima tikus sebagai kontrol dan enam tikus sebagai penerima perlakuan. Kelompok perlakuan mendapatkan injeksi EV intravena ekor yang dimulai 3 minggu pascaligasi CBD, sebanyak tujuh dosis 150 uL selama tujuh hari berturut-turut. Satu ekor tikus kontrol diterminasi 3 minggu pascaligasi CBD untuk melihat skor fibrosis sebelum diberikan perlakuan. Tikus-tikus kelompok kontrol dan perlakuan diterminasi pada 1 hari dan 2 minggu setelah injeksi VE terakhir. Dilakukan penilaian skor Laennec jaringan hati serta kadar hepatocyte growth factor (HGF), aspartate transaminase (AST), dan alanine transaminase (ALT) darah. Hasil: Pemeriksaan histopatologi jaringan hati 3 minggu pascaligasi CBD menunjukkan skor fibrosis 2. Skor fibrosis kelompok kontrol dan perlakuan 1 hari dan 2 minggu pascainjeksi VE seluruhnya mendapatkan nilai 2. Kadar HGF pada kelompok perlakuan lebih rendah secara signifikan dibandingkan dengan kelompok kontrol 1 hari pascainjeksi VE (1,04+0,11 vs 1,53+0,06; p<0,001), namun lebih tinggi pada 2 minggu pascainjeksi VE meskipun tidak bermakna secara statistik (1,18 (1,18-1,18) vs 0,83 (0,73-0,84); p=0,064). Kadar AST 1 hari pascainjeksi VE kelompok kontrol 1,66+0,05 dan kelompok perlakuan 1,29+0,15 dengan nilai p 0,001. Dua minggu pascainjeksi VE, perbedaan kadar AST pada kedua kelompok menurun (1,12(1,11-1,22) vs 0,74(0,70-0,78); p=0,064). Kadar ALT pada kelompok perlakuan lebih rendah secara signifikan pada 1 hari dan 2 minggu pascainjeksi VE dengan nilai p <0,001 dan 0,025. Kesimpulan: Vesikel ekstrasel dari hUC-MSC yang diprekondisikan dengan serum pasien atresia bilier tidak menurunkan skor fibrosis, namun dapat meningkatkan kadar HGF dan menurunkan penanda cedera hati.

---

Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs)-derived extracellular vesicles (EVs) have long been studied and yield a satisfactory result in liver fibrosis and regeneration. Preconditioning of MSCs by specific cytokines can enhance the therapeutic activities of EVs. TNF-a and TGF-b were cytokines that has the potency to inhibit inflammatory responses and promote tissue repair when used as pre-conditioning agent of MSCs in nonliver studies. This study used serum of biliary atresia patients that contain TNF-a and TGF-b as pre-conditioning agent of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs)- derived EVs for the treatment of biliary atresia rat model. Methods: hUC-MSCs were cultured in complete medium and pre-conditioned with serum of human biliary atresia patient. The conditioned medium (CM) from preconditioned hUC-MSCs underwent serial centrifugation to extract EVs. Eleven 5 weeks old Sprague Dawley rats underwent bile duct ligation (BDL). Five rats among the BDL group act as control while six rats were given EVs injection 3 weeks after BDL procedure, seven doses in seven consecutive days, 150 uL each dose. One rat were sacrificed 3 weeks post BDL for fibrosis staging prior to treatment. Rats from control and EVs group were sacrificed at 1 day and 2 weeks after the last EVs injection. Liver tissue were assessed for fibrosis score and blood were analysed for hepatocyte growth factor (HGF), aspartate transaminase (AST), and alanine transaminase (ALT). Results: Liver histopathology 3 weeks post BDL showed Laennec score 2. Fibrosis score of control and EVs group 1 day and 2 weeks after the last EVs injection were all 2. Hepatocyte growth factor level on EVs group were significantly lower than control group on 1 day post EVs injection (1,04+0,11 vs 1,53+0,06; p<0,001), but higher on EVs group on 2 weeks post EVs injection although not statistically significant (1,18 (1,18-1,18) vs 0,83 (0,73-0,84); p=0,064). The level of AST were 1,66+0,05 in control group and 1,29+0,15 in EVs group 1 day after EVs injection, with p value 0,001. Two weeks post EVs injection, the AST levels decreased furthermore (1,12(1,11-1,22) vs 0,74(0,70-0,78); p=0,064). Alanine transaminase level were significantly lower on EVs group both 1 day and 2 weeks post EVs injection, with p value <0,001 and 0,025. Conclusion: Extracellular vesicles from hUC-MSCs pre-conditioned with serum of biliary atresia patients could not lessen fibrosis score, but can increase HGF level and decrease markers of liver injury."

"Fibrosis hati merupakan penyakit dengan tingkat morbiditas dan mortalitas yang tinggi. Terapi yang efektif dalam mengatasi fibrosis hanyalah transplantasi hati, tetapi mahal dan sulit didapatkan sehingga diperlukan alternatif lain. Umbilical cord mesenchymal stem cell (UC-MSC) mampu mendegradasi matriks ekstraselular sehingga potensial mengatasi fibrosis. Tujuan penelitian adalah mengetahui pengaruh UC-MSC terhadap fibrosis pada hati kelinci (Oryctolagus cuniculus). Jumlah sampel yang digunakan sebanyak 16 hati yang terdiri dari 2 kelompok normal, 7 kelompok fibrosis model ligasi duktus bilier (LDB), dan 7 kelompok fibrosis yang diinjeksi UC-MSC secara intrahepatika (LDB + UC-MSC). Penelitian dilakukan dengan analisis histologi dan ekspresi gen Matrix Metalloproteinase-2 (­MMP-2). Sediaan histologi diwarnai dengan pewarnaan Hematoksilin-Eosin untuk analisis sistem penilaian Laennec dan Masson Trichrome untuk analisis area fraksi kolagen. Analisis ekspresi gen MMP-2 dilakukan dengan metode qRT-PCR. Hasil analisis histologi berdasarkan sistem penilaian Laennec antara kelompok LDB dan LDB + UC-MSC tidak terdapat perbedaan, sedangkan persentase area kolagen menunjukkan perbedaan yang signifikan (p < 0,0001). Hasil analisis ekspresi gen MMP-2 pada kedua kelompok menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan (p = 0,2593). Dapat disimpulkan bahwa UC-MSC dapat mengurangi area fraksi kolagen dengan kecenderungan peningkatan ekspresi gen MMP-2 walaupun belum terdapat perubahan secara morfologi.

---

Liver fibrosis is a disease with high morbidity and mortality. The effective therapy is liver transplantation, but it is expensive and difficult, so needs alternative. Umbilical cord mesenchymal stem cell (UC-MSC) can degrade extracellular matrix which is potential to decrease fibrosis. The study aims to know the effect of UC-MSC on liver fibrosis in rabbits (Oryctolagus cuniculus). The sample is 16 livers consisting of 2 normal groups, 7 groups of biliary duct ligation fibrosis models (LDB), and 7 groups of fibrosis injected intrahepatic UC-MSC (LDB + UC-MSC). The study uses histological and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) gene expression analysis. Histological slides were stained by Hematoxylin-Eosin for Laennec scoring system and Masson Trichrome for analyze collagen fractions area. Analysis of MMP-2 gene expression was assessed using qRT-PCR. The results of histological analysis based on the Laennec scoring system showed no difference between the LDB and LDB + UC-MSC groups, while the percentage of collagen area showed a significant difference (p <0.0001). The results of the MMP-2 gene expression in the two groups showed no significant difference (p = 0.2593). The conclusion is UC-MSC can reduce the collagen fraction area with a tendency to increase MMP-2 gene expression although no change in morphology."

"Latar belakang: Sel punca mesenkim (SPM) telah menjadi salah satu alternatif untuk menghambat proses fibrosis dan memperbaiki fungsi hati. Berbagai jalur dapat digunakan untuk pemberian SPM, namun belum banyak studi yang membandingkan jalur pemberian. Pada studi ini dibandingkan pemberian SPM intrahepatika dan intrasplenika terhadap fungsi hati dan derajat fibrosis hati Oryctolagus cuniculus ligasi duktus bilier.Metode penelitian: Penelitian ekperimental dengan menggunakan model hewan kelinci (Oryctolagus cuniculus) yang dilakukan ligasi duktus bilier (LDB). Kelinci dibagi ke dalam 4 kelompok, yaitu kelompok sham surgery, LDB, injeksi SPM intrahepatika(LDB + SPM IH) dan injeksi SPM intrasplenika (LDB + SPM IS). Injeksi SPM tali pusat dilakukan pada hari kelima LBD, kemudian kelinci diobservasi sebelum diterminasi seluruhnya pada hari ke-14. Dinilai fungsi hati yang dinilai dengan kadar serum AST, ALT, bilirubin total dan direk, serta derajat fibrosis hati yang dinilai dengan skor Laennec.  Hasil penelitian: Dari total 23 kelinci, dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu kelompok sham 2 ekor dan masing-masing 7 ekor untuk kelompok LDB, LDB + SPM IH, dan IS. Didapatkan mortalitas sebesar 57,1% pada kelompok LDB, mortalitas 14,3% pada kelompok LDB + SPM IH dan mortalitas 28,6 pada kelompok LDB + SPM IS sebelum penelitian selesai. Tidak didapatkan perbedaan yang bermakna untuk fungsi hati seperti AST, ALT, bilirubin total, dan direk antarkelompok, namun terkesan median fungsi hati pada kelompok LDB lebih tinggi dibanding sham surgery, serta median kelompok LDB + SPM IH dan IS lebih menyerupai normal. Fungsi hati tampak lebih baik pada kelompok LDB + SPM IS dibanding LDB + SPM IH, meskipun secara statistik tidak bermakna. Pemeriksaan histopatologi kelinci yang dilakukan ligasi duktus bilier menunjukkan derajat fibrosis Laennec 4B, yang tidak berbeda antar ketiga kelompok. Area fraction fibrosis, jumlah hepatosit yang viabel dan nekrosis, serta jumlah sel progenitor dianalisis, tidak terdapat perbedaan yang ditemukan antara kelompok LDB + SPM IH dan LDB + SPM IS, namun kelompok yang diberikan SPM memiliki jumlah hepatosit viabel yang lebih banyak dibandingkan kelompok LDB.Kesimpulan: Pemberian SPM intrahepatika dan intrasplenika tidak berpengaruh pada fungsi hati dan derajat fibrosis hati Oryctolagus cuniculus pascaligasi duktus bilier. Pemberian SPM akan meningkatkan jumlah hepatosit yang viabel pada model cuniculus pascaligasi duktus bilier.

---

Background: Mesenchymal stem cell (MSC) becomes an alternative to attenuate liver fibrosis and to improve liver function. A couple of administration route had been studied, but few compared one to another. This study aims to compare intrahepatic and intrasplenic route of administration of MSC in regards of liver function and degree of liver fibrosis in Oryctolagus cuniculus bile duct ligation model.

Method: This is an experimental study using rabbit (Oryctolagus cuniculus) bile duct ligation model. The subjects were randomized into 4 groups: sham surgery, bile duct ligation (BDL), intrahepatic route of MSC (BDL + MSC IH), and intrasplenic route of MSC (BDL + MSC IS). Umbilical cord MSC was administered in the fifth day of bile duct ligation, and the subject was observed until terminated on 14th day post BDL. The liver function, such as AST, ALT, total and direct bilirubin were evaluated, and the degree of fibrosis was evaluated with Laennec score. 

Result: The subjects were grouped into 4 group: 2 sham surgery, and each had 7 in BDL, BDL + MSC IH and BDL + MSC IH groups. Mortality rate in control group was 57,1%, mortality in BDL + MSC IH group was 14,3% and in BDL + MSC IS group was 28,6%. No significant difference was found regarding liver function in each group such as AST, ALT, total and direct bilirubin, but the median of liver function in BDL group seemed worse than in sham sugery group, and the median of liver function in BDL + MSC IH and BDL + MSC IS groups were closed to sham operated (normal). Liver function seemed to be better in BDL + MSC IS group compared to BDL + MSC IH group, but showed no statistical difference. Histopathology examination in subjects undergone bile duct ligation (regardless of MSC) show the degree of fibrosis of Laennec 4B. Fibrosis area fraction, the number of viable and necrosis hepatocyte, and progenitor cell are analysed; no significant difference was found between BDL + MSC IH and BDL + MSC IS group, but the group administered with MSC shows larger number of viable hepatocyte compared to BDL group.

Conclusion: Administration of intrahepatic or intrasplenic MSC did not show significant improvement the liver function and liver fibrosis in Oryctolagus cuniculus bile duct ligation model. Administration of MSC would increase the number of viabel hepatocyte in Oryctolagus cuniculus bile duct ligation model."

"mengalami kerusakan dan sirosis hati. Walaupun tidak ada data terbaru mengenai insiden kerusakan hati di Indonesia, Riskesdas 2013 menyampaikan adanya prevalensi yang tinggi dari persentase HBsAg, anti-HBs, dan anti-HBc. Selain itu, dalam kurun waktu 30 tahun (1980—2010), terdapat peningkatan tingkat kematian sirosis hati sebanyak 25,1%. Model hewan yang sesuai sangatlah penting dalam meneliti kerusakan hati. Karbon tetraklorida (CCl4) sudah lama digunakan untuk menginduksi fibrosis hati pada model tikus. Walaupun dapat menginduksi pengendapan jaringan ikat, regenerasi hepatoseluler, proliferase sel stelata, dan infiltrasi sel-sel inflamasi, kerusakan pada model tikus yang diinduksi CCl4 hanya merepresentasikan kerusakan hati sampai batas tertentu, mirip dengan kerusakan hati akibat obat. Dengan tujuan meniru kerusakan hati yang lebih parah, penelitian ini mengkombinasikan penggunaan CCl4 dengan asetilaminofluorena-2 (2AAF) karena 2AAF terbukti dapat menekan proliferasi hepatosit sehingga terjadi proliferasi sel oval yang berakibat pada proliferasi duktular. Metode: Desain penelitian ini adalah penelitian observasional terhadap penelitian analitik eksperimental dengan bahan biologis tersimpan yang diambil dari Departemen Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Penelitian ini menggunakan data primer eksperimental dengan 15 sampel yang dikategorikan dalam 3 kelompok: kontrol sehat, diinduksi CCl4, dan diinduksi 2AAF/CCl4, dan dianalis di bawah mikroskop dalam hal tingkat fibrosis, daerah cakupan fibrosis, dan jumlah proliferasi duktus. Analisis statistik yang digunakan meliputi uji Fisher, Shapiro-Wilk, Kruskal Wallis, dan Mann Whitney menggunakan program SPSS. Hasil: Kelompok 2AAF/CCl4 dan CCl4 memiliki perbedaan derajat fibrosis yang signifikan dengan kontrol sehat (p=0,024 dan p=0,048 secara berurutan), tanpa perbedaan signifikan di antara kedua kelompok tersebut (p=0,286). Perbedaan cakupan area fibrosis antara kedua kelompok juga tidak signifikan (p=0,055), walau kelompok 2AAF/CCl4 dan CCl4 berbeda signifikan dengan kontrol sehat (p=0,007 dan p=0,008 secara berurutan). Dalam hal proliferasi duktular, kelompok CCl4 tidak menunjukkan perbedaan signifikan dengan kontrol sehat (p=0,101), namun berbeda signifikan dengan kelompok 2AAF/CCl4 (p=0,000). Kesimpulan: Tidak terdapat perbedaan derajat dan cakupan area fibrosis yang signifikan antara kelompok 2AAF/CCl4 dan CCl4. Namun demikian, terjadi proliferasi duktular yang secara signifikan lebih tinggi pada kelompok 2AAF/CCl4 dibandingkan kelompok CCl4 saja.

---

Background: In 2017, approximately 1.8% of adult in United States suffer from chronic liver disease and cirrhosis. Although there is not any recent data, Riskesdas 2013 showed a high percentage of HBsAg, anti-HBs, and anti-HBc prevalence in Indonesia. On top of that, in Indonesia, in the course of 30 years (1980—2010), liver cirrhosis mortality rate increased by 25,1%. In order to study liver disease, having an appropriate animal model is crucial. Carbon tetrachloride (CCl4) has been used to induce liver fibrosis in mouse model. Although able to induce connective tissue deposition, hepatocellular regeneration, stellate cells proliferation, and inflammatory infiltration, CCl4-induced rat models only represent liver injury to some extent, similar to drug-induced liver injury. In order to mimic a more severe liver injury, this study combined the use of CCl4 with 2- acetylaminofluorene (2AAF), as 2AAF has proven to be able to suppress hepatocyte proliferation and allow oval cells proliferation that leads to ductular proliferation. Method: This research design is an observational research on an analytic experimental study with stored biological material taken from the Department of Anatomy Faculty of Medicine University of Indonesia. This research uses experimental primary data, with 15 samples categorized into three groups: healthy control, CCl4-induced, and 2AAF/CCl4- induced, and analysed for the degree of fibrosis, fibrosis-affected area, and number of proliferating ductules under the microscope. A statistical analysis is then conducted using Shapiro-Wilk, Kruskal Wallis, and Mann Whitney by using SPSS programme. Result: There is a significant difference in the degree of fibrosis between both 2AAF/CCl4 and CCl4 groups with the healthy control (p=0,024 dan p=0,048 respectively), without any significant difference in between the two groups (p=0,286). The affected fibrosis area difference between the two groups is also insignificant (p=0,055), though the 2AAF/ CCl4 and CCl4 groups are significantly different to the healthy control (p=0,007 and p=0,008 respectively). For ductular proliferation, CCl4 group did not show any significant difference compared to the healthy group (p=0,101), but was significantly different to the 2AAF/CCl4 group (p=0,000). Conclusion: There is not any significant difference regarding the degree of fibrosis and its affected area between the 2AAF/CCl4 and CCl4 groups. However, there is a significant difference between the two groups in terms of ductular proliferation, in which the 2AAF/CCl4 group’s ductular proliferation was higher."