Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
Latar belakang: Saat ini prevalens alergi semakin meningkat. Terapi alergi lebih terfokus untuk mengatasi gejala simptomatik. Pendekatan lain adalah terapi imunomodulasi dengan agonis toll like receptor (TLR) 9 yang dapat mengalihkan respon imun sel TCD4+ Th2 ke arah Th1. CpG ODN 2006x3_PD adalah oligonukleotida sintetik kelas B merupakan agonis TLR9 yang berpotensi aman karena mengandung fosfodiester. Pada penelitian ini CpG ODN 2006x3_PD diuji kemampuan untuk mengatasi alergi dengan menggunakan penghantar nanopartikel kitosan, melalui uji in vitro pada sel mononukleus darah tepi dan in vivo pada hewan coba mencit alergi. Metode: Preparasi nanopartikel kitosan dilakukan dengan metode gelasi ion, melalui reaksi ikat silang kitosan dan tripolifosfat. Nanopartikel dikarakterisasi dengan Dynamic light scattering (DLS), zeta sizer dan transmission electron microscope (TEM). Uji pengikatan dilakukan dengan elektroforesis pada gel agarosa 12%, uji toksisitas dan kemampuan aktivasi NF-κB dilakukan pada sel RAW Blue, dengan menggunakan cel counting kit 8 dan kit Quanti blue. Sel mononukleus darah tepi yang distimulasi selama 7 hari pada uji in vitro dan plasma hewan coba mencit Balb/c pada uji in vivo diukur konsentrasi IFNγ, IL-10, IL-13 dan IgE dengan metode ELISA. Hasil: Diperoleh nanopartikel dengan ukuran <300 nm, muatan permukaan positif, bentuk sferis, tidak toksik dan dapat mengaktivasi NF-κB. Uji in vitro pada sel mononukleus darah tepi menunjukkan CpG ODN 2006x3_PD yang dihantarkan nanopartikel kitosan dapat menstimulasi sitokin tipe Th1 IFNγ dan T reg IL-10, menurunkan sitokin tipe Th2 IL-13 namun belum dapat menurunkan secara bermakna produksi IgE total pada sel mononukleus darah tepi individu sehat dan alergi Aplikasi intra nasal 10 ug/kali, 3 kali seminggu selama 3 minggu CpG ODN 2006x3_PD dan CpG ODN 2006x3_PD yang dihantarkan nanopartikel kitosan pada mencit Balb/c yang diinduksi alergi dengan ovalbumin dapat menstimulasi sitokin tipe Th1 IFNγ dan Treg IL-10, namun belum dapat menurunkan secara bermakna sitokin tipe Th2 IL-13 pada plasma mencit. Aplikasi CpG ODN 2006x3_PD dapat menurunkan produksi IgE spesifik anti ovalbumin pada plasma mencit meskipun belum dapat menurunkan produksi IgE total. Simpulan: CpG ODN 2006x_PD dapat menjadi kandidat imunostimulator yang potensial pada alergi.

---

Background: Currently, prevalence of allergy has increased in worldwide. Allergy treatment is mainly focused to reduce clinical symptoms. Another approach is immunomodulation therapy which utilizes toll like receptor (TLR) 9 agonist that may redirect pro-allergenic Th2 biased CD4+ T cell response toward Th1. CpG ODN 2006x3_PD which is classified as synthetic oligonucleotides B has potential as a safe TLR9 agonist due to its natural backbone. In this study, CpG ODN 2006x3_PD was examined about its ability in overcoming allergies by using chitosan nanoparticles delivery, through in vitro tests on peripheral blood mononuclear cells and in vivo through allergic mice animal model. Methods: Chitosan nanoparticles was prepared by ionic gelation method, through crosslinking reaction of chitosan and tripolyphosphate. Nanoparticles are characterized by Dynamic light scattering (DLS), zeta sizer and transmission electron microscope (TEM). The binding test was carried out with electrophoresis on 12% agarose gel, toxicity test and NF-κB activation ability performed on RAW Blue cells, using cel counting kit 8 and Quanti blue kit. IFNγ, IL-10, IL-13 and IgE level of in vitro tests of peripheral blood mononuclear cells after 7 days stimulation and Balb/c mice plasma of in vivo study were measured by ELISA method. Results: Less than 300 nm, positive surface charge, spherical shape and nontoxic chitosan nanoparticles were obtained. These nanoparticles could deliver CpG ODN to activate NF-κB of mouse RAW-Blue cells effectively. In vitro assays of peripheral blood mononuclear cells showed that CpG ODN 2006x3_PD delivered by chitosan nanoparticles may stimulate Th1 IFNγ and T reg type cytokines IL-10, also decrease the Th2-type cytokine IL-13 but it couldn't inhibit total IgE production in peripheral blood mononuclear cells significantly. Intranasal application of 10 ug, 3 times per week for 3 weeks of CpG ODN 2006x3_PD and CpG ODN 2006x3_PD which were delivered by chitosan nanoparticles in allergen induced Balb/c mice could stimulate Th1 IFNγ and Treg type cytokines IL-10, but it couldn't significantly reduce the Th2-type cytokine IL-13 in mice plasma . The CpG ODN application decreased the specific IgE production of anti ovalbumin in mice plasma although it couldn't significantly reduce total IgE production. Conclusions: CpG ODN 2006x_PD could be a potential candidate for allergic immunostimulator.

Abstrak :
Daun Mahkota dewa diketahui mempunyai efek antiinflamasi. Penelitian ini dilakukan untuk menguji apakah ekstrak daun Mahkota Dewa yang dikemas dalam bentuk kitosan nanopartikel, dapat memberikan efek antiinflamasi lebih baik pada organ kolon mencit kolitis ulseratif KU akibat induksi dextran sodium sulfat DSS , dibandingkan dengan ekstrak etanol saja. Pada penelitian dianalisa efek ekstrak daun Mahkota Dewa yang dikemas dalam bentuk kitosan nanopartikel dalam menghambat inflamasidengan melihat ekspresi cox-2 dan iNos. Efek antiinflamasi diuji menggunakan mencit sebanyak 36 ekor yang dibagi dalam 6 kelompok perlakuan yaitu kelompok normal, kontrol negatif, ekstrak daun dosis 12.5 dan 25 mg/kgBB, ekstrak daun kitosan nanopartikel dosis 6.25 dan 12,5 mg/kgBB. Induksi DSS 1 b/v diberikan melalui air minum selama 6 minggu perlakuan secara berselang-seling. Pada akhir percobaan kolon mencit difiksasi dalam larutan buffer formalin 10 kemudian dilakukan pemeriksaan imunohistokimia untuk mengetahui ekspresi protein inflamasi berupa COX-2 dan iNOS.Ekstrak daun Mahkota Dewa dosis 25 dan 12,5 mg/kg BB dan ekstrak daun Mahkota Dewa dalam Kitosan Nano Partikel dosis 12,5 dan 6,25 mg/kg BB mampu menurunkan inflamasi signifikan dibandingkan dibandingkan dengan kelompok DSS. Terlihat dari skor hasil pewarnaan imunohistokimia protein COX-2 dan iNOS dianalisis menggunakan uji statistik didapat nilai. p<0,05 untuk semua kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif (hanya men dapat DSS). Ekstrak daun Mahkota Dewa (dosis 25 dan 12,5 mg/kg BB) dan ekstrak daun Mahkota Dewa dalam Kitosan Nano Partikel (dosis 12,5 dan 6,25 mg/kg BB) mampu menghambat proses inflamasi kolon mencit yang diinduksi DSS, ditunjukkan oleh penekanan ekspresi protein inflamasi COX- 2 dan iNOS. ......Mahkota Dewa is known to have anti inflammatory effect. This study was conducted to test whether the extract of Mahkota Dewa leaf packaged in the form of chitosan nanoparticles, can provide better antiinflammatory effect on colon of ulcerative colitis UC due to induction of dextran sodium sulfate DSS , compared with ethanol extract alone. The study analyzed the effect of Mahkota Dewa leaf extract packed in the form of chitosan nanoparticles in inhibiting inflammatory by evaluating the expression of COX 2 and iNOS. Anti inflammatory effect was tested using 36 mice divided into 6 groups, normal group, negative control, leaf extract dose 12.5 and 25 mg kgBB, leaf extract chitosan nanoparticle dose 6.25 and 12.5 mg kgBB. DSS induction of 2 w v is administered through drinking water for 6 weeks of intermittent treatment. At the end of the experiment the mice colon was processed in 10 formalin buffer solution then immunohistochemical examination was performed to determine the expression of inflammatory proteins COX 2 and iNOS . Mahkota Dewa leaf extract dose 25 and 12,5 mg kg BW and Dewa Mahkota Dewa leaf extract in Chitosan Nano Particle dose 12,5 and 6,25 mg kg BW can decrease inflammation significantly compared to DSS group. The immunohistochemical staining results of COX 2 and iNOS proteins were analyzed using statistical tests obtained p <0.05 for all treatment groups compared with the negative control group (DSS only). Extract of Mahkota Dewa leaf (dose 25 and 12,5 mg / kg BW) and leaf extract of Mahkota Dewa in Chitosan Nano particle (dose 12,5 and 6,25 mg / kg BW) able to inhibit inflammatory process on DSS induced mice, by suppressing the expression of COX-2 and iNOS inflammatory proteins.

Abstrak :
Pendahuluan: Inflammatory bowel disease (IBD) merupakan penyakit inflamasi kronik berulang pada usus. Prevelansi IBD di dunia dalam dua dekade terakhir mengalami peningkatan. Penelitian sebelumnya menunjukkan ekstrak daun Mahkota Dewa dapat mengurangi inflamasi. Di sisi lain, nanopartikel kitosan dapat mengantarkan senyawa aktif lebih tertarget ke jaringan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengamati efek pemberian ektstrak daun Mahkota Dewa dalam nanopartikel kitosan terhadap gambaran histopatologi usus halus mencit yang diinduksi dextran sodium sulfat (DSS). Metode: Penelitian ini menggunakan 36 mencit Swiss Webster yang diinduksi DSS 2% selama 1 minggu, diikuti air minum tanpa DSS selama seminggu, diulang hingga 3 siklus. Gambaran histopatologi yang digunakan adalah jumlah sel goblet dan fokus inflamasi usus halus, dinilai pada 6 kelompok perlakuan: normal (N), kontrol negatif (NC), DSS + ekstrak daun Mahkota Dewa dosis 25 mg (MD25), DSS + ekstrak daun Mahkota Dewa dosis 12,5 mg (MD12,5), DSS + ekstrak daun Mahkota Dewa dalam nanopartikel kitosan dosis 12,5 mg (NPMD12,5), dan DSS + ekstrak daun Mahkota Dewa dosis 6,25 mg (NPMD6,25). Pemeriksaan histopatologi menggunakan pewarnaan Hematoxylin-Eosin (HE). Hasil: Tidak ditemukan perbedaan signifikan antar kelompok pada sel goblet (p=0,318) dan fokus inflamasi (p=0,496) di usus halus. Terdapat kecenderungan perbaikan sel goblet pada pemberian ekstrak daun Mahkota Dewa tanpa maupun dengan nanopartikel kitosan dibanding kontrol negatif. Diskusi: Ekstrak daun Mahkota Dewa mengandung kaempferol, quercetin, dan phalerin yang dapat mengurangi inflamasi di usus halus. Nanopartikel kitosan membuat senyawa aktif tertarget karena sifatnya yang mukoadhesif. Hasil yang tidak signifikan secara statistik disebabkan beberapa limitasi misalnya durasi pemberian dan dosis DSS kurang adekuat. ......Introduction: Inflammatory bowel disease (IBD) is a recurrent chronic inflammatory disease of the intestine. The prevalence of IBD in the world in the last two decades has increased. Previous studies have shown that Mahkota Dewa leaf extract can reduce inflammation. On the other hand, chitosan nanoparticles can deliver more targeted active compounds to the tissues. The purpose of this study was to observe the effect of Mahkota Dewa leaf extract extract in chitosan nanoparticles on the histopathological picture of mouse small intestine induced by dextran sodium sulfate (DSS). Method: This study used 36 Swiss Webster mice induced by DSS 2% for 1 week, followed by drinking water without DSS for a week, repeated for up to 3 cycles. The histopathological features used were the number of goblet cells and the focus of inflammatory small intestine, assessed in 6 treatment groups: normal (N), negative control (NC), DSS + Mahkota Dewa leaf extract at a dose of 25 mg (MD25), DSS + Mahkota Dewa leaf extract a dose of 12.5 mg (MD12.5), DSS + Mahkota Dewa leaf extract in chitosan nanoparticles a dose of 12.5 mg (NPMD12.5), and DSS + Mahkota Dewa leaf extract a dose of 6.25 mg (NPMD6.25). Histopathological examination using Hematoxylin-Eosin (HE) staining. Results: There were no significant differences between groups in goblet cells (p = 0.318) and inflammatory focus (p = 0.496) in the small intestine. There is a tendency for the improvement of goblet cells in the administration of Mahkota Dewa leaf extract without or with chitosan nanoparticles compared to negative controls. Discussion: Mahkota Dewa leaf extract contains kaempferol, quercetin, and phalerin which can reduce inflammation in the small intestine. Chitosan nanoparticles make targeted active compounds because of its mucoadhesive properties. The results were not statistically significant due to some limitations such as the duration of administration and the inadequate dose of DSS.