Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Latar BelakangKarsinoma Hepatoseluler (KSH) merupakan kanker yang umum terjadi dengan angka kejadian tinggi. Sel Natural Killer (NK) memiliki kemampuan sitotoksisitas terhadap sel kanker, namun efektivitasnya dapat dipengaruhi oleh eksosom. Eksosom dari serum sehat diduga mampu meningkatkan aktivitas sitotoksisitas sel NK. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis sitotoksisitas sel HepG2 oleh sel NK yang diinduksi eksosom serum sehat.MetodePenelitian ini merupakan studi in vitro menggunakan flow cytometry untuk menganalisis persentase sitotoksisitas HepG2 oleh sel NK yang diinduksi eksosom serum sehat. Tiga kelompok perlakuan diuji, yaitu NK tanpa induksi, NK diinduksi eksosom, dan NK diinduksi IL-2. Setiap kelompok perlakuan memiliki 1 kelompok data yang terdiri dari 8 well (n = 24). Analisis data menggunakan GraphPad Prism, menggunakan uji Normalitas dan homogenitas, uji One-Way Anova, dan uji t-test untuk melihat signifikansi setiap kelompok uji.HasilHasil persentase rata-rata sitotoksisitas HepG2 oleh sel NK yang diinduksi eksosom serum sehat adalah 14,6% ± 1,1%. Persentase sitotoksisitas kelompok kontrol induksi adalah 14% ± 1,7%. Tidak terdapat peningkatan persentase sitotoksisitas HepG2 oleh sel NK yang diinduksi eksosom serum sehat. Perbandingan rerata sitotoksisitas HepG2 antar kedua kelompok tidak signifikan secara statistik (P > 0,05)KesimpulanTidak terdapat peningkatan signifikan dalam sitotoksisitas sel NK terhadap sel HepG2 yang diinduksi oleh eksosom serum sehat dibandingkan dengan kontrol tanpa induksi.

---

Introduction

Hepatocellular Carcinoma (HCC) is a commonly cancer with a high incidence rate. Natural killer cells have the ability to kill cancer cells, but their affectiveness may be affected by exosome. Exosomes from healthy serum have the potential to increase the cytotoxicity of NK cells. This study aims to analyze the cytotoxic effect of HepG2 cells by Natural Killer (NK) induced by healthy serum.

Method

This study is an in vitro investigation utilizing flow cytometry to analyze the percentage of cytotoxicity of HepG2 cells by Natural Killer (NK) cells induced by healthy serum exosomes. Three experimental groups were evaluated: NK cells without induction, NK cells induced by exosomes, and NK cells induced by IL-2. Each experimental group consisted of one dataset comprising 8 wells (n = 24). Data analysis was performed using GraphPad Prism, which included normatily and homogeneity tests, One-Way ANOVA, and t-tests to assess the significance of differences among the experimental groups. Results

The average percentage of cytotoxicity of HepG2 cells by NK cell induced by healthy serum exosome was 14,6% ± 1,1%. The percentage of cytotoxicity in the control group was 14% ± 1,7%. There was no increase in percentage of cytotoxicity HepG2 cells by NK cell induced by healthy serum exosome. Comparisone between mean of the two groups was not statistically significant (P > 0,05)

Conclusion

There was no significant increase in the cytotoxicity of NK cells agains HepG2 cells induced by healthy serum exosome compared to the non-induced control group."

"Sel Natural Killer (NK) adalah sel pelepas granul sitotoksik yang melisis patogen intracytoplasmic (yaitu infeksi virus atau bakteri) dan sel tumor/kanker sebagai bagian dari imunitas bawaan. Sel NK berasal dari diferensiasi sel punca hematopoietik (SPH) di jalur Common Lymphoid Progenitor (CLP). SPH diperoleh dari darah tali pusat, dengan jumlah SPH yang lebih tinggi daripada sumsum tulang. Berbagai protokol diferensiasi telah dilaporkan dengan jumlah sel NK dan fenotipe yang berbeda. Studi perbandingan efektivitas diferensiasi sel NK dengan sampel SPH yang dikultur dan SPH yang baru diisolasi masih minim. Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan tahapan maturasi diferensiasi sel NK yang dihasilkan antara sampel SPH yang dikultur dan baru diisolasi menggunakan modifikasi protokol Dezell dkk. dengan menggunakan interleukin-2 (IL-2) tanpa keberadaan feeder cell. Kultur SPH dilakukan selama dua minggu sebelum diferensiasi untuk sampel SPH yang dikultur. Hasil kultur diferensiasi selama lima minggu dianalisis menggunakan flow cytometry untuk mengetahui keberadaan reseptor NKp46, pengamatan Giemsa untuk mengetahui tahapan maturasi sel NK, dan qRT-PCR untuk mengetahui ekspresi gen perforin dan granzyme B. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sampel SPH yang dikultur menghasilkan jumlah sel NK di tahap dewasa (tahap 5) yang lebih tinggi dibandingkan sampel SPH yang diisolasi melalui pengamatan Giemsa. Hasil flow cytometry menunjukkan nilai MFI NKp46 yang berbeda signifikan pada kedua sampel, dengan keberadaan reseptor aktivasi NKp46 yang lebih tinggi dijumpai pada sampel isolasi di hari ke-35. Hal ini disebabkan oleh aktivitas ROS pada kultur SPH dan regulasi mikroRNA. Oleh karena itu, sampel SPH yang dikultur dan sampel SPH yang baru diisolasi mampu menghasilkan populasi sel NK yang dewasa.

---

Natural Killer (NK) cells are cytotoxic-granule-releasing cells which lysis intracytoplasmic pathogens (ie. virus or bacteria infection) and tumor/ cancer cells as part of innate immunity. NK cells originate from differentiation of hematopoietic stem cells (HSCs) in the Common Lymphoid Progenitor (CLP) pathway. HSCs can be obtained from umbilical cord blood, with a higher number of HSCs than bone marrow. Various differentiation protocols have been reported with different NK cell yields and phenotypes obtained. Comparative studies on the effectiveness of NK cell differentiation with cultured HSC samples and freshly isolated HSC are still minimal. The aim of this study was to compare the different stages of NK cell differentiation maturation produced between cultured and newly isolated SPH samples using a modified protocol of Dezell et al. using interleukin-2 (IL-2) in the absence of feeder cells. For expanded HSC samples, cultures were carried out for two weeks before differentiation. The results of the differentiation culture for five weeks were then analyzed using flow cytometry to determine the presence of NKp46 receptors, Giemsa observations to determine the stages of NK cell maturation, and qRT-PCR to determine the expression of perforin and granzyme B genes. The results show that cultured HSC samples can produce a higher number of NK cells with a more mature stage than freshly isolated HSC samples by Giemsa's observations which showed the presence of NK cells at stages 5. The results of flow cytometry showed that the MFI NKp46 values ​​were significantly different in the two samples, with a higher NKp46 activation receptor found in the isolated samples on day 35. This is due to ROS activity on SPH culture and microRNA regulation. Therefore, the cultured HSC samples and freshly isolated HSC samples were able to produce mature NK cell populations."

"This book will cover primary roles of NKT cells in immunity to cancer, in both mouse tumor models and cancer patients. There are several chapters describing general aspects of NKT cells."