Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

"Enzim glucose oxidase (GOX) telah dikenal lama sebagai bahan baku biosensor glukosa. Enzim GOX mengkatalisis reaksi oksidasi dari β-D-glucose menjadi D-glucono-δ-lactone dan hidrogen peroksida (H2O2) dengan menggunakan oksigen sebagai akseptor elektron. Klona gen GOX yang berasal dari Aspergillus niger di dalam vektor ekspresi Saccharomyces cerevisiae INVSc1 pYES2/CT telah berhasil di dapatkan pada penelitian sebelumnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengekspresikan gen GOX rekombinan di dalam S. cerevisiae INVSc1. Plasmid rekombinan pYES2/CT yang mengandung gen GOX berhasil ditransformasi ke dalam S. cerevisiae INVSc1 menggunakan metode LiAc. Protein total diekstraksi menggunakan berbagai variasi metode. Metode vortex dengan penambahan glass beads sebagai teknik ekstraksi yang optimal. Protein rekombinan diinduksi dengan konsentrasi induser 2, 4 dan 8% galaktosa. Hasil induksi ekspresi protein tidak terlihat secara jelas, walaupun kemungkinan besar protein rekombinan GOX terdapat pada fase supernatan. Berdasarkan uji menggunakan glucose assay dan analisis biosensor glukosa, protein rekombinan GOX induksi dengan 8% galaktosa selama 48 jam mempunyai aktivitas lebih tinggi dibandingkan GOX komersial. Pada masa datang, perbaikan perlu dilakukan untuk mendapatkan hasil ekspresi protein GOX rekombinan yang optimal. ......Glucose oxidase (GOX) enzyme has been applied as a raw material glucose biosensor. GOX enzyme catalyses the oxidation of β-D-glucose into D-glucono-δ-lactone and hydrogen peroxide (H2O2) using oxygen as an electron acceptor. Previously, GOX gene from Aspergillus niger was successfully cloned into Saccharomyces cerevisiae expression vector, pYES2/CT. The purpose of this study was to express recombinant GOX gene in S. cerevisiae INVSc1. Recombinant plasmid pYES2/CT containing GOX gene was successfully transformed into S. cerevisiae INVSc1 using the LiAc method. Then the total proteins were extracted using various protocols with glass beads lyses method as the optimal extraction technique. The recombinant protein was induced by of 2, 4 and 8% galactose inducer. However induced expression of this protein was not significantly observed, although it was shown that recombinant GOX protein was likely to be present in the supernatant phase. Based on glucose liquid assay and a preliminary glucose biosensor analysis, the recombinant GOX protein induced with 8% galactose for 48 hours had a higher activity than commercial GOX. In the future, further improvements need to be done to obtain optimal recombinant GOX protein expression."

"Diabetes melitus merupakan penyakit yang disebut sebagai silent killer karena tidak menunjukkan gejala pada tahap awal. Diabetes melitus mempunyai nilai prevalensi yang tinggi dan akan meningkat setiap tahunnya. Kasus diabetes melitus yang paling umum adalah T2D yang mencapai lebih dari 90% dari total kasus diabetes. T2D merupakan penyakit kronis yang tidak dapat disembuhkan, tatapi dapat dicegah dan dikendalikan jika gejalanya dikenali sejak dini. Pemantauan kadar glukosa darah menjadi sangat penting untuk mengendalikan T2D. Penelitian ini membahas metode penentuan glukosa secara non-enzimatik dengan biosensor elektrokimia yang dikembangkan dengan Glassy Carbon Electrode (GCE) yang dimodifikasi menggunakan komposit oksida logam seperti CuO dan ZnO serta Multi Walled Carbon Nano Tube (MWCNT). Penelitian dilakukan dengan menggunakan empat langkah yang terdiri dari preparasi nanokomposit, modifikasi GCE dengan nanokomposit CuO/ZnO/MWCNT, pemeriksaan aktivitas elektrokimia, dan karakterisasi material dengan menggunakan SEM dan Raman spectroscopy. Cyclic voltammetry (CV) digunakan untuk menentuk sensitivitas, Limit of Detection (LOD), rentang linier, dan stabilitas dari biosensor. Pengujian selektivitas dari biosensor dilakukan dengan menggunakan zat pengganggu yang ada di dalam tubuh seperti citric acid, ascorbic acid, dan uric acid. Hasil menunjukkan bahwa biosensor mempunyai nilai sensitivitas sebesar 2,45 μAmM−1cm−2 dengan LOD sebesar 0,77 mM. Selektifitas biosensor termasuk kurang baik karena terpengaruh terhadap ascorbic acid dan uric acid. Biosensor dapat mempertahankan 91% performa awal setelah digunakan sebanyak 30 cycle.......Diabetes mellitus is a disease called a silent killer because it does not show symptoms in the early stages. Diabetes mellitus has a high prevalence value and will increase every year. The most common case of diabetes mellitus is T2D which accounts for more than 90% of total diabetes cases. T2D is a chronic disease that cannot be cured but can be prevented and controlled if symptoms are recognized early. Monitoring blood glucose levels is very important to control T2D. This study discusses the method of determining glucose non-enzymatically with an electrochemical biosensor developed with Glassy Carbon Electrode (GCE) modified using metal oxide composites such as CuO and ZnO and Multi-Walled Carbon Nano Tube (MWCNT). The research was conducted using four steps consisting of nanocomposite preparation, modification of GCE with CuO/ZnO/MWCNT nanocomposites, examination of electrochemical activity, and material characterization using SEM and Raman spectroscopy. Cyclic voltammetry (CV) was used to determine the sensitivity, Limit of Detection (LOD), linear range, and stability of the biosensor. Selectivity testing of the biosensor was carried out using interfering substances in the body such as citric acid, ascorbic acid, and uric acid. The results showed that the biosensor had a sensitivity value of 2.45 μAmM-1cm-2 with a LOD of 0.77 mM. The selectivity of the biosensor is not good because it is affected by ascorbic acid and uric acid. The biosensor can maintain 91% of the initial performance after being used for 30 cycles."