Lakase (EC 1.10.3.2) adalah enzim yang dapat mengkatalisis reaksioksidasi dari substrat yang kaya akan elektron seperti guaiakol. Lakasemenggunakan oksigen sebagai oksidan sehingga senyawaan fenolik menjadiradikal fenoksi yang akan menghasilkan reaksi coupling oxidative membentukpolimer fenolik. Isolasi enzim lakase dilakukan dari jamur Phellinus gilvusyang merupakan jamur pelapuk putih. Enzim kasar yang diperoleh memilikiaktivitas spesifik sebesar 15,02 unit/mg protein. Hasil reaksi guaiakol yangdikatalisis lakase (ekstrak kasar), selanjutnya diekstraksi dengan etil asetatdan didapatkan cairan kental berwarna merah seberat 3,81 gram (4,28%).Analisis dengan KLT silika gel menghasilkan 4 bercak dengan Rf 0,20; 0,46;0,57 dan 0,63. Senyawaan hasil reaksi dimurnikan dengan menggunakankromatografi kolom silika gel. Didapatkan kristal hasil reaksi yang berwarnaputih kecoklatan dengan titik leleh 84 – 85 oC. Analisis lanjutan terhadapkristal hasil reaksi menggunakan spektrofometer UV, FTIR dan GCMSmenunjukkan nilai m/z = 246, yang dibandingkan dengan databasemenunjukkan bahwa kristal hasil reaksi adalah senyawa 4,4’ – biguaiakol.Senyawa hasil reaksi diuji aktivitas antioksidannya menggunakan metodableaching b-karoten. Hasil pengujian menunjukkan aktivitas senyawa hasilreaksi lebih kuat dibandingkan dengan senyawa asalnya yaitu guaiakol. |