Konstruksi Vektor Rekombinan pembawa Fragmen 140 pb Gen h5 Avian Influenza Virus A Subtipe H5N1
(Universitas Indonesia, 2008)
|
Diagnosis infeksi avian influenza virus (AIV) subtipe H5N1 denganteknik RT PCR dapat menghasilkan spesifisitas hingga 90%. Kendala yangdihadapi dalam implementasi teknik tersebut yaitu keterbatasan spesimenpasien maupun partikel virus hasil teknik kultur yang digunakan sebagaikontrol positif. Produksi RNA sintetik menggunakan teknik transkripsi in vitromemberikan suatu solusi untuk mengatasi masalah tersebut. Penelitiandilakukan di laboratorium Institute of Human Virus and Cancer Biology ofUniversity of Indonesia (IHVCB-UI) selama 8 bulan (Januari--Agustus 2008).Tujuan penelitian mengkonstruksi vektor pBluescript KS (+/-) rekombinanpembawa fragmen 140 pb gen hemaglutinin (h5) AIV sehingga dapatdigunakan sebagai pola cetak transkripsi in vitro. Sumber gen diperoleh darihasil RT PCR RNA AIV A subtipe H5N1 tahun isolat 2006. Fragmen HA (140bp) kemudian diamplifikasi dengan teknik PCR menggunakan cetakan cDNAtersebut. Produk hasil PCR kemudian diligasi secara blunt end padapBluescript KS (+/-) yang memiliki promotor T7 RNA polimerase. IdentitasDNA sisipan dan orientasi dianalisis dengan teknik hot star PCR. FragmenRNA sintetik telah diproduksi dengan transkripsi in vitro menggunakancetakan pBluescript II KS (+/-) rekombinan hasil konstruksi. Molekul DNAcetakan kemudian dihilangkan dengan DNase free RNase dan produk RNAsintetik diverifikasi dengan teknik RT PCR dan hot star PCR untuk deteksiDNA dan RNA. Hasil penelitian menunjukkan bahwa vektor pBluescript KSKonstruksi vektor..., Aditya Perkasa, FMIPA UI, 2008iv(+/-) rekombinan pembawa fragmen 140 pb gen h5 AIV telah berhasildisisipkan dalam orientasi yang diharapkan untuk transkripsi in vitro untaiRNA sintetik dengan T7 RNA polimerase. |
S31482-Aditya Perkasa.pdf :: Unduh
|
No. Panggil : | S31482 |
Penerbitan : | [Place of publication not identified]: Universitas Indonesia, 2008 |
Program Studi : |
Bahasa : | ind |
Sumber Pengatalogan : | |
Tipe Konten : | |
Tipe Media : | |
Tipe Carrier : | |
Deskripsi Fisik : | xi, 102 hlm. : ill. ; 28 cm. |
Naskah Ringkas : | |
Lembaga Pemilik : | Universitas Indonesia |
Lokasi : | Perpustakaan UI, Lantai 3 |
No. Panggil | No. Barkod | Ketersediaan |
---|---|---|
S31482 | TERSEDIA |
Ulasan: |
Tidak ada ulasan pada koleksi ini: 20180984 |