Latar Belakang : Sebuah virus influenza baru berasal dari babi, muncul di AmerikaUtara pada tahun 2009, dengan cepat menyebar ke seluruh dunia dan mengakibatkanpandemi influenza A 2009. Virus ini diklasifikasikan sebagai subtipe H1N1 menurutantigenisitas dari hemaglutinin (HA) dan protein neuraminidase (NA). Pandemiinfluenza tahun 2009 yang disebabkan virus H1N1 telah berakhir. Namun,kemungkinan terjadinya gelombang pandemi (H1N1) 2009 kedua sulit diprediksi.Vaksin DNA merupakan pendekatan baru yang sangat menjanjikan untuk vaksinasi.Vaksin ini dapat merangsang respons imun dengan batas yang sangat luas termasukrespons antibodi, respon sel T sitotoksik dan sel T helper. Dalam penelitian ini,plasmid DNA yang mengekspresikan antigen HA dan NA dari virus H1N1diinjeksikan pada mencit Balb/C dengan berbagai komposisi dan lokasi injeksi.Imunisasi dilakukan pada mencit Balb/C untuk mengobservasi respon antibodi yangdihasilkan.Metode : Plasmid DNA yang mengekspresikan HA dan NA dan digunakan untukimunisasi mencit Balb/C pCDNA 3.1 diperbanyak dalam E.Coli Top 10 dandipurifikasi atau dimurnikan dengan menggunakan Qiagen Plasmid Purification.Mencit dibagi ke dalam 5 kelompok imunisasi, yaitu : kelompok pertama diimunisasidengan vaksin pcDNA3.1-HA/pcDNA3.1, kelompok kedua diimunisasi denganvaksin pcDNA 3.1-HA/pcDNA 3.1-NA yang dicampurkan, kelompok ketigadiimunisasi dengan vaksin pcDNA 3.1-NA/pcDNA3.1, kelompok keempatdiimunisasi dengan vaksin tunggal pcDNA 3.1-HA yang disuntikan pada paha kiridan pcDNA 3.1-NA pada paha kanan, kelompok kelima diimunisasi dengan kontrolpCDNA3.1. Respons antibodi spesifik terhadap HA diukur dengan metode ELISA.Hasil : Kelompok mencit Balb/C yang diimunisasi dengan vaksin pcDNA 3.1HA/pcDNA 3.1 dan pcDNA 3.1-HA/ pcDNA 3.1-NA menunjukkan kenaikan titerabtibodi yang signifikan setelah diimunisasi primer dan booster ke-3
ABSTRACT
Background : A new influenza virus originated in pigs, appeared in North America in2009, quickly spread throughout the world and cause pandemic influenza A 2009. Thevirus is classified as H1N1 subtype according to the antigenicity of the hemagglutinin(HA) and neuraminidase protein (NA). The 2009 influenza pandemic caused by the H1N1virus has ended. However, the possibility of a wave of H1N1 pdm 2009 is difficult topredict. DNA vaccines are a very promising new approach to vaccination. This vaccinecan stimulate an immune response with a very broad limits, including antibodyresponses, cytotoxic T cell responses and T helper cells. In this study, Plasmid DNAsespressing HA and NA antigen of influenza A H1N1 virus were injected into Balb/C micewith various compositions and site of injection. Immunization performed on Balb / Cmice was performed to observe specific antibody response towards.Methods : Plasmid DNAs expressing hemagglutinin and neuraminidase were used forBalb/C mice immunization transformed into a plasmid pCDNA3.1. Plasmid pCDNA 3.1that express hemagglutinin and neuraminidase propagated in E. coli Top 10 and purifiedusing Qiagen Plasmid Purification. Mice were divided into 5 groups of immunization,namely: the first group was immunized with pcDNA 3.1-HA/pcDNA 3.1 vaccine, thesecond group was immunized with pcDNA 3.1-HA/pcDNA 3.1-NA vaccine, The thirdgroup was immunized by pcDNA 3.1-NA/pcDNA 3.1 vaccine, fourth group were injectedby pcDNA 3.1-HA vaccine in the left thigh by and pcDNA 3.1-NA vaccine in the rightthigh and the fifth group immunized with the control pCDNA3.1.vaccine. HA-specificantibody responses measured by ELISA method.Results : The group of Balb / C mice which were immunized with pcDNA 3.1-HA/pcDNA3.1 and pcDNA 3.1-HA/pcDNA3.1-NA vaccines show an significantlyincrease antibody titer after primary immunization and third booster. |
T-Mohamad Rahmat.pdf :: Unduh