Cloning and expression of pab gene of M. tuberculosis isolated from pulmonary TB patient in E.coli DH5α

([Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Universitas Brawijaya. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam], 2011)

Latar belakang: Antigen38 Mycobacterium tuberculosis merupakan agen serodiagnostik yang potensial karena mengandung

dua epitop spesifik untuk sel B. Mahalnya agen diagnostik menyebabkan lambatnya realisasi diagnosis TB secara cepat di

negara berkembang. Kami memproduksi antigen 38 rekombinan yang berasal dari galur lokal yang kemungkinan dapat

digunakan untuk memproduksi alat serodiagnostik TB yang ekonomis.

Metode: Gen pab diisolasi dari pasien TB paru di Malang, diklon ke plasmid pGEM-Teasy menjadi pMB38. Klon E.coli

DH5α yang membawa pMB38 diseleksi di medium yang ditambah dengan X-Gal. Ekspresi pab dilakukan menggunakan

pMBhis yang berasal dari pPRoExHTc dibawah kontrol promoter Trc dengan inang E.coli DH5α

Hasil: Pencocokan sekuen gen pab dari klon E.coli DH5α berwarna putih dengan gen pab dari M. tuberculosisH37Rv

memperlihatkan homologi sebesar 98%. Protein rekombinan yang sudah dihilangkan signal peptidanya ditemukan di

sitoplasma.

Kesimpulan: Gen pab dari pasien TB dapat diekspresikan secara intraseluler dengan sistem heterolog

Abstract

Background: Mycobacterium tuberculosis antigen38 is a potent serodiagnostic agent containing two M. tuberculosisspecific

B-cell epitopes. The high price of imported diagnostic agents hinders realization of fast clinical TB diagnosis in

developing countries. Therefore, we produced recombinant antigen38 (recAg38M) from M. tuberculosis local strain, which

might be used to produce economical tuberculosis serodiagnostic kit.

Methods: Pab gene that was isolated from pulmonary TB patient in Malang was cloned into a plasmid vector (pGEMTeasy)

to construct pMB38. The E.coli DH5α clone carrying pMb38 was selected on X-gal medium. The expression of pab

was mediated using pPRoExHTc under the control of Trc promoter and E.coli DH5α as host.

Results: Alignment of the pab sequence from the white E.coli DH5α clones with that of M. tuberculosis H37Rv showed

98% homology. The recombinant protein in which the signal peptide has been deleted to prevent the protein being secreted

into medium was found in the cytoplasm.

Conclusion: pab gene of M. tuberculosis isolated from a TB patient could be expressed in heterologous system in E.

coliDH5α.

No. Panggil :	pdf







Penerbitan :	[Place of publication not identified]: [Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Universitas Brawijaya. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam], 2011

Sumber Pengatalogan :
ISSN :
Majalah/Jurnal :	Medical Journal of Indonesia
Volume :	Vol. 20, No. 4, November 2011: 247-254
Tipe Konten :
Tipe Media :
Tipe Carrier :
Akses Elektronik :	http://mji.ui.ac.id/v2/?page=journal.detail2&id=298
Institusi Pemilik :	Universitas Indonesia
Lokasi :	Fakultas Kedokteran UI

No. Panggil	No. Barkod	Ketersediaan
pdf		TERSEDIA

Ulasan:

Tidak ada ulasan pada koleksi ini: 20333165

:: Artikel Jurnal :: Kembali