ABSTRAK
Penyakit Dengue adalah penyakit infeksi akibat virus dengue yang memilikimanifestasi klinis mulai dari demam ringan hingga berat seperti demam berdarahdan sindrom renjatan dengue. Patogenesis dengue sampai saat ini belumsepenuhnya diketahui. Ada dua faktor utama yang mempengaruhi manifestasiklinis, yaitu adanya variasi serotipe virus dengue (DEN-1, DEN-2, DEN-3, danDEN-4) dan faktor pejamu, yaitu peranan imunitas yang diantaranya diperantaraioleh sel fagosit mononuklear. Pada penelitian ini kemampuan empat serotipe virusdengue untuk menginduksi respon imun dilihat dengan memaparkan ke empatserotipe virus dengue dengan sel imun yang berasal dari manusia sehat berupamakrofag yang berasal dari monosit (monocyte derived macrophages atau MDM)dan peripheral blood mononuclear cells (PBMC) dan kemudian diukur ekspresidelapan macam sitokin/kemokin. Penelitian diawali dengan isolasi PBMC daridarah vena dengan menggunakan metode sentrifugasi gradien menggunakanFicoll. MDM dideferensiasi dari monosit menggunakan faktor pertumbuhan MCSF.MDM dan PBMC yang diperoleh kemudian dipaparkan berbagai serotipevirus dengue. Replikasi virus diukur dengan metode plaque assay dan pengukurankadar NS1 dengan cara ELISA. Ekspresi sitokin/kemokin dianalisa menggunakanLuminexTM microbead assay. Hasil penelitian menunjukkan adanya perbedaanpola ekspresi sitokin/kemokin akibat paparan ke empat serotipe virus pada MDM,di mana DEN-1 menunjukkan kecenderungan untuk menginduksi ekspresisitokin/kemokin lebih cepat dan lebih tinggi dibandingakan serotipe lain. Analisastatistik pada PBMC menunjukkan adanya perbedaan kinetika ekspresi yangsignifikan pada sitokin IL-10 pada 24 jam pasca infeksi dan kemokin IP-10 pada36 dan 60 jam pasca infeksi. Sebagai kesimpulan, pada penelitian inidiperlihatkan adanya perbedaan pola kinetik ekspresi sitokin/kemokin keempatserotipe virus dengue baik pada MDM dan PBMC.
ABSTRACT
Dengue is a disease caused by dengue virus infection, which has clinicalmanifestations ranging from mild fever to severe forms such as the denguehaemorrhagic fever and dengue shock syndrome. The pathogenesis of dengueinfection is not fully known. There are two main factors that influence clinicalmanifestations. The first is the virus factor which represented by the variation ofdengue virus serotypes (DEN-1, DEN-2, DEN-3, and DEN-4) and the secondfactor is the host factors, which mainly involved the host’s immunity mediated byimmune cells such as the mononuclear phagocytic cells. In this study, the abilityof the four serotypes of dengue virus to induce immune response was studied byinfecting the four serotypes of dengue virus into healthy human macrophagesderived from monocytes (monocyte-derived macrophages or MDM ) andperipheral blood mononuclear cells (PBMC). The expressions of eightcytokines/chemokines were measured. Isolation of PBMCs was performed usingFicoll gradient centrifugation. MDMs were differentiated from monocytes usingthe growth factor M-CSF. MDM and PBMCs obtained were infected with variousserotypes of dengue virus. Viral replication was measured by plaque assaymethods and NS1 ELISA. Expressions of cytokines/chemokines were analyzedusing LuminexTM microbead assay. The results showed differences in theexpression patterns of cytokines/chemokines into four serotypes of the virus inMDM, in which DEN-1 induced the expression of cytokine/chemokines faster andat higher levels compared to other serotypes. While virus infection in PBMCsshowed significant differences in the kinetics of expression of cytokines IL-10 at24 hours post-infection and the chemokine IP-10 at 36 and 60 hours postinfection. In conclusion, this study observed different patterns ofcytokine/chemokines expression in response to four serotypes of dengue virusboth in MDM and PBMCs. |
Winda Yulia.pdf :: Unduh