Potensi derivat andrografolid sebagai antiplasmodium kajian toksisitas dan target kerjanya pada status oksidatif P falciparum in vitro = Potency of andrografolid derivate as an antiplasmodium toxicity analysis and the target mechanism of P falciparum oxidative status in vitro / Ni Luh Putu Eka Kartika Sari

Ni Luh Putu Eka Kartika Sari, author

Potensi derivat andrografolid sebagai antiplasmodium kajian toksisitas dan target kerjanya pada status oksidatif P falciparum in vitro = Potency of andrografolid derivate as an antiplasmodium toxicity analysis and the target mechanism of P falciparum oxidative status in vitro / Ni Luh Putu Eka Kartika Sari

Ni Luh Putu Eka Kartika Sari; Melva Louisa, examiner; Puji Budi Setia Asih, supervisor; Instiaty, examiner; Hendri Astuti, examiner; Ani Retno Prijanti, examiner ([Publisher not identified] , 2015)

Abstrak

[ABSTRAK

Latar belakang: Salah satu tantangan terbesar dalam upaya pengobatan malaria adalah

terjadinya penurunan efikasi pada penggunaan obat antimalaria, seperti kasus resistensi.

Kejadian resistensi terhadap beberapa jenis obat mendorong penemuan obat antimalaria

baru terus dilakukan. Beberapa studi yang telah dilakukan menyebutkan bahwa

andrografolid (ANDRO) memiliki efek sebagai antimalaria. Dehidroksiandrografolid

(DeOH-AND) adalah senyawa yang memiliki kemiripan struktur dengan ANDRO.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek DeOH sebagai antiplasmodium dan

mekanisme kerjanya.

Metode: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan teknik in vitro. Pada

penelitian ini digunakan galur parasit Plasmodium falciparum 3D7 (chloroquine

sensitive). Percobaan dilakukan untuk menjawab tiga tujuan penelitian; pertama

bertujuan untuk mengetahui potensi DeOH-AND sebagai antiplasmodium dengan

melakukan uji IC50, uji hambatan bergantung stadium parasit dan melihat morfologi sel

parasit menggunakan mikroskop cahaya dan TEM (Transmission Electron Microscope).

Kedua bertujuan untuk mengetahui efek sitotoksik DeOH-AND terhadap sel mamalia

yang diujikan pada sel hati galur sel HepG2 dan sel darah merah. Ketiga, bertujuan untuk

mempelajari pengaruh DeOH-AND terhadap status oksidatif parasit dilihat dari kadar

ROS intraseluler parasit, rasio GSH/GSSG dan aktivitas enzim SOD.

Hasil: DeOH-AND memiliki aktivitas antiplasmodium dengan nilai IC50 sebesar 4 μM

sedangkan kontrol klorokuin yang digunakan memiliki nilai IC50 sebesar 0.06 μM

(60x10-9 M). Kedua senyawa ini dapat menghambat pertumbuhan sel parasit pada stadium

ring, tropozoit dan skizon. Hasil pengamatan menggunakan mikroskop cahaya dan TEM

mempelihatkan kerusakan pada sel parasit bila dibandingkan dengan kontrol. Senyawa

DeOH-AND tidak toksik terhadap sel hati (HepG2) dengan nilai CC50 yakni 394.67 μM

serta tidak toksik pada sel darah merah. Hasil percobaan bagian ketiga menunjukkan

bahwa DeOH-AND tidak mempengaruhi kadar ROS, rasio GSH/GSSG serta aktivitas

enzim SOD.

Kesimpulan: Senyawa DeOH-AND memiliki potensi sebagai antiplasmodium dan tidak

memiliki efek toksik terhadap sel mamalia baik hati (HepG2) dan sel darah merah.

DeOH-AND tidak mempengaruhi status oksidatif parasit secara signifikan.

ABSTRACT

Background: One of the biggest challenges in malaria treatment is the occurrence of

decreasing efficacy on antimalarial drugs like resistancy cases. Insidence of some drug

resistance encourages the new antimalarial drugs continue to discover. Severeal studies

mentioned that andrographolide (ANDRO) has an antimalarial effect.

Dehidroksiandrographolide (DeOH) is a compound which has structural similarities with

ANDRO. This study aims to determine the effect of DeOH as antiplasmodium and its

mechanism.

Methods: This is an experimental study using in vitro techniques. In this study were used

Plasmodium falciparum 3D7 strains (chloroquine sensitive). The experiments has three aims;

the first part was aimed to known about the potential of DeOH-AND as an antiplasmodium

using IC50 assay technique, stage dependent antiplasmodium activity, and analyse the P.

falciparum morphology using light microscope and TEM (Transmission Electron

Miscroscope) technique. The second parts was aimed to investigate the cytotoxic effect of

DeOH-AND on mamalian cell (hepar cell-HepG2 and red blood cell). And the third aims is

to investigate the effect of DeOH-AND on parasite oxidative stress status with analyse the

intracellular ROS (Reactive Oxygen Species) concentration, GSH/GSSG ratio and SOD

(Superoxide Dismutase) enzyme activity.

Results: DeOH-AND has antiplasmodium activity with IC50 value of 4 μM whereas

chloroquine has IC50 values of 0.06 μM (60x10-9M). These compounds was found to inhibit

the ring, tropozoit and skizon stage of the parasite. Treated P. falciparum 3D7 parasites show

the crisis of their morphology cell which compared with untreated parasites (control). DeOHAND

is not toxic to liver cells (HepG2) with CC50 values 394.67 and also not toxic to red

blood cells which were seen from the results of hemolysis potential test. DeOH

antiplasmodium effect were seen on all stage of the parasite (either ring, trophozoit and

schizont) and caused parasite cell damage effect activity at all stages of the parasite (either

ring, trophozoit and schizonts) and shown to cause damage. The third experiment showed that

DeOH-AND did not affect the intracellular ROS (Reactive Oxygen Species) concentration,

GSH/GSSG ratio and also SOD enzyme activity.

Conclusions: DeOH compounds has antiplasmodium activity. These compound has no toxic

effect on both of the liver cells (HepG2) and red blood cells. DeOH-AND did not affect parasit

oxidative status with significantly, Background: One of the biggest challenges in malaria treatment is the occurrence of