ABSTRAK
Senyawa-senyawa fenolik seperti kelompok senyawa flavonoid dan stilben dilaporkanmengandung gugus isoprenil. Penambahan substituen isoprenil pada berbagai kerangkasenyawa turunan fenol meningkatkan bioaktivitas secara signifikan dibandingkansenyawa fenol sejenis yang tidak terprenilasi. Tanaman melinjo (Gnetum gnemon L.)dilaporkan memiliki kandungan senyawa stilbenoid (Stilben terhidroksilasi) sepertiresveratrol (3,5,4?-trans-trihidroksi-stilben) dan gnetol (2,3?,5?,6-tetra hidroksi transstilben)yang merupakan monomer stilbenoid. Tujuan dari penelitian ini adalah untukmemperoleh produk reaksi katalisis berupa senyawa prenil resveratrol dari isolat kulitmelinjo dengan potensi bioaktivitas sebagai antikanker. Katalis superbasa-Al2O3/NaOH/Na yang digunakan, diperoleh dengan cara memanaskan campuranpadatan γ-Al2O3, NaOH dan logam Natrium pada suhu 400oC dan kondisi atmosfer gasNitrogen. Isolasi senyawa resveratrol dan turunannya dari ekstrak kulit melinjo dilakukanmelalui metode kromatografi kolom dengan menggunakan pelarut n-heksan, etil asetatdan methanol sebagai fasa gerak berdasarkan sistem gradien (peningkatan kepolaran).Reaksi katalisis prenilasi isolat kulit melinjo dilakukan berdasarkan model reaksiprenilasi resveratrol dengan pereaksi prenil bromida (3,3-dimetil alil bromida) dan katalissuperbasa -Al2O3/NaOH/Na. Berdasarkan hasil analisis XRD, padatanγ-Al2O3/NaOH/Na yang diperoleh memiliki karakter yang berbeda dengan padatanγ-Al2O3. Kondisi optimum reaksi katalisis prenilasi resveratrol ditentukan berdasarkanhasil analisis HPTLC, yaitu suhu 60oC dan waktu reaksi 4 jam.Hasil analisis LC/ESI-MSterhadap produk reaksi katalisis prenilasi resveratrol menunjukkan adanya puncak[M+H]+ dengan m/z 365,38 yang merupakan puncak ion dari senyawa resveratroltersubstitusi oleh 2 gugus prenil (C5H9-). Hasil analisis 1H-NMR menunjukkan bahwapenambahan 2 gugus prenil (C5H9-) terjadi pada gugus hidroksil (-OH) dari strukturresveratrol (O-prenilasi). Prenilasi menyebabkan terjadinya penurunan aktivitas radicalscavenger produk reaksi prenilasi resveratrol (IC50 = 102,75 ppm) bila dibandingkandengan substrat awal yaitu senyawa resveratrol (IC5= 63,52 ppm). Proses isolasi terhadapekstrak kulit melinjo melalui metode kromatografi kolom memperoleh tiga isolat.Analisis LC/ESI-MS terhadap isolat kulit melinjo memperlihatkan adanya kandungansenyawa resveratrol (m/z 229,26 [M+H]+), gnetol (m/z 245,28 [M+H]+), isorhapontigenin(m/z 259,23 [M+H]+) dan gnetifolin M (m/z 257,19 [M+H]+). Prenilasi isolat kulitmelinjo telah dilakukan berdasarkan model reaksi prenilasi resveratrol. Hasil analisisLC/ESI-MS menunjukkan adanya senyawa resveratrol (m/z 297,44 [M+H]+ danm/z 365,52 [M+H]+), gnetol (m/z 313,51 [M+H]+) serta isorhapontigenin (m/z 327,50[M+H]+) terprenilasi pada produk prenilasi isolat kulit melinjo. Aktivitas sitotoksikterhadap sel murine leukimia P-388 dari produk prenilasi isolat kulit melinjodikategorikan aktif (IC50 = 7,71 μg/mL) dan lebih tinggi dibandingkan dengan isolat kulitmelinjo (IC50 = 28,41 μg/mL).
ABSTRACT
Phenol derivatives such as flavonoid and stilbenes groups have been reported to possessisoprenoid group. The addition of isoprenyl substituents at various skeleton ofpolyphenols significantly increased its bioactivity compared to the parent compound.Melinjo (Gnetum gnemon L.) plant have been reported to contain stilbenoid(hydroxylated stilbenes) compounds such as resveratrol (3,5,4?-trans-trihydroxy-stilbene)and gnetol (2,3?,5?,6-tetra hydroxy trans-stilbene) that were stilbenoid monomeric.The objective of this study is to obtain the prenylated resveratrol with its bioactivity as ananticancer from melinjo peels isolate through catalysis reaction. The superbase catalyst-Al2O3/NaOH/Na was prepared by heating a mixture of γ-Al2O3, NaOH and sodiummetal at a temperature of 400 oC and under N2 atmosfer. Stilbenoid from melinjo peelsextract was isolated by coloumn chromatography with n-hexane, ethyl acetate andmethanol as mobile phase based on gradient system (increasing polarity).Catalysis reaction of prenylation of melinjo peels isolate was carried out by using prenylbromide (3,3-dimethyl allyl bromide) and superbase catalyst -Al2O3/NaOH/Na based onreaction model of prenylation of resveratrol. According to XRD analysis, the obtained ofsolid superbase γ-Al2O3/NaOH/Na showed a different characteristic compared toγ-Al2O3. The optimum condition catalysis reaction of prenylation of resveratrol wasdetermined using HPTLC analysis, at a temperature of 60oC for 4 hours. The results ofLC/ESI-MS analysis of the product showed the molecular ion peak at m/z 365.38[M+H]+ that indicated the presence of prenylated resveratrol with two prenyl (C5H9-)substituent. 1H-NMR spectrum of the product indicated that addition two prenylsubstituent occur at the hydroxyl group on the structure of resveratrol(O-prenylation). Prenylation caused decreasing free radical scavenging activity of theproduct (IC50 = 102.75 ppm) compared to resveratrol (IC50 = 63.52 ppm) and it meansthat the addition of prenyl substituents occurs through O-prenylation. Isolation ofstilbenoid from melinjo peels extract obtained 3 isolates using chromatographycoloumn.LC/ESI-MS analysis detected the presence of resveratrol (m/z 229.26 [M+H]+),gnetol (m/z 245.28 [M+H]+), isorhapontigenin(m/z 259.23 [M+H]+) and gnetifolin M(m/z 257.19 [M+H]+) in the melinjo peels isolate. Prenylation of melinjo peels isolate wascarried out based on reaction model of prenylation of resveratrol. The product ofprenylation showed the presence of prenylated resveratrol (m/z 297.44 [M+H]+ andm/z 365.52 [M+H]+), prenylated gnetol (m/z 313.51 [M+H]+) and prenylatedisorhapontigenin (m/z 327.50 [M+H]+) using LC/ESI-MS analysis. The cytotoxic activityagainst murine leukemia P-388 cells of the product of prenylation was classified as active(IC50 = 7.71 μg/mL) and higher than melinjo peels isolate (IC50 = 28.41 μg/mL). |
D2211-Tagor Marsillam Siregar.pdf :: Unduh