Hasil Pencarian  ::  Simpan CSV :: Kembali

Abstrak :
Tujuan penelitian adalah mengetahui aktivitas amilolitik 17 isolat Actinobacteria termofilik pada suhu tinggi, dan memperoleh informasi spesies, dan posisi filogenetik isolat potensial berdasarkan data sekuens gen 16S rRNA, analisis filogenetik, karakterisasi morfologi, fisiologi, dan biokimia. Kemampuan tumbuh 17 isolat Actinobacteria termofilik pada berbagai variasi suhu diuji menggunakan medium ISP 1 agar, dan diinkubasi pada suhu 45, 50, 55, 60 °C selama 7 hari. Berdasarkan hasil penelitian, 17 isolat memiliki pertumbuhan yang bervariasi pada suhu 45-60 °C. Tujuh belas isolat tumbuh pada suhu inkubasi 45 °C, 16 isolat pada suhu 50 °C, enam isolat pada suhu 55 °C, dan lima isolat pada suhu 60 °C terdiri atas SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, SL1-2-R-4, SL2-2-R-15, dan SL3-1-R-16. Aktivitas amilolitik 17 isolat Actinobacteria termofilik pada berbagai variasi suhu diuji dengan metode starch agar plate, menggunakan medium Minimal (Mm) agar dengan penambahan pati (soluble starch) sebagai substrat sebanyak 1% (b/v), dan diinkubasi pada suhu 45, 50, 55, dan 60 °C selama 7 hari. Aktivitas amilolitik yang positif ditandai dengan terbentuknya zona bening di sekitar koloni bakteri setelah diteteskan larutan Lugol's iodine sebanyak 1,5 ml. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebagian besar isolat yang diperoleh dari tanah di dekat geiser Cisolok memiliki aktivitas amilolitik yang bervariasi pada suhu 45-60 °C. Lima belas isolat memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 45 °C, 13 isolat pada suhu 50 °C, empat isolat pada suhu 55 °C, dan hanya tiga isolat pada suhu 60 °C. Namun demikian, dua isolat (SL2-2-R-15 dan SL3-1-R-16) tidak memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 45, 50, dan 55 °C setelah diinkubasi selama 7 hari. Tiga isolat potensial yang memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 60 °C (SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, dan SL1-2-R-4), berdasarkan data sekuens gen 16S rRNA, analisis filogenetik, dan karakterisasi fenotipik tiga isolat potensial tersebut diidentifikasi sebagai Actinomadura keratinilytica. ......The aims of this study were to screen for amylolytic activity of the 17 themorphilic Actinobacteria at high temperature, and to obtain species information and phylogenetic position based on 16S rRNA gene sequence, phylogenetic analysis, morphological, physiological, and biochemical characterizations. The ability to grow at various temperature was carried out on ISP 1 agar medium, incubated at 45, 50, 55, 60 °C for 7 days. The results showed that the 17 isolates Actinobacteria have varying growth at a temperature of 45-60 °C. Seventeen, 16, and six isolates grew at 45, 50, and 55 °C, respectively, and only five isolates grew at 60 °C, designated SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, SL1-2-R-4, SL2-2-R-15, and SL3-1-R-16. Amylolytic activity of the 17 themorphilic Actinobacteria at various temperature was carried out using the starch agar plate method on Minimal (Mm) agar medium with the addition of 1% (w/v) soluble starch as substrate, and incubated at 45, 50, 55, and 60 °C for up to 7 days. Amylolytic activity was detected by flooding the plates with 1.5 ml of Lugol's iodine solution. Clear zones around the colonies indicated positive results for amylolytic activity. The results showed that most of the isolates obtained from the soil near the Cisolok geyser have varying amylolytic activity at a temperature of 45-60 °C. In this study, 15, 13, four, and three out of 17 isolates were positive for amylolytic activity at 45, 50, 55, and 60 °C, respectively. Meanwhile, two isolates, designated SL2-2-R-15 and SL3-1-R-16, showed negative results for amylolytic activity at 45, 50, and 55 °C, even after 7 days of incubation. Three potential isolates which have amylolytic activity at 60 °C (designated SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, and SL1-2-R-4), based on 16S rRNA gene sequence, phylogenetic analysis, and phenotypic characterizations were identified as Actinomadura keratinilytica.

Abstrak :
Infeksi sistem saraf pusat SSP merupakan masalah yang sangat serius dalam bidang neurologi di seluruh dunia. Infeksi SSP biasanya diduga atas dasar presentasi klinis pasien, namun diagnosis berdasarkan gejala dan tanda klinis memiliki kelemahan, sehingga deteksi dan penatalaksanaan yang tidak tepat menyebabkan infeksi SSP berkembang cepat dengan morbiditas dan mortalitas yang tinggi. Pada penelitian ini, dari bahan cairan serebrospinal CSS akan dilakukan deteksi dan identifikasi bakteri dan virus guna mengetahui penyebab infeksi SSP. Penelitian ini menggunakan sisa sampel CSS dari pasien yang diperiksakan di laboratorium Departemen Patologi Klinik RSUPN CM dengan diagnosis berhubungan dengan infeksi/inflamasi. Spesimen CSS diperiksakan pewarnaan Gram langsung, biakan pada media agar, dan pendekatan molekular menggunakan primer gen 16S rRNA, lytA dan sebelas panel spesifik virus. Koloni yang tumbuh pada agar darah dilanjutkan dengan pemeriksaan pewarnaan Gram dan uji biokimia, serta MALDI-TOF-MS. Untuk bakteri, hasil kemudian dibandingkan, sedangkan untuk virus dilakukan analisis genomik.Dari 147 spesimen CSS, proporsi bakteri Streptococcus pneumoniae sebagai penyebab infeksi SSP dengan metode Gram langsung, biakan, dan qPCR adalah 0,7 dan dengan metode qPCR terget gen lytA saja adalah 2 , sedangkan proporsi virus dengan metode PCR adalah 4,1 . Berdasarkan identifikasi morfologi dan biokimia dari biakan yang tumbuh, berhasil didapatkan 1 isolat Streptococcus pneumoniae, 5 isolat Staphylococcus epidermidis, 1 isolat Staphylococcus saprophyticus, dan 1 isolat Streptococcus dysgalactiae. Berdasarkan hasil uji biokimia dan MALDI-TOF-MS, terdapat 1 isolat memiliki kesamaan jenis bakteri sampai tingkat spesies dan 8 isolat memiliki kesamaan pada tingkat genus. Streptococcus pneumoniae yang ditemukan adalah serotipe 6B, dan bersifat resistan terhadap oxacillin dan trimetoprim-sulfametoxazole. Untuk virus, terdeteksi 1 spesimen positif virus Influenza A dan 5 Herpes virus dari pemeriksaan terhadap 147 spesimen CSS. Analisis sekuens yang diperoleh menunjukkan bahwa virus Influenza tersebut adalah virus Influenza A subtipe H1N1, dan 5 Herpes virus adalah Human betaherpesvirus 5 strain HANSCTR2.Peran diagnostik 16S rRNA dalam deteksi infeksi bakteri pada CSS tidak dapat dinilai, namun penggunaan gen lytA untuk mendeteksi infeksi Streptococcus pneumoniae adalah lebih sensitif dibandingkan dengan biakan. Identifikasi bakteri menggunakan metode biakan-uji biokimia dan biakan-MALDI-TOF-MS memiliki tingkat kesesuaian yang baik sampai pada tingkat genus. Penggunaan primer spesifik virus mampu mendeteksi virus dari bahan CSS. Gambaran analisis CSS pada infeksi bakteri memiliki kesamaan dengan non-infeksi.

---

Central nervous system CNS infection is a very serious problem worldwide. The disesase is usually suspected based on patient 39;s clinical presentation, however this diagnosis has weaknesses, whereas an inaccuracy detection and management can cause high morbidity and mortality risk. This study aimed to detect and identify bacteria and virus from cerebrospinal fluid CSF, in order to determine the causes of CNS infection. This study investigated the remained CSF samples from patients examined at the laboratory of Clinical Pathology Department, Cipto Mangunkusumo hospital. The diagnosis or clinical information was related to infection or inflammation. The CSF specimens were examined by direct Gram staining, inoculated on blood agar media, and extracted for amplification using 16S rRNA, lytA and eleven viral specific primers. Colonies that grew on blood agar were stained and tested by biochemical tests, as well as MALDI-TOF-MS. For bacteria, all results were compared, and for the virus, the genomic sequence was analyzed. From 147 cerebrospinal fluid specimens, the proportion of Streptococcus pneumoniae as the etiology of CNS infection by using 3 methods direct Gram, culture, and qPCR lytA gene target was 0,7, while using qPCR lytA the proportion was 2. The proportion of virus by using PCR method was 4.1. Bacterial species isolated during culture on blood agar were Streptococcus pneumoniae 1 isolate, Staphylococcus epidermidis 5 isolates, Staphylococcus saprophyticus 1 isolate , and Streptococcus dysgalactiae 1 isolate. Based on biochemical and MALDI-TOF-MS test results, 1 isolate had the same type of bacteria to the species level and 8 isolates had similarity at the genus level. The serotypes of Streptococcus pneumoniae isolated from CSF were serotype 6B, and non-susceptible to oxacillin and trimethoprim-sulfamethoxazole. For the virus, 1 positive specimen of Influenza virus and 5 Herpes virus were detected. The sequence analysis of Influenza virus showed that the virus was Influenza A virus, subtype H1N1, and for 5 Herpes virus were Human betaherpesvirus 5 strain HANSCTR2. The use of 16S rRNA in the detection of bacterial infections in CSF could not be assessed, but the use of lytA gene in detecting Streptococcus pneumoniae showed higher senstivity compare to culture. Bacterial identification using biochemical methods and MALDI-TOF-MS had a reliable identification up to the genus level. The use of virus-specific primers was capable of detecting viruses from CSF materials. The CSF analysis on bacterial infections had similarities with non-infections.

Abstrak :
Tujuan penelitian adalah mengetahui aktivitas amilolitik 17 isolat 'Actinobacteria' termofilik pada suhu tinggi, dan memperoleh informasi spesies, dan posisi filogenetik isolat potensial berdasarkan data sekuens gen 16S rRNA, analisis filogenetik, karakterisasi morfologi, fisiologi, dan biokimia. Kemampuan tumbuh 17 isolat 'Actinobacteria' termofilik pada berbagai variasi suhu diuji menggunakan medium ISP 1 agar, dan diinkubasi pada suhu 45, 50, 55, 60 ^oC selama 7 hari. Berdasarkan hasil penelitian, 17 isolat memiliki pertumbuhan yang bervariasi pada suhu 45--60 ^oC. Tujuh belas isolat tumbuh pada suhu inkubasi 45 ^oC, 16 isolat pada suhu 50 ^oC, enam isolat pada suhu 55 ^oC, dan lima isolat pada suhu 60 ^oC terdiri atas SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, SL1-2-R-4, SL2-2-R-15, dan SL3-1-R-16. Aktivitas amilolitik 17 isolat 'Actinobacteria' termofilik pada berbagai variasi suhu diuji dengan metode 'starch agar plate', menggunakan medium Minimal (Mm) agar dengan penambahan pati ('soluble starch') sebagai substrat sebanyak 1% (b/v), dan diinkubasi pada suhu 45, 50, 55, dan 60 ^oC selama 7 hari. Aktivitas amilolitik yang positif ditandai dengan terbentuknya zona bening di sekitar koloni bakteri setelah diteteskan larutan 'Lugol's iodine' sebanyak 1,5 ml. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sebagian besar isolat yang diperoleh dari tanah di dekat geiser Cisolok memiliki aktivitas amilolitik yang bervariasi pada suhu 45--60 ^oC. Lima belas isolat memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 45 ^oC, 13 isolat pada suhu 50 ^oC, empat isolat pada suhu 55 ^oC, dan hanya tiga isolat pada suhu 60 ^oC. Namun demikian, dua isolat (SL2-2-R-15 dan SL3-1-R-16) tidak memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 45, 50, dan 55 ^oC setelah diinkubasi selama 7 hari. Tiga isolat potensial yang memiliki aktivitas amilolitik pada suhu 60 ^oC (SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, dan SL1-2-R-4), berdasarkan data sekuens gen 16S rRNA, analisis filogenetik, dan karakterisasi fenotipik tiga isolat potensial tersebut diidentifikasi sebagai 'Actinomadura keratinilytica'. ...... The aims of this study were to screen for amylolytic activity of the 17 themorphilic 'Actinobacteria' at high temperature, and to obtain species information and phylogenetic position based on 16S rRNA gene sequence, phylogenetic analysis, morphological, physiological, and biochemical characterizations. The ability to grow at various temperature was carried out on ISP 1 agar medium, incubated at 45, 50, 55, 60 ^oC for 7 days. The results showed that the 17 isolates 'Actinobacteria' have varying growth at a temperature of 45--60 ^oC. Seventeen, 16, and six isolates grew at 45, 50, and 55 ^oC, respectively, and only five isolates grew at 60 ^oC, designated SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, SL1-2-R-4, SL2-2-R-15, and SL3-1-R-16. Amylolytic activity of the 17 themorphilic 'Actinobacteria' at various temperature was carried out using the starch agar plate method on Minimal (Mm) agar medium with the addition of 1% (w/v) soluble starch as substrate, and incubated at 45, 50, 55, and 60 ^oC for up to 7 days. Amylolytic activity was detected by flooding the plates with 1.5 ml of Lugol's iodine solution. Clear zones around the colonies indicated positive results for amylolytic activity. The results showed that most of the isolates obtained from the soil near the Cisolok geyser have varying amylolytic activity at a temperature of 45--60° C. In this study, 15, 13, four, and three out of 17 isolates were positive for amylolytic activity at 45, 50, 55, and 60 ^oC, respectively. Meanwhile, two isolates, designated SL2-2-R-15 and SL3-1-R-16, showed negative results for amylolytic activity at 45, 50, and 55 ^oC, even after 7 days of incubation. Three potential isolates which have amylolytic activity at 60 ^oC (designated SL1-2-R-2, SL1-2-R-3, and SL1-2-R-4), based on 16S rRNA gene sequence, phylogenetic analysis, and phenotypic characterizations were identified as 'Actinomadura keratinilytica.'

Abstrak :
Penelitian untuk mengetahui keanekaragaman genetik bakteri dari usus ikan nila melalui teknik metagenom sequence-based telah dilakukan. Hasil amplifikasi gen 16S rRNA dari usus sebesar 1550 pb, kemudian dilakukan sequencing pada isolat dari Kolam Laboratorium PTPP, Serpong (L1, L2); Tambak Ikan Nila Salin, Karawang (Mu, Pu); dan KJA Waduk Cirata, Purwakarta (A1, C1). Identifikasi ke-6 isolat bakteri berdasarkan BLAST menunjukkan bahwa terdapat similaritas terhadap 4 spesies bakteri dengan nilai max identity tertinggi. Hasil analisis pohon filogenetik menggunakan metode neighbor-joining memperlihatkan bahwa isolat L1, L2 dan C1 diduga berkerabat dekat dengan bakteri Ochrobactrum anthropi, isolat A1 diduga berkerabat dekat dengan Lysinibacillus boronitolerans, isolat Pu diduga berkerabat dekat dengan Stenotrophomonas maltophilia, sementara isolat Mu diduga berkerabat dekat dengan Cetobacterium somerae. Berdasarkan hasil yang didapat, maka terbukti bahwa terdapat keanekaragaman gen 16S rRNA dari usus ikan nila yang dianalisis melalui teknik metagenom sequence-based. ......Research to know the genetic diversity of intestinal bacterias in Tilapia gut had been done using sequence-based metagenome. 16S rRNA gene amplification produced PCR fragment with 1550 bp length, then followed by sequencing of isolates from Outdoor Laboratory, Serpong (L1, L2); Saline Tilapia Ponds, Karawang (Mu, Pu); and Cirata Reservoir, Purwakarta (A1, C1). Identification six bacteria isolates based on BLAST showed that there are 4 different species of bacteria with the highest value of max identity. Phylogenetic analysis using neighbor-joining method showed that L1, L2, and C1 isolates is close relatives to Orchrobacterum anthropi, while A1 isolates is close relative to Lysinibacillus boronitolerans, Pu isolate is having close relationship with Stenotrophomonas maltophilia, and Mu isolates with Cetobacterium somerae. Thus, based on the results, it is proven that there is 16S rRNA gene diversity from tilapia intestines using metagenome sequence-based method.

Abstrak :
Rare-actinomycetes tersebar di berbagai habitat terutama di habitat ekstrem seperti kawasan geotermal. Penelitian mengenai rare-actinomycetes dilakukan terkait potensinya sebagai penghasil senyawa bioaktif baru yang bermanfaat dalam bidang kesehatan, industri dan farmasi. Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi dan mengkarakterisasi secara fenotip dan genotip rare-actinomycetes dari sampel tanah di bawah batuan kuarsa (S3.5.3) di hutan kawasan geotermal Cisolok. Metode pengayaan sampel tanah dilakukan menggunakan medium 10% R2A (Reasoner’s 2A) cair dengan penambahan cycloheximide 100 ppm dan sodium azide 60 ppm, kemudian diinkubasi pada suhu 30°C selama 30 hari. Isolasi rare actinomycetes dilakukan dengan metode membran filter dan spread pada medium 10% R2A gellan gum yang diinkubasi pada suhu 45°C. Karakterisasi dilakukan secara genotipik (berdasarkan data sequence gen 16S rRNA, analisis homologi sequence, dan rekonstruksi pohon filogenetik dengan metode Neighbour-Joining, Maximum Likelihood, dan Minimum Evolution); dan karakterisasi fenotipik (morfologi, fisiologi, dan biokimia). Sebanyak 26 isolat diperoleh dari sampel S3.5.3. Lima isolat dengan karakter morfologi actinomycetes yang diisolasi dari suhu 45°C dengan membran filter, dipilih untuk diidentifikasi. Hasil analisis sequence gen 16S rRNA dari lima isolat menunjukkan persentase homologi sebesar 95,46-99,56% terhadap Micromonospora yasonensis DS3186T. Berdasarkan hasil analisis filogenetik dengan metode Neighbour-Joining, kelima isolat memiliki hubungan kekerabatan terdekat dengan Micromonospora yasonensis DS3186T. Kelima isolat merupakan anggota class Actinomycetes, ordo Micromonosporales, family Micromonosporaceae. Karakter fenotipik kelima isolat sesuai dengan Micromonospora yasonensis sebagai spesies terdekatnya. Kelima isolat merupakan bakteri termotoleran (tumbuh pada suhu 30-45°C dan suhu optimum 40°C), aerobik, Gram positif, menghasilkan miselium substrat tanpa adanya miselium aerial, positif katalase, dan menghasilkan soluble pigment. Penelitian ini mengungkapkan bahwa Micromonospora yasonensis dapat ditemukan di kawasan geotermal dan berasosiasi dengan batuan kuarsa. ......Rare-actinomycetes are distributed in various habitats, particularly in extreme environments such as geothermal areas. Research on rare-actinomycetes focuses on their potential as producers of new bioactive compounds beneficial in health, industrial, and pharmaceutical fields. The aims of this study were to isolate and characterize rare-actinomycetes from soil samples beneath quartz rocks (S3.5.3) in the geothermal forest of Cisolok. Soil sample enrichment was performed using 10% R2A (Reasoner’s 2A) liquid medium supplemented with 100 ppm cycloheximide and 60 ppm sodium azide, incubated at 30°C for 30 days. Rare actinomycetes isolation was carried out using the membrane filter method and spread on 10% R2A agar with gellan gum, incubated at 45°C. Characterization included genotypic analysis based on the sequence of 16S rRNA gene, supported by phenotypic characterization (morphology, physiology, and biochemistry). A total of 26 isolates were obtained from sample S3.5.3. Five isolates with actinomycetes morphology isolated at 45°C using the membrane filter method were selected for characterization. Analysis of the 16S rRNA gene sequences from these five isolates showed homology levels of 95.46-99.56% to Micromonospora yasonensis DS3186T. Based on phylogenetic analysis using the Neighbour-Joining method, the five isolates were most closely related to Micromonospora yasonensis DS3186T. These isolates belong to the class Actinomycetes, order Micromonosporales, and family Micromonosporaceae. Phenotypic characteristics of the five isolates were consistent with Micromonospora yasonensis as their closest species. These isolates are thermotolerant bacteria (growing at temperatures of 30-45°C; optimum temperature 40°C), aerobic, Gram-positive, produce substrate mycelium without aerial mycelium, positive for catalase, and produce soluble pigment. This study reveals that Micromonospora yasonensis can be found in geothermal areas associated with quartz rocks.